H-4-Ⅱ-E大鼠肝癌细胞系 专业传代培养技术指导
厌氧肉肝汤培养基，英文名：Anaerobic Meat Liver Broth，用途：用于厌氧微生物的培养
LN-18细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
EU-4细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
2PK-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
JHH-7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
淀粉铵琼脂，英文名：Starch Ammonium Sulphate Agar(Krassilnikov, 1950)，用途：用于链霉菌属的培养鉴定
石蕊牛乳培养基，英文名：Litmus Milk Medium，用途：用于测定细菌对牛乳的发酵
MDCK(NBL-2)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；多角；细胞传代方法：1：2-1：6传代；2-3天换液1次。
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
DPD培养基，英文名：DPD Medium，用途：用于原生质体的培养
NCI-H1838[H1838]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MOPC细胞专业复苏；细胞生长特性：半贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人音猬因子(SHH)ELISA试剂盒，英文名：Human SHH ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4)ELISA试剂盒，英文名：Mouse MCP-4 ELISA Kit，规格：48T/96T
C-33 A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
HCC-95细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
乙醇酸盐肉汤，英文名：Thioglycollate Broth（Enriched），用途：不含指示剂，用于厌氧菌、需氧菌和微需氧菌的培养，每100ml添加化血红素溶液、维生素K1溶液各1支
酵母膏-麦芽膏琼脂，英文名：ISP Medium 2(Yeast Extract Malt Extract Agar)，用途：用于链霉菌属的培养鉴定
吡嗪酰胺酶检测酪蛋白大豆琼脂，英文名：Casein Digest Soybean Agar for Pzase Test，用途：用于吡嗪酰胺酶检测，溶解于Tris-马来酸缓冲液(0.2mol/L,pH6)中
小鼠P27蛋白(P27 protein)ELISA试剂盒，英文名：Mouse P27 protein ELISA Kit，规格：48T/96T
人N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒，英文名：Human NT-proBNP ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
人二酯酶4D(PDE4D)ELISA试剂盒，英文名：Human PDE4D ELISA Kit，规格：48T/96T
Bennett琼脂，英文名：Bennett Agar，用途：用于需氧放线菌孢子的产生
改良的酵母浸汁-孟加拉红肉汤，英文名：Modiffied Yeast Extract-Rose Benga Broth，用途：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增3～6次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2％～0.5％，肿瘤细胞可达3～5％；细胞接种2～3天分裂增殖旺盛，是活力Z好时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置5～10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入3～5ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上，2～4天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
阿须贝氏葡萄糖培养基，英文名：Ashby’S Glucose Medium，用途：用于固氮菌的培养
细胞背景资料：详见相关文献介绍
抗生素培养基A(PH7.9)，英文名：Medium A（PH7.9），用途：用于抗生素检测
K7M2wt细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KYSE-70细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCC 94[HCC941122]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
cos1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(色酸缺陷)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium without Trypt，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
营养肉汤(NB)，英文名：Nutrient Broth，用途：用于细菌的培养和增菌
麦芽汁琼脂基础，英文名：Malt Extract Agar Base，用途：含1.275%麦芽糖,不含霉素,每升培养基添加2.35g甘油
PE/CA-PJ34(Clone 12)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PE/CA-PJ34(Clone 12)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
BT-20细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2—1：4传代，2—3天换液一次
M9CA肉汤，英文名：M9CA Broth，用途：用于培养重组大肠杆菌菌株
滤膜肠球菌琼脂，英文名：Membrane-filter Enterococcus Selective Agar，用途：用于水或液体中肠球菌的滤膜法计数
气单胞菌鉴别琼脂，英文名：Aeromonas Differential Agar，用途：用于气单胞菌的分离和鉴别
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞培养中支原体污染的经验分享：支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%，支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，95%以上是以下四种支原体：口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)，为牛源性。以上是Z常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染;严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体Z突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如万古霉素等完全不敏感；对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体Z有YZ活性及常用于支原体感染ZL的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小YZ作用，所以常不用来作为支原体感染的化学ZL剂。
大鼠骨特异性碱性酶B(ALP-B)ELISA试剂盒，英文名：ALP-B ELISA Kit，规格：48T/96T
YPGA培养基，英文名：Yeast extract Peptone Glucose Medium，用途：用于甘蔗流胶病菌检验
麦氏(Meclary)琼脂，英文名：Meclary Agar，用途：用于真菌培养
大鼠延伸蛋白A(ELOA)ELISA试剂盒，英文名：ELOA ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠皮质醇结合球蛋白(CBG)ELISA试剂盒，英文名：CBG ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠胰蛋白酶(TRY)ELISA试剂盒，英文名：TRY ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞冻存的步骤：1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，10分钟)；2)去上清液，加入含20%小牛血清的完全培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为5×106～1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中，每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-80℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜，放入液氮罐)Z好;或者可以在4℃，2h;然后转到-20℃，2h;-80℃，2h;放入液氮罐；5)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，Z好取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
葡萄糖胰蛋白胨琼脂，英文名：Glucose Tryptone Agar，用途：用于嗜热菌芽孢计数
RKO-E6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
Wien 133细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RCSMC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SK-CO-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代，每周2-3次。
