RT-112人膀胱癌细胞系 专业传代培养技术指导
四号琼脂基础，英文名：No.4 Agar Base，用途：用于霍乱弧菌选择性分离,每200ml添加1支亚碲酸钾溶液
SK-LMS-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2-1：5传代，2-3天换液1次。
SIRC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HHL-5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PtK1(NBL-3)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
艾默生YpSs琼脂/酵母-淀粉琼脂，英文名：Emerson YpSs Agar/ Yeast protein Soluble starch Ag，用途：用于异水霉属及其他霉菌的培养
Eugon LT 100琼脂基础，英文名：Eugon LT 100 Agar Base，用途：用于中细菌总数的测定,每200ml添加1支吐温80
SEM细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
桔汁肉汤(10倍浓缩)，英文名：Orange Serum Broth Concentrate 10×，用途：用于耐酸细菌的培养
LTPEP-a-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OCI-LY18细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒，英文名：ACH ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠TATA盒结合蛋白相关因子4(TAF4)ELISA试剂盒，英文名：TAF4 ELISA Kit，规格：48T/96T
OVSAHO细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H889[H889]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
Schaedler肉汤，英文名：Schaedler Broth，用途：用于厌氧菌的增菌
胰蛋白示盐肉汤，英文名：Tryptose Phosphate Broth，用途：用于苛养菌的培养
酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)，英文名：Yeast Extract Peptone Dextrose Agar，用途：用于真菌计数
人热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒，英文名：Human HSP-40 ELISA Kit，规格：48T/96T
人胆囊收缩素八肽(CCK8)ELISA试剂盒，英文名：Human CCK8 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
人X-射线修复交叉互补蛋白5(XRCC5)ELISA试剂盒，英文名：Human XRCC5 ELISA Kit，规格：48T/96T
CDC厌氧菌琼脂基础，英文名：CDC Anaerobe Agar Base，用途：用于厌氧菌的分离培养,每100ml添加化血红素溶液和维生素K1溶液各1支,添加5-10%羊血(无菌脱纤维绵羊全血）
葡萄糖醋酸盐培养基，英文名：Dextrose Acetate medium，用途：用于真菌培养
贴壁细胞的消化方法介绍：1、胰酶。这是用得Z多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。优点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧，又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例，加1.5ml/孔)，2、再加0.5毫升4度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，3、轻轻吹打，细胞即完全脱落，4、按一定比例传代。
含糖牛肉汤培养基，英文名：Beef soup Medium with Lactose，用途：用于乳酸菌培养和鉴别
细胞背景资料：详见相关文献介绍
改良Letheen肉汤基础，英文名：Letheen Broth Base ,Modified，用途：用于卫生微生物检测,每200ml添加1支吐温80
MEF-11细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MCF 7B细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HNE2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HSC-5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
胰酪大豆胨琼脂培养基/大豆酪蛋白琼脂培养基，英文名：Soybean-Casein Digest Agar Medium，用途：用于无菌检查和细菌培养
BAT琼脂，英文名：BAT Agar，用途：用于脂环酸芽孢秆菌检验
萨氏液体培养基(SDY培养基)，英文名：Sabouraud Dextrose Medium with Yeast Extract，用途：——用于真菌的培养
BC-021细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BCECs细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BIC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
碎肉肉汤基础，英文名：Chopped Meat Broths（CM），用途：用于厌氧菌特别是专性厌氧菌的培养,含VK ,需添加庖肉牛肉粒
Bennett琼脂，英文名：Bennett Agar，用途：用于需氧放线菌孢子的产生
DG-18琼脂基础，英文名：Dichloran Glycerol Agar Base，用途：用于霉菌酵母菌和嗜渗酵母菌的计数,每升添加220g甘油
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，Z小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含10%甘油的完全培养基；包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200～400g离心5分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到Z小体积，不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到Z小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到Z小体积，不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
小鼠趋化因子(RANTES)ELISA试剂盒，英文名：Mouse RANTES ELISA Kit，规格：48T/96T
甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础(MYP)，英文名：Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin agar Base，用途：用于蜡样芽胞杆菌计数和分离,每100ml添加50%卵黄盐水悬液和多粘菌素B溶液各1支
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)(日本标准用)，英文名：Potato dextrose agar，用途：用于霉菌和酵母菌计数
小鼠嗜环蛋白/亲环素B(CYPB)ELISA试剂盒，英文名：Mouse CYPB ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒，英文名：GHbA1c ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠生长调节致癌基因β(GROβ)ELISA试剂盒，英文名：Mouse GROβ ELISA Kit，规格：48T/96T
造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Z常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验；2)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；3)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；4)不带手套，徒手操作；5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不好，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且好几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求高，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！
VRE琼脂基础，英文名：VRE Agar Base，用途：每升培养基添加1mg美罗培南和6mg万古霉素制成VRE′S
OCI-LY7细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
HELF细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
GIST-48细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KLE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代，3-4天换液一次
