VM-CUB1人膀胱癌细胞系 专业传代培养技术指导
抗生素培养基40号,英文名:Medium 40,用途:用于微生物方法测定抗生素效价
CCD-19Lu细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
COLO 320DM细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮+贴壁;细胞形态特性:淋巴细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
TE354.T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
HPAF2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NWRI琼脂/HPCA培养基,英文名:NWRI Agar/HPC Agar,用途:用于水中异养微生物的计数
BL琼脂基础,英文名:BL Agar Base,用途:用于双歧杆菌的分离和培养,需添加5%脱纤维马血
NCI-H2330[H2330]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
N6培养基(不含蔗糖和琼脂),英文名:N6 Medium without Agar and Sucrose,用途:适合于愈伤组织和悬浮细胞培养
CCD-18Co细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
EB2细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:4 X 105 cells/mL and maintain at between 4 X 105 and 1 X 106 cells/mL.,每2-3天换液
人细胞色素P450c21B/21-羟化酶(CYP21B)ELISA试剂盒,英文名:Human CYP21B ELISA Kit,规格:48T/96T
人γ谷酰半胱酸合成酶(γ-ECS)ELISA试剂盒,英文名:Human γ-ECS ELISA Kit,规格:48T/96T
B16-F1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
SBC-3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
麦康凯琼脂培养基(MacC),英文名:MacConey Agar Medium,用途:用于大肠菌群测定
改良DG-18琼脂基础,英文名:Dichloran Glycerol Agar Base,Modified,用途:用于霉菌酵母菌的计数,每升培养基中添加220g甘油
乳糖-明胶培养基,英文名:Lactose-Gelatin Medium,用途:用于产气荚膜梭菌的乳糖、明胶生化试验
人生长激素2(GH2)ELISA试剂盒,英文名:Human GH2 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠信号识别颗粒(SRP10)ELISA试剂盒,英文名:Mouse SRP10 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
大鼠孕酮受体(PGR)ELISA试剂盒,英文名:PGR ELISA Kit,规格:48T/96T
GAM肉汤,英文名:Glfu Anaerobic Medium Broth,用途:用于厌氧菌的培养
胆盐乳琼脂培养基(DHL),英文名:Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Medium,用途:用于肠道菌选择性分离
细胞冻存复苏材料与方法步骤:常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器,规格有35L和50L两种。使用时要注意以下几点:(1)一般两周需充液氮一次,至少一个月充氮一次。液氮温度达-196℃,使用时注意勿让液氮溅到皮肤上,以免引起冻伤。(2)液氮容器为双层结构,中间为真空层,瓶口有双层焊接处,应防止焊接部裂开。(3)在装入液氮时,要注意缓慢小心,并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导,使液氮直达瓶底,如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用,加液氮时更要缓慢,以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培养液,DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(121°C蒸气高压消毒),2mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×106~1×107/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,Z好取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
龙胆紫血液琼脂基础,英文名:Crystal Violet Blood Agar Base,用途:用于鼠疫杆菌的选择性培养,需添加无菌脱纤维绵羊全血
细胞背景资料:详见相关文献介绍
高氏合成一号琼脂培养基,英文名:Gauze’s Synthetic Agar Medium,用途:用于放线菌的培养
NCI-H522 [H522]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LC-1sq细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HFT-8810细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CHRF细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LB琼脂(Lennox),英文名:LB Agar,Lennox,用途:用于分子生物学中大肠杆菌的培养
毛藓菌琼脂3号,英文名:Trichophyton Agar #3,用途:用于毛藓菌属的鉴定
厌氧基础肉汤,英文名:Anaerobe Basal Broth,用途:用于厌氧菌尤其是拟杆菌的培养
MEG-01细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
COLO-678细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HLF-a细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。
PW(蛋白胨水),英文名:Peptone Water,用途:用于样品制备
葡萄糖半固体琼脂,英文名:Dextrose Semisolid Agar,用途:用于葡萄糖利用(产酸、产气)实验
肠球菌推定肉汤(EP肉汤),英文名:Enterococci Presumptive Broth,用途:——用于水中肠球菌的分离和鉴定
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞学在生命科学科中起着至关重要的作用,近年来细胞学蓬勃发展,并取得了重大的进展,细胞实验室的构建也是各个院校生物学科必备的实验室。细胞实验谨慎复杂,需要的实验设备种类繁多,下面就一些动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和YJ能力就显得尤为重要。纯水系统:细胞培养用水一般要求双蒸水,实际上普通蒸馏水经玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水是不能满足要求的,而且水中的内毒素直接参与细胞凋亡,血清中内毒素含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内毒素含量过高,会直接导致细胞提前老化。因此建议配置正式的水纯化系统。超净工作台/生物安全柜:细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。液氮罐:为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性。超低温冰箱:细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30min,转放-20℃ 1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。恒温水浴:从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。离心机:细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。移液器和细胞培养的大量耗材:细胞实验中有大量频繁的移液操作,因此各种微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各类细胞培养板、细胞培养瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量极大。除上述仪器外,高压灭菌锅、倒置显微镜也是细胞培养的必备仪器,发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
人核纤层蛋白A/C(LMNA)ELISA试剂盒,英文名:Human LMNA ELISA Kit,规格:48T/96T
葡萄糖蛋白胨肉汤,英文名:Dextrose Peptone Broth,用途:用于霉菌、酵母菌检测
MEB肉汤,英文名:MEB Broth,用途:用于真菌杀灭试验
小鼠粘蛋白/粘液素C(MUCC)ELISA试剂盒,英文名:Mouse MUCC ELISA Kit,规格:48T/96T
人血清/糖皮质激素调节激酶2(SGK2)ELISA试剂盒,英文名:Human SGK2 ELISA Kit,规格:48T/96T
人糖抗原125(CA125)ELISA试剂盒,英文名:Human CA125 ELISA Kit,规格:48T/96T
为什么培养的细胞要及时传代?体外培养的细胞大多具有生长接触YZ的特性,也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候,它就会停止生长,及时传代后,细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些?可能的原因有:更换了不同的培养液或血清;培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏;培养物中有少量细菌或真菌污染;试剂保存不当;比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清等,找出其它可能的原因。解决办法:增加起始培养细胞浓度;让细胞逐渐适应新培养液;换入新鲜配制培养液;补加谷酷肢或生长因子等;用无抗生素培养液培养,如发现污染,去弃培养物,或用抗生素CJ;血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存,并在2周内用完;分离培养物,检测支原体。冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化,特别注意,需残留一小块冰块,就可拿到超净工作台操作细胞,用75%酒精消毒冻存管,用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管爆裂。
MUGal肉汤基础,英文名:MUGal Broth Base,用途:用于大肠菌群快速检测。每100ml中添加0.5mg头孢磺啶
LTEP-α-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
HESMC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HMC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
TU212细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代