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So18小鼠骨骼肌成肌细胞系 专业传代培养技术指导

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  • So18小鼠骨骼肌成肌细胞系 专业传代培养技术指导
    抗生素培养基12号,英文名:Medium 12,用途:用于微生物方法测定抗生素效价
    NCI-H1703[H1703]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HK-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:4传代;2-3天换液1次
    LC-1sq细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    RIN-m5f细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    SS琼脂,英文名:Salmonella Shigella Agar,用途:用于肠道菌选择性分离
    0.1%蛋白胨水培养基,英文名:0.1% Peptone Water Medium,用途:用于样品制备
    RPMC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
    包姜氏琼脂培养基基础,英文名:Bordet-Gengou Agar Medium Base,用途:用于百日咳杆菌的分离,每100ml添加1支甘油、1支青霉素溶液和15ml 无菌脱纤维绵羊全血
    LP-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    GC-2 spd细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    小鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒,英文名:Mouse Hpt/HP ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠核糖核酸酶A(RNASEA)ELISA试剂盒,英文名:RNASEA ELISA Kit,规格:48T/96T
    H4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:3传代,每周换液2-3次。
    MC/CAR细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
    支原体固体培养基,英文名:Mycoplasma Agar Medium Base,用途:需添加马血清、MEM 培养液、青霉素
    乳酸菌霉素琼脂2,英文名:Lactobacillus Chloramphenicol Agar 2,用途:——用于干酪乳杆菌和乳酸片球菌的培养
    麦氏(Meclary)琼脂,英文名:Meclary Agar,用途:用于真菌培养
    小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒,英文名:Mouse sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠磷脂酰丝酸(PS)ELISA试剂盒,英文名:PS ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
    人游离前列腺特异性抗原(F-PSA)ELISA试剂盒,英文名:Human F-PSA ELISA Kit,规格:48T/96T
    PAC斜面培养基,英文名:PAC Slant Medium,用途:用于弧菌的保存
    Todd-Hewitt琼脂,英文名:Todd-Hewitt Agar,用途:用于链球菌培养,选择性添加红霉素等抗生素用于链球菌分离
    贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
    改良番茄汁琼脂培养基(改良TJA培养基),英文名:Tomato Juice Agar,Modified,用途:用于乳酸菌总数测定
    细胞背景资料:详见相关文献介绍
    Nitsch&Nitsch培养基,英文名:Nitsch&Nitsch Medium,用途:Nitsch & Nitsch (1969) 含蔗糖不含琼脂
    NHDF细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2传代
    BC-009细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    VK2/E6E7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    Huh-7.5.1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    乳酸菌霉素肉汤1,英文名:Lactobacillus Chloramphenicol Broth 1,用途:——用于干酪乳杆菌的培养
    BPLS琼脂,英文名:BPLS Agar,用途:用于样本中沙门氏菌的选择性分离
    Tergitol-7琼脂,英文名:Tergitol-7 Agar,用途:用于大肠菌群鉴定,每100ml添加2支0.05%TTC溶液
    HPAEpiC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HPAEpiC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HuCCT1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:4传代
    Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基基础,英文名:Karmali’s Campylobacter Medium,用途:用于弯曲菌的选择性分离培养,每100ml添加1支Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基添加剂(含头孢哌酮、化血红素、万古霉素)
    胰酪蛋白胨葡萄糖酵母浸粉牛肉浸粉培养基(TPGYB),英文名:Trypticase peptone Glucose Yeast Extract Beef,用途:用于肉毒梭菌增菌培养
    BCYE琼脂基础(BCYE鉴别琼脂基础),英文名:Buffered Charcoal Yeast Extract Agar Base,用途:用于军团菌选择性分离
    细胞形态特性:详见细胞说明书
    细胞的冻存:为避免污染造成的损失,Z小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到Z小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到Z小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到Z小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
    大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒,英文名:PAF ELISA Kit,规格:48T/96T
    解脲支原体肉汤基础,英文名:Ureaplasma urealyticum Broth Base,用途:用于解脲支原体培养,需添加尿素、小牛血清及YJ剂
    抗生素培养基5号,英文名:Medium 5(Streptomycin Assay Agar),用途:用于微生物方法测定抗生素效价
    人趋化因子CC受体8(CCR8)ELISA试剂盒,英文名:Human CCR8 ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠甲胎蛋白异质体L3(AFP.L3)ELISA试剂盒,英文名:AFP.L3 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠抗神经元核抗体1型(ANNA1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse ANNA1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间Z长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
    抗生素培养基B(PH7.3),英文名:Medium B(PH7.3),用途:用于抗生素检测,每100ml需添加1支吐温80
    AM-38细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
    DT40细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
    L428细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HCC-2185细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
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