VLcop人前列腺癌细胞系 专业技术指导 专注复苏
LK-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KYSE-70细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NUGC3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞的冻存：目前，细胞冻存Z常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，10分钟)。(2)去上清液，加入含20%小牛血清的完全培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为3×10(6)～1×10(7)/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装1～1.5mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入4℃冰箱中2～3小时，再移至冰箱冷冻室内3～4小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时，沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，Z好取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
8305C细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：6传代
Ramos-2G6-4C10细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法： 维持细胞浓度在2×105/ml-1×106/ml；根据细胞浓度每2-3天补液1次。
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
NIH3T3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
支原体培养基基础，英文名：Mycoplasma Medium Base，用途：需添加马血清、MEM 培养液、青霉素
蔗糖胰蛋白胨肉汤，英文名：Sucrose Tryptone Broth，用途：用于致病性嗜水气单胞菌的斑点酶联免疫试验
甘油甘酸琼脂基础，英文名：Glycerol glycine agar (Okazaki and Okami, 1976)，用途：用于链霉菌属的培养鉴定，每100ml添加2支甘油
精酸支原体琼脂培养基，英文名：Mycoplasma Agar Medium with Arginine，用途：——用于支原体的培养
细胞形态特性：详见细胞说明书
精酸葡萄糖斜面琼脂(AGS)，英文名：Arginine Glucose Slant Agar，用途：用于霍乱弧菌的复合生化试验
DTA培养基，英文名：DTA Medium，用途：用于乳与乳制品中嗜热需氧芽孢数的测定
CBRH 7919细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H250[H250]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OVTOKO细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse GLUT1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人GTP酶(KRAS)ELISA试剂盒，英文名：Human KRAS ELISA Kit，规格：48T/96T
化十六烷三甲铵琼脂培养基基础，英文名：Cetrimide Agar Base，用途：用于铜绿假单胞菌选择性分离,每100ml添加1ml甘油(甘油)
细胞背景资料：详见相关文献介绍
Z近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，1XPBS漂洗两次，加入1mlEDTA-Tripsin（100mm皿为例），37度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代Z重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理5-6min，C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落，2min足矣，P19Cl6和293细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
m-HPC琼脂，英文名：Heterotrophic Plate Count Agar，用途：用于菌落总数测定，每100ml培养基添加1ml甘油 (甘油)
阴沟肠杆菌分离琼脂(ECIA)，英文名：Enterobacter Cloacae Isolation Agar，用途：用于阴沟肠杆菌的分离
马铃薯葡萄糖半固体琼脂，英文名：Potato Dextrose Semisolid Agar，用途：用于椰毒假单胞菌酵米面亚种检验
Amies运送培养基，英文名：Amies Transport Medium，用途：用于致病菌标本的采集、运输和保存
SCC-15细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：4-1：8传代，2-3天换液1次。
NCI-H64[H64]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MES-SA/Dx5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样 ；细胞传代方法：1：2-1：8传代；每周2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
McA-RH7777细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hela 299细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HEK-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠谷酰胺合成酶(GS)ELISA试剂盒，英文名：GS ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PPARγC1α)ELISA试剂盒，英文名：PPARγC1α ELISA Kit，规格：48T/96T
人V-Jun肉瘤病毒癌基因同源物(C-jun)ELISA试剂盒，英文名：Human C-jun ELISA Kit，规格：48T/96T
含糖牛肉汤琼脂培养基(含碳酸)，英文名：Beef soup Agar Medium with Lactose and Calcium car，用途：用于乳酸菌计数
酵母菌形态琼脂，英文名：Yeast Morphology Agar，用途：用于酵母菌的形态学分类
m-TGE肉汤，英文名：m-TGE Broth，用途：用于滤膜法测定奶制品中的菌落总数
EC109细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
Colo357细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MC38细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮+贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠蛋白激酶YZ因子β(PKIb)ELISA试剂盒，英文名：Mouse PKIb ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠封闭抗体(APLA)ELISA试剂盒，英文名：Mouse APLA ELISA Kit，规格：48T/96T
人巨噬细胞炎性蛋白-4(MIP-4)ELISA试剂盒，英文名：Human MIP-4 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)ELISA试剂盒，英文名：PCSK9 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
人肌蛋白(MSC)ELISA试剂盒，英文名：Human MSC ELISA Kit，规格：48T/96T
普通肉汤，英文名：Routine Broth，用途：含0.1%二钾,用于致病性嗜水气单胞菌的增菌
Rustigian氏尿素培养液，英文名：Rustigian Urease Test Medium，用途：用于细菌尿素试验
抗生素培养基41号，英文名：Medium 41，用途：用于微生物方法测定抗生素效价
CDC厌氧菌琼脂基础，英文名：CDC Anaerobe Agar Base，用途：用于厌氧菌的分离培养,每100ml添加化血红素溶液和维生素K1溶液各1支,添加5-10%羊血(无菌脱纤维绵羊全血）
真杆菌选择性琼脂基础(ESA)，英文名：Eubacterium Selective Agar，用途：用于真杆菌的选择性分离
MC/CAR细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Primary Epidermal Keratinocytes细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：圆形；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
NR8383细胞专业复苏；细胞生长特性：半贴壁生长；细胞形态特性：巨噬细胞；细胞传代方法：1：2传代
RMD6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
乳糖发酵培养基/乳糖复发酵培养基，英文名：Lactose Broth，用途：乳糖复发酵培养基,用于大肠菌群的测定
H125细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HelaS3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KP-N-NS细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中Z常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度；黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率；真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。
Sf-21细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
