UACC812人乳腺导管瘤细胞系 专业技术指导 专注复苏
TR4912细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样 ；细胞传代方法：1：2传代
H9c2(2-1)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
CPAE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，Z近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
NCI-H1563[H1563]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MuM-2C细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
NCI-H1355[H1355]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
亚碲酸钾血琼脂基础，英文名：Blood Agar Base with Potassium Tellurite，用途：用于白喉杆菌分离培养,每90ml添加2支1%亚碲酸钾溶液和9ml 无菌脱纤维绵羊全血
改良McBride琼脂基础(MMA)，英文名：McBride Agar Base,Modified，用途：用于李斯特氏菌的选择性分离
动力-盐培养基(A法)，英文名：Power-nitrate Medium，用途：用于细菌动力和盐还原试验
胰化大豆坚固绿琼脂(TSAF)，英文名：Tryptic Soy Fast Green Agar，用途：用于滤膜法细菌总数测定
细胞形态特性：详见细胞说明书
1%吐温80-玉米琼脂培养基基础，英文名：1% Tween80-Corn Meat Agar Medium Base，用途：用于白色念珠菌产芽管试验,每100ml添加1ml吐温80(吐温80)
Middle Brook 7H10琼脂基础，英文名：Middle Brook 7H10 Agar Base，用途：用于分枝杆菌分离培养,每180ml添加1支甘油和4支Middlebrook OADC增菌液
SK-N-BE(2)-C细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PG49细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MGC-803细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代，2-3天换液一次
人传染性单核细胞增多症IgG(IM IgG)ELISA试剂盒，英文名：Human IM IgG ELISA Kit，规格：48T/96T
人线粒体解偶联蛋白2(UCP2)ELISA试剂盒，英文名：Human UCP2 ELISA Kit，规格：48T/96T
D2a培养基，英文名：D2a Medium，用途：用于原生质体的培养，需添加5%椰子乳
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，Z小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含10%甘油的完全培养基；包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200～400g离心5分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到Z小体积，不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到Z小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到Z小体积，不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
麦芽汁琼脂，英文名：Malt Extract Agar，用途：用于真菌的培养
Chapman Stone琼脂培养基，英文名：Chapman Stone Agar Medium，用途：用于金黄色葡萄球菌的分离培养
缓冲动力-盐培养基基础，英文名：Buffered Power-Nitrate Medium Base，用途：用于产气荚膜梭菌的盐还原试验,每200ml添加1支甘油
Leeming-Notman培养基基础，英文名：Leeming-Notman Medium，用途：用于马拉色菌的培养，每80ml添加1.6ml橄榄油
Mv1Lu(NBL-7)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CNE-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SHI-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OCM-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
C8166-CD4细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：2-3x10-5细胞/ml
RAW264.7[RAW264.7]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人间皮素(MSLN)ELISA试剂盒，英文名：Human MSLN ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP3β)ELISA试剂盒，英文名：Mouse MIP3β ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠谷酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒，英文名：GAD-Ab ELISA Kit，规格：48T/96T
抗生素培养基3号，英文名：Medium 3（Penassay Broth），用途：用于微生物方法测定抗生素效价
0.5%葡萄糖肉汤培养基，英文名：0.5% Glucose Broth Medium，用途：用于无菌检查
胰蛋白月示琼脂，英文名：Tryptose Agar，用途：用于各种苛养微生物尤其是布氏杆菌的培养
NCI-H1563[H1563]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
NCI-H1734[H-1734,H1734]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MB49细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人骨成型蛋白1(BMP-1)ELISA试剂盒，英文名：Human BMP-1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠抗蛋白酶3抗体IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA试剂盒，英文名：PR3 Ab-IgG ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠Hedgehog相互作用蛋白(HHIP)ELISA试剂盒，英文名：HHIP ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠表皮细胞生长因子受体(EGFR)ELISA试剂盒，英文名：EGFR ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
大鼠中性粒细胞碱性酶(NAP)ELISA试剂盒，英文名：NAP ELISA Kit，规格：48T/96T
酵母基础，无维生素，英文名：Vitamin Free Yeast Base，用途：用于通过维生素的利用对酵母菌进行分类
KF链球菌琼脂，英文名：KF Streptococcus Agar，用途：用于肠球菌、链球菌滤膜法计数和检验，每100ml培养基添加1支1%TTC溶液
真杆菌选择性琼脂基础(ESA)，英文名：Eubacterium Selective Agar，用途：用于真杆菌的选择性分离
Slantz and Bartley 培养基，英文名：Slantz and Bartley medium，用途：用于肠球菌、粪链球菌的分离和培养
胰蛋白胨大豆琼脂/胰化大豆蛋白琼脂(TSA)，英文名：Tryptic Soy Agar，用途：用于细菌的计数和培养
Toledo细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：每2-3天换液
C127细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
A-10细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NG108-15细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
滤膜肠球菌琼脂，英文名：Membrane-filter Enterococcus Selective Agar，用途：用于水或液体中肠球菌的滤膜法计数
HK-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：4传代；2-3天换液1次
NCI-H1869细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：3-1：4传代；每周换液2次。
GC9811-P细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化，2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；4)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；5)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；6)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO2培养箱中进行培养；7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2～3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；2)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
GC9811-P细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
