SZ95人皮脂腺细胞系 专业技术指导 专注复苏
SW403[SW-403]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RPMI 1788细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
C3H10T1 2 Clone 8细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）；其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml，大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。
COLO 320细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SACC83细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
H-4-11-E细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
胰化大豆坚固绿琼脂(TSAF)，英文名：Tryptic Soy Fast Green Agar，用途：用于滤膜法细菌总数测定
西蒙氏柠檬酸盐琼脂/枸橼酸盐琼脂，英文名：Simmons Citrate Agar，用途：用于柠檬酸盐利用实验
解脲支原体琼脂基础，英文名：Ureaplasma urealyticum Agar Base，用途：用于解脲支原体培养,需添加尿素、小牛血清及YJ剂
阿须贝氏甘露醇培养基，英文名：Ashby’S Mannitol Medium，用途：用于固氮菌的培养
细胞形态特性：详见细胞说明书
CFAT琼脂基础，英文名：Cadmium Sulfate Fluoride Acridine Trypticase Agar，用途：用于内氏放线菌和粘性放线菌的分离培养
Herrold’s 卵黄琼脂基础，英文名：Herrold’s Egg Yolk Agar Base，用途：用于副结核杆菌的分离和鉴别，每87.3ml培养基添加10ml卵黄和2.7ml甘油，视需求可添加抗生素
HOC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
AML12细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HMVEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠生长因子受体结合蛋白14(GRB14)ELISA试剂盒，英文名：GRB14 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠晶体蛋白a(Crya)ELISA试剂盒，英文名：Mouse Crya ELISA Kit，规格：48T/96T
连四盐肉汤培养基基础，英文名：Fluid Tetrathionate Medium Base，用途：用于沙门氏菌选择性分离,每100ml添加碘溶液、0.1%煌绿溶液各1支
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞培养中支原体污染的经验分享：支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%，支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，95%以上是以下四种支原体：口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)，为牛源性。以上是Z常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染;严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体Z突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如万古霉素等完全不敏感；对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体Z有YZ活性及常用于支原体感染ZL的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小YZ作用，所以常不用来作为支原体感染的化学ZL剂。
强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)，英文名：Differentia Reinforced Clostridial Agar，用途：用于食品和其它物质中梭菌的计数和培养
胰蛋白胨生理盐水溶液(TPS)，英文名：Tryptone Physiology Solution，用途：用于样品的制备
麦康凯(MAC)肉汤(CT-MAC肉汤基础)，英文名：MacConkey Broth(CT-MAC Broth Base)，用途：含结晶紫、中性红,用于O157菌选择性增菌,每100ml添加亚碲酸钾溶液和头孢克肟溶液各1支
沙氏葡萄糖琼脂培养基，英文名：Sabouraud’s Glucose Agar Medium，用途：用于真菌培养（ZG药典2010）
IAR20细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
DU4475细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮，多细胞聚集；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：每周换液2—3次
HL7702细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SAS细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：10^5 cells/60mm dish
786-0细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LM-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人鳞状细胞癌相关抗原2(SCCAg2)ELISA试剂盒，英文名：Human SCCAg2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人基质裂解素(ST1)ELISA试剂盒，英文名：Human ST1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人蛋白激酶R(PKR)ELISA试剂盒，英文名：Human PKR ELISA Kit，规格：48T/96T
MS维生素，英文名：Murashige & Skoog Vitamins，用途：用于植物组织培养
PYG液体培养基基础，英文名：PYG Broth Medium Base，用途：用于双歧杆菌乙酸和乳酸代谢物测定,每20ml培养基中添加1支化血红素溶液和2支化血红素溶液
Luria肉汤基础，英文名：Luria Broth Base，用途：用于大肠杆菌的培养和保存,视需要每升添加10ml20%葡萄糖
TU212细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
NCI-H774[H774]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SF-295细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人谷胱甘肽转移酶pi基因(GSTpi)ELISA试剂盒，英文名：Human GSTpi ELISA Kit，规格：48T/96T
人黏病毒耐药蛋白2(MX2)ELISA试剂盒，英文名：Human MX2 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒，英文名：Mouse α1-MG ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒，英文名：Mouse B7-2/sCD86 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
大鼠早期生长应答因子1(EGR1)ELISA试剂盒，英文名：EGR1 ELISA Kit，规格：48T/96T
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(亮酸缺陷)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium without Leuci，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
乳酸菌霉素琼脂2，英文名：Lactobacillus Chloramphenicol Agar 2，用途：——用于干酪乳杆菌和乳酸片球菌的培养
Luria肉汤基础，英文名：Luria Broth Base，用途：用于大肠杆菌的培养和保存,视需要每升添加10ml20%葡萄糖
YPDA培养基，英文名：Yeast Peptone Dextrose Adenine Medium，用途：用于分子生物学实验中酵母菌的培养
维生素B12测定用培养基，英文名：Vitamin B12 Assay Broth，用途：用于维生素B12的测定
UACC-812细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CCC-HSF-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
HCC2218细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：每周换液2—3次
MV-4-11细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：成淋巴细胞；细胞传代方法：每周2-3次。
CDC厌氧菌琼脂基础，英文名：CDC Anaerobe Agar Base，用途：用于厌氧菌的分离培养,每100ml添加化血红素溶液和维生素K1溶液各1支,添加5-10%羊血(无菌脱纤维绵羊全血）
PC9细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SUM52PE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BHK-21[C-13]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T25培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(Z主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于4℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T25培养瓶：是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T25培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用，如细胞密度高于80%，可以直接消化传代，相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用15ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用(如果实验室没有T25培养瓶，可以暂时T75培养瓶，加入10-15ml培养基，建议10ml培养基，也可以使用T175培养瓶，加入50-60ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，Z好不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(1000rpm，3min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
NCI-H1568[H1568]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
