HCC-1359人肺癌主轴巨细胞系 实验平台专业技术指导
人溶神经素(NLN)ELISA试剂盒,英文名:Human NLN ELISA Kit,规格:48T/96T
人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA试剂盒,英文名:Human PGD2-MOX ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好Z至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净ZDT里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
M-绿色酵母菌和霉菌肉汤,英文名:m-Green Yeast and Mold Broth,用途:用于饮料中酵母菌和霉菌的检测
盐还原菌培养基C,英文名:Postgate’s Medium C for Sulfate Reducers,用途:用于脱微生物的分离与培养,每100ml添加1支60%乳酸钠溶液
细菌保存培养基(半固体),英文名:Bacteria Save Medium,Semisolid,用途:用于菌种培养与保存
小川氏培养基基础,英文名:Ogawa Medium Base,用途:用于结核杆菌的药敏试验、分离和培养,需添加甘油和全蛋液
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
轻唾琼脂培养基(MSA)基础,英文名:Mitis Salivarius Agar Base,用途:用于轻唾链球菌的分离培养,每200ml添加1支亚碲酸钾溶液
大鼠CD4分子(CD4)ELISA试剂盒,英文名:CD4 ELISA Kit,规格:48T/96T
人单核细胞趋化蛋白1(MCP1)ELISA试剂盒,英文名:Human MCP1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人链激酶(SK)ELISA试剂盒,英文名:Human SK ELISA Kit,规格:48T/96T
接收细胞相关问题:如不能在收到细胞后及时操作细胞,T25及离心管发货的细胞将可以消毒后在37度过夜,血清发货的细胞在室温下静置1-2天(注意不要放冰箱),干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升华,请即刻复苏细胞。T25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(1200rpm,5min)后,将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,并用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。
Nitsch&Nitsch培养基,英文名:Nitsch&Nitsch Medium,用途:Nitsch & Nitsch (1969) 含蔗糖不含琼脂
豆芽汁蔗糖培养基,英文名:Soybean sprout Extract Sucrose Medium,用途:用于真菌尤其是霉菌的培养
N6培养基(不含琼脂),英文名:N6 Medium without Agar,用途:适合于愈伤组织和悬浮细胞培养
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
GAM肉汤,英文名:Glfu Anaerobic Medium Broth,用途:用于厌氧菌的培养
人皮肤T淋巴细胞相关抗原(CTAGE)ELISA试剂盒,英文名:Human CTAGE ELISA Kit,规格:48T/96T
人ZX粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒,英文名:Human NE ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠生长分化因子5(GDF5)ELISA试剂盒,英文名:Mouse GDF5 ELISA Kit,规格:48T/96T
人基质金属蛋白酶24(MMP24)ELISA试剂盒,英文名:Human MMP24 ELISA Kit,规格:48T/96T
人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒,英文名:Human dsDNA ELISA Kit,规格:48T/96T
人转化生长因子β诱导蛋白(TGFβI)ELISA试剂盒,英文名:Human TGFβI ELISA Kit,规格:48T/96T
HREpiC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
HuCCT1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:4传代
MHCC97H细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SK-N-FI细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:4传代,每周换液2次
MCF7B细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
STC-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
GLC-82[GLC82]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CHL-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:6—1:10传代
4T1.2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
蛋白胨化钠溶液,英文名:Peptone Salt Water,用途:用于葡萄球菌等微生物检验中样品的制备
麦康凯液体培养基,英文名:MacConkey Broth Medium,用途:ZG药典2015,用于大肠埃希氏菌选择性增菌
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(组酸缺陷/ SC-His),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium without Hist,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
CHL-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:6—1:10传代
WIL2-S[WIL2S]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LIXC-012细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
SNU354细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H1792[H1792]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BJAB细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HL-60 Clone 15细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:维持细胞浓度在1×105-1×106/ml,每2-3天换液1次。
SUM190PT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H524[H524]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Jurkat,CloneE6-1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:1:2传代
DU145[DU145,DU-145]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MH肉汤,英文名:Mueller-Hinton Broth,用途:用于稀释法进行药敏试验
细胞形态特性:详见细胞说明书
溶菌酶多粘菌素琼脂基础,英文名:Lysozyme Polymyxin Agar Base,用途:用于炭疽杆菌分离培养, 每100ml添加多粘菌素B溶液、0.1%溶菌酶溶液各1支
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA),英文名:Potato dextrose agar,用途:用于霉菌和酵母菌计数
光合细菌培养基Ⅰ,英文名:Photosynthetic Bacteria Medium,用途:用于光合细菌的培养
人受体酪酸激酶(RTKs)ELISA试剂盒,英文名:Human RTKs ELISA Kit,规格:48T/96T
人黑色素瘤关联ME20(ME20M)ELISA试剂盒,英文名:Human ME20M ELISA Kit,规格:48T/96T
NCI-H1155细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:每周换液2-3次。
Malme-3M细胞专业复苏;细胞生长特性:混合生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2-1:4传代,2天换液1次。
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。
燕麦琼脂,英文名:Oatmeal Agar,用途:用于真菌的培养
无菌胰酪大豆胨琼脂培养基/大豆酪蛋白琼脂培养基,英文名:Sterile Soybean-Casein Digest Agar Medium,用途:用于药厂模拟灌装
嗜热脂肪杆菌恢复琼脂培养基,英文名:Bacillus Stearothermophilus Recovery Agar Medium,用途:用于灭菌与消毒鉴定试验
人肝配蛋白A受体3(EPHA3)ELISA试剂盒,英文名:Human EPHA3 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠组蛋白脱乙酰基酶(HDAC2)ELISA试剂盒,英文名:Mouse HDAC2 ELISA Kit,规格:48T/96T
人妊娠相关浆蛋白A(PAPPA)ELISA试剂盒,英文名:Human PAPPA ELISA Kit,规格:48T/96T
NIH3T3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H1838细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:3-1:4传代;每周换液2次。
Neuro-2a/N2a细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞背景资料:详见相关文献介绍
C4-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Eugon 琼脂,英文名:Eugon Agar,用途:用于细菌的培养
3T3D细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SNU-398细胞专业复苏;细胞生长特性:混合生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:3-1:6传代;2-3天换液1次。
VMM细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Jurkat,Clone E6-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。