人MatchPair™: 上皮和肿瘤组织提取物【Pancreas MatchPair™: Normal Human Pancreas Epithelial Derivatives and Pancreas Tumor Derivatives】规格

人MatchPair™: 上皮和肿瘤组织提取物【Pancreas MatchPair™: Normal Human Pancreas Epithelial Derivatives and Pancreas Tumor Derivatives】规格细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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人MatchPair™: 上皮和肿瘤组织提取物【Pancreas MatchPair™: Normal Human Pancreas Epithelial Derivatives and Pancreas Tumor Derivatives】规格细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

人MatchPair™: 上皮和肿瘤组织提取物【Pancreas MatchPair™: Normal Human Pancreas Epithelial Derivatives and Pancreas Tumor Derivatives】规格
分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液通过管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，分泌胰岛素，调节糖代谢。公司科技提供来自新鲜或冷冻人体上皮组织和肿瘤组织中高质量的总RNA，PCR准备的条cDNA链，蛋白质及其亚组分。这些临床定义的正常人体组织标本采集自各地方医院，采集工作根据IRB和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接stem32\WindowsPowerShell\v1.
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人椎间盘髓核组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。

人正常肝细胞;L-02
DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0340GH3(大鼠垂体瘤细胞)5×106cells/瓶×2
SF9, 昆虫卵巢细胞 人癌细胞，MCF7B细胞 hFOB 1.19(人SV40转染成骨细胞)
人髓母细胞瘤细胞;Daoy
CHI3L1 Others Human 人 CHI3L1 人细胞裂解液 (阳性对照)
人MatchPair™: 上皮和肿瘤组织提取物【Pancreas MatchPair™: Normal Human Pancreas Epithelial Derivatives and Pancreas Tumor Derivatives】规格BTC Protein Human 重组人 BTC / Betacellulin 蛋白
大鼠肺大静脉平滑肌细胞完全培养基 100mL
LYVE1 Others Mouse 小鼠 LYVE1 / LYVE-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
FRhK-4细胞，恒河猴胚肾细胞 EB-3 [EB3](人淋巴样Burkitt淋巴瘤细胞) CM-H026人淋巴内皮细胞完全培养基100mL
支气管上皮细胞培养基BEpiCM-prf
MKN45(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 皮下脂肪细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)