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人小脑组织提取物 【Human Cerebellum: Normal Cerebellum Derivatives】图片

产品信息

  • 人小脑组织提取物 Human Cerebellum: Normal Cerebellum Derivatives】图片细胞培养的优点:
    1.研究的对象是活细胞
    在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
    2.研究条件可以人为控制
    pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
    3.研究的样本可以达到比较均一性
    通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
    4.研究内容便于观察、检测和记录
    采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
    人小脑组织提取物 Human Cerebellum: Normal Cerebellum Derivatives】图片细胞培养操作规程:
    一.培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    二.细胞处理:
    1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
    方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    公司向您推荐人小脑组织提取物 Human Cerebellum: Normal Cerebellum Derivatives】图片的详细说明:


    1g/5g/25g原装SpermidineSigma S0266
    (亚精胺,精脒)
    1g/5g原装/25g原装Spermidine3HClSigma S2501
    (亚精胺三盐酸)
    500mg/1gSpermine,4HCISigma分装
    (精胺)
    250mg/1g/5g原装Spermine4HClSigma S2876
    (精胺四盐酸)
    100g/2kg原装StarchPotatoSigma S4251
    人小脑组织提取物 Human Cerebellum: Normal Cerebellum Derivatives】图片CXCL14 Protein Human 重组人 CXCL14 / BRAK 蛋白

    人成纤维细胞完全培养基 100mL
    CN3 Others Rat 大鼠 Coactin 3 / CN3 人细胞裂解液 (阳性对照)
    T6细胞,人舌癌细胞 甲型副伤寒沙门氏菌 大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E
    正常大鼠肾细胞;NRK-52E
    MRC-5(人胚肺成纤维细胞 ) 5×106cells/瓶×2 小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人细胞裂解液 (阳性对照)

    人小脑组织提取物 Human Cerebellum: Normal Cerebellum Derivatives】图片
    小脑位于大脑半球后方,覆盖在脑桥及延髓之上,横跨在中脑和延髓之间。它由胚胎早期的菱脑分化而来,小脑通过它与大脑、脑干和脊髓之间丰富的传入和传出联系,参与躯体平衡和肌肉张力(肌紧张)的调节,以及随意运动的协调。公司科技提供来自新鲜或冷冻人小脑组织中高质量的总RNA,PCR准备的条cDNA链,蛋白质及其亚组分。这些临床定义的正常人体组织标本采集自各地方医院,采集工作根据IRB和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以stem32\Windows
    RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。

    cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。
    蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人椎间盘髓核组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。
    潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。


















     
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