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小鼠食管平滑肌细胞提取物【Mouse Esophageal: Normal Esophageal Smooth Muscle Cell Derivatives】

产品信息
  • 小鼠食管平滑肌细胞提取物【Mouse Esophageal: Normal Esophageal Smooth Muscle Cell Derivatives】使用方法:
    T25培养瓶运输为例,客户收到细胞后,请按照一下方法进行操作。
    1、取出T25培养瓶,75%的酒精进行表面消毒,拆下封口膜,放入二氧化碳培养箱恒温培养3-6小时,以稳定细胞状态。
    2、细胞状态稳定后可以进行下游实验。
    3、请尽快换成符合细胞生长的培养基。


    小鼠食管平滑肌细胞提取物【Mouse Esophageal: Normal Esophageal Smooth Muscle Cell Derivatives】
             小鼠食管平滑肌细胞提取物是从小鼠食管平滑肌细胞提取的,小鼠食管平滑肌细胞从正常小鼠食管组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
          总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。

             cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。
            蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人癌组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。
            潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。

    小鼠食管平滑肌细胞提取物【Mouse Esophageal: Normal Esophageal Smooth Muscle Cell Derivatives】细胞培养操作规程:
    一.培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    二.细胞处理:
    1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
    方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。


    小鼠食管平滑肌细胞提取物【Mouse Esophageal: Normal Esophageal Smooth Muscle Cell Derivatives】细胞培养的优点:
    1.研究的对象是活细胞
    在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
    2.研究条件可以人为控制
    pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
    3.研究的样本可以达到比较均一性
    通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
    4.研究内容便于观察、检测和记录
    采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。


    人脊髓星形胶质细胞总RNA10 µg  特价供应
    人脊髓星形胶质细胞英文名称:HA-sp  特价供应
    人脊髓星形胶质细胞微小RNA英文名称:HA-sp miRNA  特价供应
    人脊髓星形胶质细胞微小RNA0  特价供应
    人脊髓星形胶质细胞裂解物英文名称:HA-sp L  特价供应
    人脊髓星形胶质细胞裂解物200 µg  特价供应
    人脊髓星形胶质细胞cDNA英文名称:HA-sp cDNA  特价供应
    人脊髓星形胶质细胞cDNA20 reactions  特价供应
    人脊髓星形胶质细胞5 x 10^5 cells/vial  特价供应
    人急性淋巴细胞血病细胞,CEM/C1细胞英文名称:  特价供应
    人急性淋巴细胞血病细胞,CEM/C1细胞  特价供应
    人急性淋巴细胞血病细胞,CCRF-CEM细胞英文名称:  特价供应
    人急性淋巴细胞血病细胞,CCRF-CEM细胞  特价供应
    人急性淋巴母细胞性血病细胞,MOLT-4细胞英文名称:  特价供应
    人急性淋巴母细胞性血病细胞,MOLT-4细胞  特价供应
    人急性淋巴母细胞血病细胞,MT-4细胞英文名称:  特价供应
    人急性淋巴母细胞血病细胞,MT-4细胞  特价供应
    人急性非B非T淋巴细胞血病细胞,REH细胞英文名称:  特价供应
    人急性非B非T淋巴细胞血病细胞,REH细胞  特价供应
    小鼠食管平滑肌细胞提取物【Mouse Esophageal: Normal Esophageal Smooth Muscle Cell Derivatives】植物Actin PCR引物 100uL Common PCR Primer 

    植物gamma-TIP PCR引物 100uL Common PCR Primer 
    植物叶绿体TrnL PCR引物 100uL Common PCR Primer 
    β- 葡萄糖苷酶 100UN β-Glucosidase   
    Camptothecin( 喜树) 100μL Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor 
    Ac-DEVD-CHO(Caspase 3YZ剂) 100μL Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor 
    Doxorubicin( Adriamycin )阿霉素 100μL Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor 
    Etoposide(依托泊苷/鬼臼叉苷) 100μL Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor 
    细菌RNAout 100次 Bacterial RNAOUT 
    一步离心式石蜡清除剂 100次 Paraffin Erasol 
    磁珠血液DNAout 100次 MAG Blood DNAOUT 磁珠,蛋酶K溶液(勿反复冻融)
    血液和DNA纯化套装 100次 Blood DNAlocker-DNAOUT Pack 
    凝固血液DNAout 100次 Blood Clot DNAOUT 
    一管式拭子DNAout 100次 One-Tube Swab DNAOUT 
    粪便DNAout 100次 Stool DNAOUT 

     
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