小鼠前列腺上皮细胞提取物【Mouse Prostate: NormalProstate Derivatives】

小鼠前列腺上皮细胞提取物【Mouse Prostate: NormalProstate Derivatives】使用方法：
以T25培养瓶运输为例，客户收到细胞后，请按照一下方法进行操作。
1、取出T25培养瓶，75%的酒精进行表面消毒，拆下封口膜，放入二氧化碳培养箱恒温培养3-6小时，以稳定细胞状态。
2、细胞状态稳定后可以进行下游实验。
3、请尽快换成符合细胞生长的培养基。

小鼠前列腺上皮细胞提取物【Mouse Prostate: NormalProstate Derivatives】
         小鼠前列腺上皮细胞提取物是从小鼠原代前列腺上皮细胞提取的，小鼠原代前列腺上皮细胞从正常小鼠前列腺组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
      总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
         cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
        蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人癌组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。
        潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。

小鼠前列腺上皮细胞提取物【Mouse Prostate: NormalProstate Derivatives】细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

小鼠前列腺上皮细胞提取物【Mouse Prostate: NormalProstate Derivatives】细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

人脉络丛成纤维细胞5 x 10^5 cells/vial  特价供应
人卵巢腺癌细胞，OVCAR-3细胞英文名称：  特价供应
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人卵巢微血管内皮细胞英文名称：HOMEC  特价供应
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人卵巢透明细胞癌细胞，ES-2细胞英文名称：  特价供应
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人卵巢癌细胞胞，CoC1细胞英文名称：  特价供应
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人卵巢癌细胞，OV-90细胞英文名称：  特价供应
人卵巢癌细胞，OV-90细胞  特价供应
小鼠前列腺上皮细胞提取物【Mouse Prostate: NormalProstate Derivatives】CAPS Buffer,0.5M,pH11.0 　100mL　CAPS Buffer,0.5M,pH11.0 　
CAPS Buffer,0.5M,pH9.0 　100mL　CAPS Buffer,0.5M,pH9.0 　
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CAPSO Buffer,0.2M,pH10.0 　100mL　CAPSO Buffer,0.2M,pH10.0 　
CAPSO Buffer,0.2M,pH8.5 　100mL　CAPSO Buffer,0.2M,pH8.5 　
CAPSO Buffer,0.2M,pH9.0 　100mL　CAPSO Buffer,0.2M,pH9.0 　
CAPSO Buffer,0.2M,pH9.5 　100mL　CAPSO Buffer,0.2M,pH9.5 　
CHES Buffer,0.5M,pH10.0  　100mL　CHES Buffer,0.5M,pH10.0  　
CHES Buffer,0.5M,pH8.5  　100mL　CHES Buffer,0.5M,pH8.5  　
CHES Buffer,0.5M,pH9.0  　100mL　CHES Buffer,0.5M,pH9.0  　
CHES Buffer,0.5M,pH9.5  　100mL　CHES Buffer,0.5M,pH9.5  　
DIPSO Buffer,0.2M,pH7.0 　100mL　DIPSO Buffer,0.2M,pH7.0 　
DIPSO Buffer,0.2M,pH7.4 　100mL　DIPSO Buffer,0.2M,pH7.4 　
DIPSO Buffer,0.2M,pH8.0 　100mL　DIPSO Buffer,0.2M,pH8.0 　
DIPSO Buffer,0.2M,pH8.5 　100mL　DIPSO Buffer,0.2M,pH8.5