NCI-H719人小细胞肺癌细胞系 复苏团队专注复苏
GES1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H647[H647]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
YTMLC-90细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
大鼠血小板激活因子乙酰水解酶Ⅰb3(PAFAH1B3)ELISA试剂盒,英文名:PAFAH1B3 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠凝血酶原肽段1+2(F1+2)ELISA试剂盒,英文名:Mouse F1+2 ELISA Kit,规格:48T/96T
Kit225细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HELF细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
NCI-H2444[H2444]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代培养(消化法)标准操作规程【原理】细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。【材料和试剂】1)无菌生理缓冲液(PBS);2)胰酶-EDTA溶液(0.05%胰酶-0.53mM EDTA-4Na): 以10ml分装于15 ml无菌离心管中,保存于–20℃,使用前放在37℃水槽回温;3)新鲜培养基;4)无菌吸管/离心管/培养瓶【传代前准备操作】1)预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热;2)用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手;3)正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且可减少污染;4)点燃酒精灯:注意火焰不能太小;5)准备好将要使用的消毒后的空培养瓶;6)取出预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内;7)从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞;8)打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
细胞生长特性:半贴壁
Eugon LT 100琼脂基础,英文名:Eugon LT 100 Agar Base,用途:用于中细菌总数的测定,每200ml添加1支吐温80
MC培养基(改良MC培养基基础),英文名:Chalmers Agar(Modified Chalmers Agar Base),用途:用于乳酸菌计数,改良MC培养基每100ml需中添加1支多粘菌素B溶液
克氏双糖铁琼脂(KI),英文名:Kligler Iron Agar,用途:用于细菌的复合生化试验
小鼠阿霉素(ADR)ELISA试剂盒,英文名:Mouse ADR ELISA Kit,规格:48T/96T
HUVEC-12细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CL1-0细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MHCC97L细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人表皮细胞活化肽因子(CAPF)ELISA试剂盒,英文名:Human CAPF ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞背景资料:小细胞肺癌;转移;女性
人古梅斯蛋白1(AMZ1)ELISA试剂盒,英文名:Human AMZ1 ELISA Kit,规格:48T/96T
酵母碳源基础(YCB),英文名:Yeast Carbon Base,用途:用于通过氮源的利用对酵母菌进行分类
巴氏梭状芽孢杆菌合成培养基,英文名:Clostridium pasteurianum Synthetic Medium,用途:用于巴氏梭状芽孢杆菌培养
M9肉汤,英文名:M9 Broth,用途:——用于培养重组大肠杆菌菌株
大鼠半乳凝素7(GAL7)ELISA试剂盒,英文名:GAL7 ELISA Kit,规格:48T/96T
LO2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一代
SH-77细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,Z近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
沙氏液体培养基(含霉素),英文名:Sabouraud’s Broth with Chloramphenicol,用途:用于真菌增菌培养
甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础(MYP),英文名:Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin agar Base,用途:用于蜡样芽胞杆菌计数和分离,每100ml添加50%卵黄盐水悬液和多粘菌素B溶液各1支
营养琼脂,1.5%,英文名:Nutrient Agar,用途:用于细菌培养和细菌总数测定(23g/L)
脑-心浸萃液态培养基,英文名:Brain-Heart Extraction Liquid Medium,用途:用于粪链球菌验证,也可用于苛养菌的培养
大鼠延伸蛋白A(ELOA)ELISA试剂盒,英文名:ELOA ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
人原黏素α1(PCDHα1)ELISA试剂盒,英文名:Human PCDHα1 ELISA Kit,规格:48T/96T
Ca761细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HIBEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MKN-28细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
3T3TK细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
肠球菌琼脂(胆汁七叶苷叠氮钠琼脂),英文名:Bile Esculin Azide Agar,用途:用于肠球菌选择性分离培养和计数
嗜冷菌计数琼脂,英文名:Psychrophilic Bacterium Count Agar,用途:用于乳制品中嗜冷微生物的培养
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
选择性牛心汤增菌培养基,英文名:Selective Cattle Heart Enrichment Broth,用途:用于链球菌选择性增菌
哥伦比亚-MUG琼脂培养基,英文名:Columbia-MUG Agar Medium,用途:于大肠杆菌荧光检测
兔血浆纤维蛋白原(RPF)琼脂培养基基础,英文名:RPF Agar Medium Base,用途:用于凝固酶阳性葡萄球菌检测,需添加兔血浆和YJ剂
厌氧菌肉汤MIC,英文名:Anaerobe Broth MIC,用途:用于肉汤微量稀释法测定厌氧菌敏感性养和厌氧菌培养
抗生素培养基13号,英文名:Medium 13(Sabouraud LiquidBroth,Modified),用途:用于微生物方法测定抗生素效价
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
人半椎蛋白2(HMCN2)ELISA试剂盒,英文名:Human HMCN2 ELISA Kit,规格:48T/96T
人基质金属蛋白酶2(MMP-2)ELISA试剂盒,英文名:Human MMP-2 ELISA Kit,规格:48T/96T
人人17-β-羟基类固醇脱酶14(HSD17β14)ELISA试剂盒,英文名:Human HSD17β14 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在ZY无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
亮绿胆盐琼脂,英文名:Brilliant Green Bile Agar,用途:用于大肠菌群的分离、鉴别和计数
细胞形态特性:详见细胞说明书
乙酰胺琼脂(乙酰胺培养基),英文名:Acetamide Agar,用途:用于绿脓杆菌分离培养
燕麦琼脂,英文名:Oatmeal Agar,用途:用于真菌的培养
SW1573细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H711[H711]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H1341细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:圆形细胞;细胞传代方法:3-4天换液1次。
Hs 940.T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代,2-3天换液1次。
HB611细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。