BT549人乳腺癌细胞系 专业实验人员复苏
RKN细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HLEB3细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
我常看到一个比较复杂的四步消化法，这个挺有意思，我也是次听说，应该是网友自己发展出来的方法，很有参考价值。但我估计这个方法可能对付少数非常怪异的细胞才需要这么复杂的程序。我目前养过的近300株细胞里面，还没遇到这么怪异的。比如Caco2其实是很好消化的细胞，不需要胰酶孵育即可，只是有点成片分布。不要以为成片分布是自己没养好，这个视细胞而定。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好；比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化)，就以colon cancer为例，比如HCT15, LS411和KM12，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般100 mm dish，一次Z多加入500ul，就足够了，一般我加300ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙状移动。
RF/6A细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCCLM3细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
人血管YZ蛋白1(VASH1)ELISA定量试剂盒，英文名：Human VASH1 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
人糖类抗原19-9(CA19-9)ELISA定量试剂盒，英文名：Human CA19-9 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠核糖体蛋白L6(RPL6)ELISA定量试剂盒，英文名：RPL6 ELISA Kit，规格：48T/96T
HMrSV5细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HT1080细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，Z近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
购买细胞注意事项：1)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系；2)仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等；3)用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次；4)建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代：1)提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内；2)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞；3)加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用；4)用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡；5)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代：1)将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min；2)弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液；3)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
大鼠神经肽Y(NPY)ELISA定量试剂盒，英文名：NPY ELISA Kit，规格：48T/96T
人高迁移率族AT人Hook蛋白2(HMGA2)ELISA定量试剂盒，英文名：Human HMGA2 ELISA Kit，规格：48T/96T
RMC细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞背景资料：详见相关文献介绍
Jurkat77细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
GA-10(Clone4)细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠肿瘤特异性移植抗原(TSTA)ELISA定量试剂盒，英文名：TSTA ELISA Kit，规格：48T/96T
COS-1细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：1：2传代
MDA-kb2细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
HOPC-os细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HTR8细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠III型胶原(COLIII)ELISA定量试剂盒，英文名：COLIII ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠S-100蛋白(S-100)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse S-100 ELISA Kit，规格：48T/96T
人抗巨细胞病毒抗体IgG(anti-CMV IgG)ELISA定量试剂盒，英文名：Human anti-CMV IgG ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MLE-12细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HFT-8810细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
EOC 20细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BPH-1细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人Smad同源物3(Smad3/MADH3)ELISA定量试剂盒，英文名：Human Smad3/MADH3 ELISA Kit，规格：48T/96T
人蛋白二键异构酶(PDI)ELISA定量试剂盒，英文名：Human PDI ELISA Kit，规格：48T/96T
SBC-3细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
S37细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SH-77细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CMT-93细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
R1800[RA]细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA定量试剂盒，英文名：Human cPLA2 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠普列克底物蛋白同源物样结构域家族A成员2(PHLDA2)ELISA定量试剂盒，英文名：PHLDA2 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
小鼠小肠碱性酶(ALPI)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse ALPI ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠肾病蛋白(NPHN)ELISA定量试剂盒，英文名：NPHN ELISA Kit，规格：48T/96T
人DnaJ/Hsp40同源物亚家族C成员12(DNAJC12)ELISA定量试剂盒，英文名：Human DNAJC12 ELISA Kit，规格：48T/96T
CNE-2Z细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
AAV293细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
RBMVEC细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HSC-2细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人血管紧张素I(Ang-I)ELISA定量试剂盒，英文名：Human Ang-I ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠甲基CpG结合蛋白2(MECP2)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse MECP2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人信号素3E(SEMA3E)ELISA定量试剂盒，英文名：Human SEMA3E ELISA Kit，规格：48T/96T
人跨膜蛋白5(TMEM5)ELISA定量试剂盒，英文名：Human TMEM5 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞形态特性：详见细胞说明书
NCI-H596细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：4-1：8传代；每周换液2-3次。
COLO320DM[COLO320DM]细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MA-782细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BSC-1细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
