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Hela229[HeLa229]人宫颈癌细胞系 专业实验人员复苏

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  • Hela229[HeLa229]人宫颈癌细胞系 专业实验人员复苏
    Detroit 562细胞实验室;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次。
    NCI-H676B细胞实验室;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。
    HECV细胞实验室;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HRC-99细胞实验室;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    人P53(P53)ELISA定量试剂盒,英文名:Human P53 ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
    人视蛋白4(OPN4)ELISA定量试剂盒,英文名:Human OPN4 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠转化生长因子β1(TGFβ1)ELISA定量试剂盒,英文名:Mouse TGFβ1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    RBMVEC细胞实验室;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    Detroit562细胞实验室;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
    细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好Z至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净ZDT里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
    目前,跟公司签订长期战略合作伙伴的科研单位有山西中医学院、福建医科大学附属第二医院、上海市第六人民医院、北京大学医学部、同济大学、四平ZX医院、广州中医药大学、中科院上海生命科学研究院生化与细胞研究所、解放军第306医院、江南大学、西南医院、吉首大学、西南大学化学化工学院、宁波大学、福建医科大学附属医院、苏州市同济医院、中南大学、延安大学附属医院、ZG科学院上海药物研究所、天津市儿童医院、江苏省中医药研究院、湘雅医学院、第四军医大学预防系劳动与环境教研室、扬州大学、上海交通大学、ZG医科大学、浙江省立同德医院、ZG人民解放军第150ZX医院、苏州大学、四川大学华西医院、云南大学、扬州大学兽医学院、上海交通大学医学院附属第九人民医院、海南医学院、江苏肿瘤医院、上海市闵行区ZX医院、大连医科大学附属医院、ZG科学院广州生物医药与健康研究院、沈阳药科大学、广州市第八人民医院、南京大学、浙江中医药大学、兰州大学、上海中医药大学、ZG农业科学院饲料研究所、厦门市妇幼保健院、大学、南京军区总医院、天津市人民医院、北京医学科学肿瘤医院、上海市同济医院、江苏大学、桂林医学院附属医院、ZG科学院化学研究所
    小鼠糖原化酶B(PYGB)ELISA定量试剂盒,英文名:Mouse PYGB ELISA Kit,规格:48T/96T
    人丝酸/苏酸/酪酸激酶1(STYK1)ELISA定量试剂盒,英文名:Human STYK1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    KLN 205细胞实验室;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞背景资料:详见相关文献介绍
    CCRF-CEM细胞实验室;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满。
    HIT-T15细胞实验室;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    人皮质醇稳定蛋白(CORT)ELISA定量试剂盒,英文名:Human CORT ELISA Kit,规格:48T/96T
    A204细胞实验室;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    Hs 281.T细胞实验室;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2传代,每周换液2-3次。
    MS1细胞实验室;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
    VMRC-LCD细胞实验室;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    人白细胞关联免疫球蛋白样受体1(LAIR1)ELISA定量试剂盒,英文名:Human LAIR1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠脂肪酸结合蛋白1(FABP1)ELISA定量试剂盒,英文名:Mouse FABP1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人热休克蛋白β2(HSPβ2)ELISA定量试剂盒,英文名:Human HSPβ2 ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    NCI-H1963细胞实验室;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:每周换液2次。
    IEC-18细胞实验室;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
    SKM-1细胞实验室;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代;
    TE-1细胞实验室;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
    大鼠滑行蛋白b(TXLNb)ELISA定量试剂盒,英文名:TXLNb ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠白介素16(IL-16)ELISA定量试剂盒,英文名:Mouse IL-16 ELISA Kit,规格:48T/96T
    T47D[T-47D]细胞实验室;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
    FRH-0201细胞实验室;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    LAPC4细胞实验室;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    TPC1细胞实验室;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    293 AAV细胞实验室;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    大鼠亚砜还原酶A(MSRA)ELISA定量试剂盒,英文名:MSRA ELISA Kit,规格:48T/96T
    人COLⅩⅦ型胶原(COLⅩⅦ)ELISA定量试剂盒,英文名:Human COLⅩⅦ ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
    人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA定量试剂盒,英文名:Human apo-A1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠核孔蛋白50kda(NUP50)ELISA定量试剂盒,英文名:NUP50 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠上皮膜抗原(EMA)ELISA定量试剂盒,英文名:Mouse EMA ELISA Kit,规格:48T/96T
    PA-TU-8988S细胞实验室;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    U973细胞实验室;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
    HONE-1细胞实验室;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    Z138细胞实验室;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    人Nicolin人1蛋白(NICN1)ELISA定量试剂盒,英文名:Human NICN1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISA定量试剂盒,英文名:Human IGFBP-6 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人抗免疫球蛋白结合蛋白抗体(BIP-Ab)ELISA定量试剂盒,英文名:Human BIP-Ab ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠核受体亚家族3C组成员1(NR3C1)ELISA定量试剂盒,英文名:Mouse NR3C1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞形态特性:详见细胞说明书
    Duckembryo细胞实验室;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维母细胞样;细胞传代方法:1:2传代
    HMy2.CIR细胞实验室;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    CEM-3G-2细胞实验室;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    SUM190PT细胞实验室;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
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