F9小鼠畸胎瘤细胞系 复苏实验室稳定传代
Hep3B2.1-7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满
DTA培养基,英文名:DTA Medium,用途:用于乳与乳制品中嗜热需氧芽孢数的测定
DCR培养基,英文名:DCR Medium,用途:含蔗糖和琼脂,用于松、杉等植物的组织培养
NAC液体培养基,英文名:Nalidixic Acid Cetrimide Broth,用途:——用于微生态活菌制品中铜绿假单胞菌选择性增菌
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
SCDLP液体培养基基础,英文名:Soya Casein Digest Lecithin Polysorbate Broth Base,用途:用于样品的增菌,每升培养基添加1支吐温80
Aliz-gal琼脂,英文名:Aliz-gal Agar,用途:用于大肠菌群快速检测
假单胞菌琼脂培养基F基础,英文名:Pseudomonas Agar for Detection of fluorescin,用途:用于假单胞菌荧光素测定,每100ml添加1ml甘油(甘油)
MDBK细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
CRL-2780细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HBE135-E6E7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人R-脊椎蛋白2(RSPO2)ELISA试剂盒,英文名:Human RSPO2 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3)ELISA试剂盒,英文名:MCP-3 ELISA Kit,规格:48T/96T
结晶紫中性红胆盐琼脂(含葡萄糖和乳糖),英文名:Violet Red Bile Agar with Glucose and Lactose,用途:用于肠道菌选择性分离和计数
细胞培养中支原体污染的经验分享:支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是Z常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体Z突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体Z有YZ活性及常用于支原体感染ZL的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小YZ作用,所以常不用来作为支原体感染的化学ZL剂。
KF链球菌琼脂,英文名:KF Streptococcus Agar,用途:用于肠球菌、链球菌滤膜法计数和检验,每100ml培养基添加1支1%TTC溶液
Starky代钠琼脂培养基,英文名:Starky -Na2S2O3 Agar Medium,用途:用于氧化杆菌的培养
SB琼脂,英文名:Super Broth Agar,用途:用于基因工程大肠杆菌的计数和培养
TBB培养基,英文名:Tyrobutyricun Broth Base,用途:用于乳酪产品中梭菌的计数
HuAECs-11细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞形态特性:详见细胞说明书
Human Fibroblasts细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HNE2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LX-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:3传代,2-3天换液一次
NCI-H1092细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:随细胞的密度而增加
T98G细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:按1:3传代
小鼠羟脯酸(Hyp)ELISA试剂盒,英文名:Mouse Hyp ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠钠/钾离子转运ATP酶β1肽(ATP1β1)ELISA试剂盒,英文名:ATP1β1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人金属酯酶1(MPPE1)ELISA试剂盒,英文名:Human MPPE1 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠基质金属蛋白酶2(MMP2)ELISA试剂盒,英文名:Mouse MMP2 ELISA Kit,规格:48T/96T
人叉头框蛋白C1(FOXC1)ELISA试剂盒,英文名:Human FOXC1 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
APA培养基基础,英文名:APA Medium Base,用途:用于嗜盐菌的培养,灭菌后需添加1%无菌碳酸钠
脑膜炎奈瑟氏菌糖发酵琼脂基础,英文名:Sugar Fermentation Agar for Neisseria Meningitidi,用途:用于脑膜炎奈瑟氏菌糖发酵试验
毛藓菌琼脂2号,英文名:Trichophyton Agar #2,用途:用于毛藓菌属的鉴定
沙氏葡萄糖液体培养基,英文名:Sabouraud’s Glucose Broth Medium,用途:用于真菌培养
脑心浸出液肉汤(BHI),英文名:Brain Heart Infusion Broth,用途:用于金黄色葡萄球菌培养(GB4789)
HLF-a细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。
Loo细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H292[H292]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
A498细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
PAC斜面培养基,英文名:PAC Slant Medium,用途:用于弧菌的保存
Hep3B2.1-7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满
U-251 MG细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:3传代;3-4天1次。
HUV-EC-C细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞背景资料:详见相关文献介绍
接收细胞相关问题:如不能在收到细胞后及时操作细胞,T25及离心管发货的细胞将可以消毒后在37度过夜,血清发货的细胞在室温下静置1-2天(注意不要放冰箱),干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升华,请即刻复苏细胞。T25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(1200rpm,5min)后,将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,并用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。
GES-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
CHO/dhFr-细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
C3H/10T1/2, Clone 8细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HT-1080细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:4-1:8传代;2-3天换液1次。
HONE-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
JurkatE6-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
小鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒,英文名:Mouse Gzms-B ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
大鼠细胞角蛋白18(CK 18)ELISA试剂盒,英文名:CK 18 ELISA Kit,规格:48T/96T
人肌球蛋白ⅩⅧA(MYO18A)ELISA试剂盒,英文名:Human MYO18A ELISA Kit,规格:48T/96T
肝浸液肉汤,英文名:Liver Infusion Broth,用途:用于布鲁氏菌及其它苛养菌的培养
改良BPLS琼脂,英文名:BPLS Agar,Modified,用途:用于样本中沙门氏菌的选择性分离
BAT肉汤,英文名:BAT Broth,用途:用于脂环酸芽孢秆菌检验
JEG3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好Z至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净ZDT里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
MLMA细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:1:2传代
RMC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。