COLO-1人角质形成层细胞系 我们专业复苏实验室
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞背景资料：角质形成层
细胞生长特性：贴壁
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
常见细胞培养中一些问题总结：1)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%，不要低于5%或高过20%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%，可以适量加减；2)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；3)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；4)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久；6)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
Hs 746T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SNU-423细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
YH-13细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：2传代
HCT 116细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
DMS-79细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：4传代，每周2-3次
人红藻酸离子能谷酸受体2(GRIK2)ELISA试剂盒，英文名：Human GRIK2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)ELISA试剂盒，英文名：Human IGFBP2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人葡萄糖转运蛋白11(GLUT11)ELISA试剂盒，英文名：Human GLUT11 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(uPAR)ELISA试剂盒，英文名：Mouse uPAR ELISA Kit，规格：48T/96T
人细胞周期素T2(CCNT2)ELISA试剂盒，英文名：Human CCNT2 ELISA Kit，规格：48T/96T
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，Z近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
酸琼脂(CAA)，英文名：Caffeic Acid Agar，用途：用于新生隐球菌及其他隐球菌的培养
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(色酸缺陷)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium without Trypt，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
淀粉铵盐培养基，英文名：Starch Ammonium Salt Medium，用途：用于放线菌的分离和计数
脑心浸出液琼脂(BHIA)，英文名：Brain Heart Infusion Agar，用途：用于细菌尤其是苛养菌的培养
发根农杆菌培养基(YEB)，英文名：Agrobacterium rhizogene Medium，用途：用于发根农杆菌的培养
ABC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：每周换液2次。
SW 1990细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；多角形；细胞传代方法：1：2传代；3天传代一次。
MC3T3-E1Subclone14细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SMC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
R2C细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1105[H1105]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BT-20细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2—1：4传代，2—3天换液一次
FRH-0201细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Amies运送培养基，英文名：Amies Transport Medium，用途：用于致病菌标本的采集、运输和保存
沙氏脑心浸液琼脂基础，英文名：Sabouraud Brain Heart Infusion Agar Base，用途：用于真菌的选择性分离,每100ml培养基中添加1支霉素溶液
韦荣氏球菌培养基基础，英文名：Veillonella Medium Base，用途：用于韦荣氏球菌的培养，每100ml添加2支60%乳酸钠溶液
庆大霉素琼脂基础，英文名：Gentamicin Agar Base，用途：用于霍乱弧菌选择性分离,每100ml添加1支庆大霉素琼脂基础添加剂
橄榄油培养基基础，英文名：olive oil medium for Malassezia，用途：用于马拉色菌的培养，每80ml添加3.2ml橄榄油
3%NaCl鸟酸脱羧酶试验培养基，英文名：Ornithine Decarboxylase Test Mediu with 3%NaCl，用途：用于弧菌的鸟酸脱羧酶试验
NG108-15 [108CC15]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样 ；细胞传代方法：1：6-1：10传代，每周换液2-3次
MDA-PCA-2B细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H889[H889]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HFB细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
hRMECs细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RCC10RGB细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MLMA细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2传代
NCI-H748[H748]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LLC-PK1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MPP 89细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
F81细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1648[H1648]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
H2.35细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
血清必须贮存于–20～-70℃，若存放于4℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将40～45ml分装于无菌50ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约10%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以50ml无菌离心管可分装40～45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久，若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心3000rpm，5min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”，但在37℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
NCI-H596细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：4-1：8传代；每周换液2-3次。
人T细胞受体(TCR)ELISA试剂盒，英文名：Human TCR ELISA Kit，规格：48T/96T
人早期生长应答因子1(EGR1)ELISA试剂盒，英文名：Human EGR1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠ZX体蛋白110(CEP110)ELISA试剂盒，英文名：CEP110 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠神经调节蛋白2(NRG-2)ELISA试剂盒，英文名：NRG-2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人联会蛋白(GMNN)ELISA试剂盒，英文名：Human GMNN ELISA Kit，规格：48T/96T
人细胞周期素B3(CCNB3)ELISA试剂盒，英文名：Human CCNB3 ELISA Kit，规格：48T/96T
人平滑肌蛋白3(LMOD3)ELISA试剂盒，英文名：Human LMOD3 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒，英文名：NAG ELISA Kit，规格：48T/96T
人天青杀素1(AZU1)ELISA试剂盒，英文名：Human AZU1 ELISA Kit，规格：48T/96T
MKTTn肉汤基础，英文名：Muller Kauffmann Tetrathionate Novobiocin Broth Ba，用途：用于沙门氏菌增菌,每100ml中添加1支碘溶液和2支新生霉素储备液
抗生素培养基41号，英文名：Medium 41，用途：用于微生物方法测定抗生素效价
SCCRAM肉汤，英文名：SCCRAM Broth，用途：用于沙门氏菌前增菌
平板计数琼脂(PCA)，英文名：Plate Count Agar/ Standard Methods Agar，用途：用于细菌总数测定
NCI-H1623[H1623]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MUTZ-3细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代
NeHepLxHT细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：5-1：10传代，每周换液2-3次
庆大霉素琼脂基础，英文名：Gentamicin Agar Base，用途：用于霍乱弧菌选择性分离,每100ml添加1支庆大霉素琼脂基础添加剂
赖酸培养基(LYS)，英文名：Lysine Medium，用途：用于啤酒野生酵母检验,需添加乳酸钾并使用乳酸校正酸碱度
小牛浸液琼脂，英文名：Veal Infusion Agar，用途：用于苛养菌的培养
EEM培养基，英文名：Enterobacteriaceae Enrichment Mannitol Medium，用途：用于肠道致病菌的增菌
低限肉汤(不含葡萄糖)，英文名：Minimal Broth Davis without Dextrose，用途：用于分离和表现营养突变型大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的特性
