OUMS-27人骨肉瘤细胞系 可以用什么培养基
肝浸液培养基/肝汤,英文名:Liver Infusion Broth,用途:用于嗜热芽孢菌的鉴别培养,需添加牛肝粒牛肝粒
N6培养基(不含蔗糖和琼脂),英文名:N6 Medium without Agar and Sucrose,用途:适合于愈伤组织和悬浮细胞培养
酵母浸粉葡萄糖琼脂,英文名:Yeast Extract Glucose Agar,用途:用于地衣芽孢杆菌、芽孢菌、密执安棍状杆菌、金黄杆菌、蜂房哈夫尼菌、荧光假单胞菌和粘质沙雷氏菌的培养
EB肉汤增菌液基础,英文名:EB Enrichment Broth,用途:用于李斯特氏菌的选择性增菌,每225ml添加2支啶酮酸溶液
SK-LMS-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2-1:5传代,2-3天换液1次。
MEG-01细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
KP-4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在ZY无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
hRPE细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
GCT0404细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Reh细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满。
细胞培养温度:维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度。不同种类的细胞对培养温度要求也不同。人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响,甚至死亡。培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不超过39℃时,细胞代谢与温度成正比;人体细胞在39-40℃1小时,即能受到一定损伤,但仍有可能恢复;在40-41℃1小时,细胞会普遍受到损伤,仅小半数有可能恢复;41-42℃1小时,细胞受到严重损伤,大部分细胞死亡,个别细胞仍有恢复可能;当温度在43℃以上1小时,细胞全部死亡。相反,温度不低于0℃时,对细胞代谢虽有影响,但并无伤害作用;把细胞放入25-35℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减慢;放在4℃数小时后,再回到37℃培养,细胞仍能继续生长。细胞代谢随温度降低而减慢。当温度降至冰点以下时,细胞可因胞质结冰受损而死亡。但是,如果向培养液中加入一定量的冷冻保护剂(二甲亚砜或甘油),可在深低温下如-80℃或-196℃(液氮)长期保存。
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝换课题,这个见得太多了,别不当会事。
HRMC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁
MCF 10A细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒,英文名:GSK ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-AB)ELISA试剂盒,英文名:Mouse DNP-AB ELISA Kit,规格:48T/96T
人糖磺基转移酶2(CHST2)ELISA试剂盒,英文名:Human CHST2 ELISA Kit,规格:48T/96T
Hs 746T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
FU97细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)(日本标准用),英文名:Potato dextrose agar,用途:用于霉菌和酵母菌计数
紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基/结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂,英文名:Violet Red Bile Glucose Agar,用途:用于肠道菌计数
植物胨酵母琼脂,英文名:Phytone Yeast Extract Agar,用途:用于皮肤真菌尤其是癣状毛癣菌等致病性真菌的选择性分离
三糖铁琼脂培养基(TSI),英文名:Triple Sugar Iron Agar Medium,用途:用于细菌生化试验
人肌切蛋白(SCIN)ELISA试剂盒,英文名:Human SCIN ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
大鼠叉头框蛋白C2(FoxC2)ELISA试剂盒,英文名:FoxC2 ELISA Kit,规格:48T/96T
人八聚体结合转录因子1(OBTF1)ELISA试剂盒,英文名:Human OBTF1 ELISA Kit,规格:48T/96T
HRC99细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SHI-1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
本尼特琼脂,英文名:Benett’s agar,用途:用于链霉菌属的培养鉴定
克氏双糖铁琼脂(KI),英文名:Kligler Iron Agar,用途:用于细菌的复合生化试验
低限琼脂,英文名:Minimal Agar Davis,用途:用于分离和表现营养突变型大肠杆菌的特性
小鼠CD320分子(CD320)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CD320 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠Ⅲ型前胶原(PC3)ELISA试剂盒,英文名:Mouse PC3 ELISA Kit,规格:48T/96T
人Ⅹ型胶原(COL10)ELISA试剂盒,英文名:Human COL10 ELISA Kit,规格:48T/96T
GP5D细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞形态特性:详见细胞说明书
697细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KYSE50细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RPMI8226细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RFL-6细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H2227细胞专业复苏;细胞生长特性:该细胞既有悬浮生长,又有贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。
COLO320HSR细胞专业复苏;细胞生长特性:半贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满。
NCI-H2087细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长,有少数细胞疏松贴壁;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。
月桂基盐胰蛋白胨肉汤(LST),英文名:Lauryl Sulfate Tryptose Broth,用途:用于大肠杆菌和大肠菌群的测定
M9肉汤,英文名:M9 Broth,用途:——用于培养重组大肠杆菌菌株
肉浸液肉汤,英文名:Meat Infusion Broth,用途:用于蜡样芽胞杆菌的纯培养
Bolton增菌培养基基础(含化血红素),英文名:Bolton Enrichment Medium with chlorhematin Base,用途:用于弯曲菌选择性增菌,每100ml中添加Bolton增菌培养基基础添加剂
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
HUT102细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H4-II-E-C3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
RWPE1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
TH1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HSC-3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞背景资料:软骨肉瘤;男性
CHL细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
3T3TK细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HCCIH01细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
无机盐淀粉琼脂,英文名:ISP Medium4(Inorganic Salts-Starch Agar),用途:用于链霉菌属的培养鉴定
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)ELISA试剂盒,英文名:Mouse IGFBP7 ELISA Kit,规格:48T/96T
药敏试验肉汤,英文名:Sensitivity Disk Broth,用途:用于抗生素药敏试验
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NGKG琼脂基础,英文名:NGKG Agar Base,用途:用于蜡样芽胞杆菌的检测,每200ml添加2支50%卵黄盐水悬液和1支多粘菌素B溶液
酸琼脂(CAA),英文名:Caffeic Acid Agar,用途:用于新生隐球菌及其他隐球菌的培养
MD培养基,英文名:Minimal Dextrase Medium,用途:用于酵母菌的筛选
大鼠SPARC样蛋白1(SPARCL1)ELISA试剂盒,英文名:SPARCL1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人基酰化酶1(ACY1)ELISA试剂盒,英文名:Human ACY1 ELISA Kit,规格:48T/96T
NCI-H1581[H1581]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HH细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:每2-3天换液