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Sol8小鼠骨骼肌肌肉母细胞系 消化过程需要注意哪些

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  • Sol8小鼠骨骼肌肌肉母细胞系 消化过程需要注意哪些
    HDLM-2细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HT-ori3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    hEM1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    动力培养基,英文名:Power Medium,用途:用于细菌动力试验
    马铃薯葡萄糖水(PD水),英文名:Potato Dextrose Water,用途:用于真菌培养和GVC培养基的制备(每100ml添加1支GVC增菌液添加剂)
    细胞形态特性:详见细胞说明书
    Eugon 肉汤,英文名:Eugon Broth,用途:用于细菌的培养和增菌
    酵母基酸缺陷型合成液体培养基(亮酸/色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
    假单胞菌分离琼脂,英文名:Pseudomonas Isolation Agar,用途:用于假单胞菌的检验,每升培养基中添加20ml甘油
    造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中Z常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
    U118MG细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HelaS3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    MLE 12细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
    哥伦比亚肉汤,英文名:Columbia Broth,用途:用于细菌的培养
    结晶紫中性红胆盐琼脂(含葡萄糖和乳糖),英文名:Violet Red Bile Agar with Glucose and Lactose,用途:用于肠道菌选择性分离和计数
    吡哆醇Y培养基,英文名:Pyridoxine Y medium,用途:用于吡哆醇测定
    LO2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一代
    支原体肉汤基础(Frey),英文名:Mycoplasma Broth Base(Frey),用途:无红,用于支原体培养,每 100ml 添加 10ml 马血清
    艾默生YpSs琼脂/酵母-淀粉琼脂,英文名:Emerson YpSs Agar/ Yeast protein Soluble starch Ag,用途:用于异水霉属及其他霉菌的培养
    植物胨酵母琼脂,英文名:Phytone Yeast Extract Agar,用途:用于皮肤真菌尤其是癣状毛癣菌等致病性真菌的选择性分离
    细胞背景资料:骨骼肌;C3H
    支原体琼脂培养基,英文名:Mycoplasma Agar Medium,用途:用于支原体的培养
    传代细胞培养注意事项:1)掌握好细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握好消化浓度,当消化液浓度过高时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。体内细胞培养及其操作步骤:瘤细胞悬液接种1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至10(7)~10(8)/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>10(6)细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,固定为一个相对稳定的时间。腹水瘤的建立与腹水瘤的接种:将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下:1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种1×10(6)腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7-12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3-5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
    人乙肝(HBsAg- preS1)ELISA试剂盒,英文名:Human HBsAg- preS1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素12(SIGLEC12)ELISA试剂盒,英文名:SIGLEC12 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA试剂盒,英文名:Human cPLA2 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人睾酮(T)ELISA试剂盒,英文名:Human T ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    小鼠Rap鸟嘌呤交换因子1(RAPGEF1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse RAPGEF1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠抗丝聚蛋白(AFA)ELISA试剂盒,英文名:AFA ELISA Kit,规格:48T/96T
    Clara细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    SU.86.86细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代;
    NCI-H1963细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:每周换液2次。
    人孕激素受体(Pr)ELISA试剂盒,英文名:Human Pr ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
    大鼠嗜环蛋白/亲环素A(CYPA)ELISA试剂盒,英文名:CYPA ELISA Kit,规格:48T/96T
    人Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)ELISA试剂盒,英文名:Human KL-6 ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠封闭蛋白4(CLDN4)ELISA试剂盒,英文名:CLDN4 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人微纤丝关联蛋白4(MFAP4)ELISA试剂盒,英文名:Human MFAP4 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠拓扑异构酶Ⅰ(TOP1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse TOP1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    ECC-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HCT-116细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:3传代,3-4天换液一次
    细胞生长特性:贴壁
    胆汁液态培养基,英文名:Bile Broth Medium,用途:用于粪链球菌验证和培养
    乳酸菌霉素琼脂2,英文名:Lactobacillus Chloramphenicol Agar 2,用途:——用于干酪乳杆菌和乳酸片球菌的培养
    酵母基酸缺陷型合成液体培养基(亮酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium without Leuc,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
    霉菌琼脂培养基,英文名:Mould Agar Medium,用途:含琼脂,用于霉菌分离培养
    贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得Z多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
    抗生素培养基40号,英文名:Medium 40,用途:用于微生物方法测定抗生素效价
    细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
    3%NaCl赖酸脱羧酶试验培养基,英文名:Lysine-decarboxylase Test Medium with 3%NaCl,用途:用于弧菌的赖基酸脱羧酶试验
    酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(组酸/亮酸/色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
    麦芽汁肉汤,英文名:Malt Extract Broth,用途:含0.6%麦芽浸粉,不含霉素,用于霉菌和酵母菌的培养
    SSP-25细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    Colon26细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    FD-LSC-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    JB6Cl30-7b细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
    SPC-A-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
    OS-RC-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
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