Walker/LLC-WRC256大鼠腹水癌细胞系 传代一次要多少天

Walker/LLC-WRC256大鼠腹水癌细胞系 传代一次要多少天
Lncap细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；梭形；细胞传代方法：1：2传代
HUV-EC-C[HUVEC]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Huh-7.5.1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CIN-1培养基基础，英文名：Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar Base，用途：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌分离,每100ml添加1支CIN-1培养基基础添加剂
乙醇酸盐肉汤，英文名：Thioglycollate Broth（Enriched），用途：不含指示剂，用于厌氧菌、需氧菌和微需氧菌的培养，每100ml添加化血红素溶液、维生素K1溶液各1支
细胞生长特性：贴壁
抗生素培养基2号，英文名：Medium 2（Penassay Base Agar），用途：用于微生物方法测定抗生素效
VK2/E6E7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MBVP细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
贴壁细胞的消化方法介绍：1、胰酶。这是用得Z多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。优点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧，又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例，加1.5ml/孔)，2、再加0.5毫升4度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，3、轻轻吹打，细胞即完全脱落，4、按一定比例传代。
孟加拉红培养基(虎红培养基)，英文名：Rose Bengal Medium，用途：用于真菌的分离和计数
艾默生YpSs琼脂/酵母-淀粉琼脂，英文名：Emerson YpSs Agar/ Yeast protein Soluble starch Ag，用途：用于异水霉属及其他霉菌的培养
人Pdgfa相关蛋白(PDAP1)ELISA试剂盒，英文名：Human PDAP1 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
小鼠皮肤T-细胞虏获趋化因子(CTACK)ELISA试剂盒，英文名：Mouse CTACK ELISA Kit，规格：48T/96T
人原黏素α12(PCDHα12)ELISA试剂盒，英文名：Human PCDHα12 ELISA Kit，规格：48T/96T
人冠蛋白2B(CORO2B)ELISA试剂盒，英文名：Human CORO2B ELISA Kit，规格：48T/96T
人肌酸激酶同工酶MB(CKMB)ELISA试剂盒，英文名：Human CKMB ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠表面活性物质关联蛋白J(SPJ)ELISA试剂盒，英文名：SPJ ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠黄嘌呤脱酶(XDH)ELISA试剂盒，英文名：XDH ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞培养中支原体污染的经验分享：支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%，支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，95%以上是以下四种支原体：口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)，为牛源性。以上是Z常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染;严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体Z突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如万古霉素等完全不敏感；对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体Z有YZ活性及常用于支原体感染ZL的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小YZ作用，所以常不用来作为支原体感染的化学ZL剂。
包姜氏琼脂培养基基础，英文名：Bordet-Gengou Agar Medium Base，用途：用于百日咳杆菌的分离,每100ml添加1支甘油、1支青霉素溶液和15ml 无菌脱纤维绵羊全血
细胞形态特性：详见细胞说明书
改良Frey氏固体培养基基础，英文名：Modified Mycoplasma Agar Medium Base（Frey），用途：每 100ml 培养基中添加 1 支 改良Frey氏培养基基础添加剂 和 10ml 马血清
木炭-头孢苄血琼脂基础(CCBA培养基基础)，英文名：Charcoal CefalexinBlood Agar Base，用途：用于百日咳博鲍特氏菌和副百日咳博德特氏杆菌的选择性分离。每100ml添加1支头孢苄溶液和10ml无菌脱纤维绵羊血
甘露醇化钠琼脂琼脂培养基，英文名：Mannitol Salt Agar，用途：ZG药典2015，用于金黄色葡萄球菌选择性分离
双抗巧克力琼脂基础，英文名：Bi-Anti Chocolate Agar Base，用途：用于嗜血杆菌和奈瑟菌的培养,每100ml添加1支双抗巧克力琼脂添加剂和5%无菌脱纤维绵羊全血
酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)，英文名：Yeast Extract Peptone Dextrose Agar，用途：用于真菌计数
CNE1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NIT-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2-1：3传代，每周换液1-2次
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
LSC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
庖肉培养基基础，英文名：Cooked Meat Medium Base，用途：含9.8%牛心浸粉,用于厌氧菌的培养,需添加适量庖肉牛肉粒
标准Ⅰ号营养琼脂，英文名：StandaredⅠNutrient Agar，用途：用于细菌培养,营养丰富
Letheen肉汤基础，英文名：Letheen Broth Base，用途：用于卫生微生物检测,每200ml添加1支吐温80
小鼠血小板反应蛋白1(ADAMTS1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse ADAMTS1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人白介素1ε(IL1ε)ELISA试剂盒，英文名：Human IL1ε ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞背景资料：腹水癌
BG-11培养基，英文名：BG-11 Medium，用途：——不含琼脂，用于蓝藻的培养
碱性L-J培养基基础，英文名：Alkaline L-J Medium Base，用途：不含天冬酰胺,含谷酸钠,用于酸性物质处理的结核杆菌标本
普通肉汤，英文名：Routine Broth，用途：含0.1%二钾,用于致病性嗜水气单胞菌的增菌
293A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Z常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验；2)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；3)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；4)不带手套，徒手操作；5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不好，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且好几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求高，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！
AR42J细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1954细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KYSE150细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
人血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒，英文名：Human ANGPTL4 ELISA Kit，规格：48T/96T
EBTr细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SOB培养基，英文名：SOB Medium，用途：用于大肠杆菌分子遗传学菌株的培养
Honda氏产毒肉汤基础，英文名：Honda Toxin-Producing Broth，用途：用于致泻大肠埃希氏菌的产毒培养,每100ml加林可霉素9mg
MS培养基，英文名：Murashige & Skoog Medium，用途：含琼脂，广泛用于植物器官、花药、细胞和原生质体的培养
OCM-1A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MH-S细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。