MA-c小鼠小脑星形胶质细胞系 传代一次需要几天

MA-c小鼠小脑星形胶质细胞系 传代一次需要几天
Hep-3B细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HIBEpiC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs 675.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代，每周2-3次。
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(组酸/亮酸/色酸/尿嘧啶缺陷)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
1%化钠碱性蛋白胨水，英文名：1%Nacl Alkaline Peptone Water，用途：用于嗜水气单胞菌增菌
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)，英文名：Potato dextrose agar，用途：用于霉菌和酵母菌计数
小鼠GATA结合蛋白3(GATA3)ELISA试剂盒，英文名：Mouse GATA3 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠N-乙酰转移酶1(NAT1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse NAT1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人尿苷二葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)ELISA试剂盒，英文名：Human UGCG ELISA Kit，规格：48T/96T
厌氧基础琼脂，英文名：Anaerobe Basal Agar，用途：用于厌氧菌尤其是拟杆菌的培养,需添加5-10%无菌脱纤维绵羊全血
Dey/Engley中和琼脂基础，英文名：Dey/Engley Neutralizing Agar Base，用途：用于样品的制备和细菌培养,每200ml添加1支吐温80
燕麦琼脂，英文名：Oatmeal Agar，用途：用于真菌的培养
细胞生长特性：贴壁
很多朋友讨论细胞培养问题，见到很多很好的经验总结，这里说一些我个人的经验，因为一些比较特殊的原因，我自己培养接触过近300种细胞，常用于做实验的，累积有百余种，可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇ZT，并不是因为细胞消化Z重要，而是近期看到大家频繁讨论这个话题，我就抛砖引玉，下面几点拙见，可能与其它朋友总结的一些经验有点出入，仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究，得出了很多有价值的经验，也见到很多人的困惑。其实细胞培养，尤其是细胞系的培养，就消化而言，不是太难，做得多了，善于总结经验，就能把细胞越养越好。一般的程序步骤，细节操作，我这里就不讲了，只讲一些基本操作背后的知识，如果不对之处，欢迎指正，总结下来，细胞培养中消化很重要，但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要)，关键所在是细胞来源，血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题，很多时候bottleneck没有找到，虽然通过其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作，总觉得自己没有经验，而忽视试剂，溶液尤其是细胞的质量，后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。
m-Endo肉汤，英文名：m-Endo Broth，用途：用于水中大肠菌群膜过滤法检测
人脊椎蛋白2(SPON2)ELISA试剂盒，英文名：Human SPON2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人肌原纤蛋白2(FBN2)ELISA试剂盒，英文名：Human FBN2 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠蛋白激酶D2(PKD2)ELISA试剂盒，英文名：Mouse PKD2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人原黏素β15(PCDHβ15)ELISA试剂盒，英文名：Human PCDHβ15 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
大鼠抗突触前膜受体抗体(PsmRAb)ELISA试剂盒，英文名：PsmRAb ELISA Kit，规格：48T/96T
SNU-407细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
酵母粉葡萄糖霉素琼脂(YGC)，英文名：Yeast Extract Glucose Chloramphenicol Agar，用途：用于霉菌酵母菌的分离和计数
麦康凯琼脂培养基(MacC)，英文名：MacConey Agar Medium，用途：用于大肠菌群测定
N9细胞专业复苏；细胞生长特性：半贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Chapman琼脂培养基，英文名：Chapman Agar Medium，用途：用于金黄色葡萄球菌的分离培养
VRE肉汤基础，英文名：VRE Broth Base，用途：用于分离抗万古霉素的肠球菌(VRE)和高耐基糖苷类抗生素的肠球(HLARE）
细胞形态特性：详见细胞说明书
包姜氏琼脂培养基基础，英文名：Bordet-Gengou Agar Medium Base，用途：用于百日咳杆菌的分离,每100ml添加1支甘油、1支青霉素溶液和15ml 无菌脱纤维绵羊全血
胆盐乳糖培养基(BL)，英文名：Bile Lactose Medium，用途：用于铜绿假单胞菌检验
HAmEpiC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
WRL68细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
脱弧菌培养基基础，英文名：Desulfovibrio Medium Base（DSMZ Medium 63），用途：用于脱弧菌的培养，每100ml添加1支脱弧菌培养基添加剂
NGKG琼脂基础，英文名：NGKG Agar Base，用途：用于蜡样芽胞杆菌的检测,每200ml添加2支50%卵黄盐水悬液和1支多粘菌素B溶液
NCI-H187细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
NCI-H2591细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1693细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代,每周换液2次。
QG-56细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Wilkins-Chalgren厌氧菌琼脂，英文名：Wilkins-Chalgren Anaerobe Agar，用途：用于厌氧菌的培养和药敏试验
缓冲李斯特氏菌增菌肉汤基础(BLEB基础)，英文名：Buffered Listeria Enrichment Broth Base，用途：用于李氏菌的选择性增菌,每225ml添加2支啶酮酸溶液
双倍乳糖胆盐(含中和剂)培养基基础，英文名：Double Lactose Bile Medium Base，用途：用于粪大肠菌群检验,每升培养基添加2支吐温80
WEHI164细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞背景资料：星形胶质细胞
Calu-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化10分钟。1：2。3-4天长满
Mino细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：1：2传代
Hs 888.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞和上皮细胞的混合样；细胞传代方法：1：2传代；每周换液2-3次
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次Z好只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
Hurt-78细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1238[H1238]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人轻肽铁蛋白(FTL)ELISA试剂盒，英文名：Human FTL ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒，英文名：Mouse HGF ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠维生素D受体(VD R)ELISA试剂盒，英文名：Mouse VD R ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为300xg(约1,000rpm)，5-10分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时Z常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于4°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial，融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之Z好方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
SK-N-AS细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：5-1：10传代；每周换液2-3次。
TSN琼脂，英文名：Trypticase Sulfite Neomycin Agar，用途：用于产气荚膜梭菌的选择性分离和计数
营养葡萄糖琼脂(NGA)，英文名：Nutrient Glucose Agar(Waksman, 1957)，用途：用于链霉菌属的培养鉴定
Caki-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：3—1：6传代，每周换液2—3次
MOLP-2细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。