Sol8小鼠骨骼肌肌肉母细胞系 专业保种ZX
HECV细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KMST-6细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LX2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
M-NFS-60细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
U251细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:多角;细胞传代方法:1:2传代
EB2细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:4 X 105 cells/mL and maintain at between 4 X 105 and 1 X 106 cells/mL.,每2-3天换液
细胞背景资料:骨骼肌;C3H
大鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒,英文名:CXCR3 ELISA Kit,规格:48T/96T
人偶对蛋白(SYMPK)ELISA试剂盒,英文名:Human SYMPK ELISA Kit,规格:48T/96T
THP-1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:单核细胞;细胞传代方法:维持细胞浓度在2-4×105-8×105/ml,勿超过1×106/ml;2-3天换液1次。
HEC-251细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCL-H548细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
我常看到一个比较复杂的四步消化法,这个挺有意思,我也是次听说,应该是网友自己发展出来的方法,很有参考价值。但我估计这个方法可能对付少数非常怪异的细胞才需要这么复杂的程序。我目前养过的近300株细胞里面,还没遇到这么怪异的。比如Caco2其实是很好消化的细胞,不需要胰酶孵育即可,只是有点成片分布。不要以为成片分布是自己没养好,这个视细胞而定。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化好导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的特性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不好;比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),就以colon cancer为例,比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次Z多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
蛋白胨水培养基,英文名:Peptone Water Medium,用途:用于细菌靛基质试验
APA培养基基础,英文名:APA Medium Base,用途:用于嗜盐菌的培养,灭菌后需添加1%无菌碳酸钠
缓冲动力-盐培养基基础,英文名:Buffered Power-Nitrate Medium Base,用途:用于产气荚膜梭菌的盐还原试验,每200ml添加1支甘油
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
大鼠着丝粒蛋白B(CENPB)ELISA试剂盒,英文名:CENPB ELISA Kit,规格:48T/96T
P815细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
PC-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H1703细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:3—1:6传代,每周换液2—3次
HSAS2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H1792[H1792]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次Z多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
麸皮琼脂培养基,英文名:Wheat Bran Agar Medium,用途:用于细菌、真菌的培养
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
脑心浸出液肉汤(BHI/BHIB),英文名:Brain Heart Infusion Broth,用途:用于细菌尤其是葡萄球菌的增菌和培养(SN/ISO)
无菌胰酪大豆胨琼脂培养基/大豆酪蛋白琼脂培养基,英文名:Sterile Soybean-Casein Digest Agar Medium,用途:用于药厂模拟灌装
乳酸菌霉素肉汤1,英文名:Lactobacillus Chloramphenicol Broth 1,用途:——用于干酪乳杆菌的培养
大鼠转化生长因子β1(TGFβ1)ELISA试剂盒,英文名:TGFβ1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人肾上腺髓质素2(ADM2)ELISA试剂盒,英文名:Human ADM2 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞生长特性:贴壁
JK(Jurkat)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
3T3swiss细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Calu-6细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:消化20分钟。1:2。5-6天长满。
LTEP-P细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Littman琼脂基础,英文名:Littman Agar Base,用途:用于真菌的分离培养,每100ml添加0.3g链霉素
Dey/Engley中和琼脂基础,英文名:Dey/Engley Neutralizing Agar Base,用途:用于样品的制备和细菌培养,每200ml添加1支吐温80
抗生素培养基3号,英文名:Medium 3(Penassay Broth),用途:用于微生物方法测定抗生素效价
甘油甘酸琼脂基础,英文名:Glycerol glycine agar (Okazaki and Okami, 1976),用途:用于链霉菌属的培养鉴定,每100ml添加2支甘油
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
营养盐琼脂培养基,英文名:Nutrient Salt Agar Medium,用途:用于KJ性能试验,每升培养基中添加0.5g吐温-80
乙醇酸盐培养基(Brewer),英文名:Thioglycollate Medium (Brewer),用途:以美蓝/亚甲基蓝为指示剂,用于厌氧菌培养
碱性胆盐琼脂,英文名:Alkaline Bile Salt Agar,用途:用于霍乱弧菌的选择性分离
人通用转录因子ⅡE肽1(GTF2E1)ELISA试剂盒,英文名:Human GTF2E1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人鸟酸脱羧酶抗酶1(OAZ1)ELISA试剂盒,英文名:Human OAZ1 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞形态特性:详见细胞说明书
人凝血酶原前体蛋白(PIVKA-II)ELISA试剂盒,英文名:Human PIVKA-II ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠Sestrin小鼠3蛋白(SESN3)ELISA试剂盒,英文名:Mouse SESN3 ELISA Kit,规格:48T/96T
LAPT肉汤,英文名:LAPT Broth,用途:基础培养基,用于乳酸菌的培养
大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪大豆胨液体培养基),英文名:Fluid Soybean-Casein Digest Broth,用途:用于无菌检查和细菌培养
酵母碳源基础(YCB),英文名:Yeast Carbon Base,用途:用于通过氮源的利用对酵母菌进行分类
小鼠胰岛源性再生因子4(REG4)ELISA试剂盒,英文名:Mouse REG4 ELISA Kit,规格:48T/96T
人SHC-转化蛋白4(SHC4)ELISA试剂盒,英文名:Human SHC4 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
滤膜肠球菌琼脂,英文名:Membrane-filter Enterococcus Selective Agar,用途:用于水或液体中肠球菌的滤膜法计数
泛酸测定培养基,英文名:Pantothenic Acid Assay Medium,用途:用于泛酸的测定
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(尿嘧啶/亮酸/色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
CT26细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H660细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:2-3天换液1次。