TE671人胚胎横纹肌瘤细胞系 实验室四代复苏
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结1：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结2：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过7%，大于5%，太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。5、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝换课题，这个见得太多了，别不当会事。
小鼠肺炎衣原体抗体IgG(CPn IgG)ELISA试剂盒，英文名：Mouse CPn IgG ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠幽门螺旋杆菌蛋黄免疫球蛋白Y(HP-IgY)ELISA试剂盒，英文名：HP-IgY ELISA Kit，规格：48T/96T
T-47D细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
3T3-J2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
H4-II E细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞背景资料：胚胎性横纹肌肉瘤；女性
人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)ELISA试剂盒，英文名：Human FABP4 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠β淀粉样蛋白40(Aβ40)ELISA试剂盒，英文名：Mouse Aβ40 ELISA Kit，规格：48T/96T
人过氧化物酶体生物合成因子2(PEX2)ELISA试剂盒，英文名：Human PEX2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人C型凝集素结构域家族2成员C(CLEC2C)ELISA试剂盒，英文名：Human CLEC2C ELISA Kit，规格：48T/96T
A1培养基，英文名：A1 Medium，用途：用于水源中大肠菌群的检验
铜培养基，英文名：Bluestone Medium，用途：用于啤酒野生酵母的检验
细胞培养实验中常见问题总结：1)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；2)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地2--3天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于4度的，则采用邮寄冻存细胞；3)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
KP-N-RT-BM-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成神经细胞；细胞传代方法：1：2传代
CAL-33细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
T98G细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：按1：3传代
MLA-144细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
明胶培养基(营养明胶培养基)，英文名：Gelatin Medium，用途：用于细菌的明胶生化试验
抗生素培养基3号，英文名：Medium 3（Penassay Broth），用途：用于微生物方法测定抗生素效价
碳酸钠琼脂基础，英文名：Sodium Hydrogen- Carbonate Agar Base，用途：用于炭疽杆菌的毒力测定,每100ml添加3～5ml无菌马血清
肠毒素产毒培养基(不含琼脂)，英文名：Enterotoxin toxin-producing medium without Agar，用途：用于葡萄球菌产毒素检验
化镁孔雀绿增菌液(RV/MM)，英文名：Rappaport-Vassiliadis Medium，用途：用于沙门氏菌选择性增菌
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)(日本标准用)，英文名：Potato dextrose agar，用途：用于霉菌和酵母菌计数
布氏琼脂，英文名：Brucella Agar，用途：用于布鲁氏菌属的培养
酵母氮源基础，无基酸、铵，英文名：Yeast Nitrogen Base,without Amino Acid and Ammoniu，用途：用于通过碳源和氮源的利用对酵母菌进行分类
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
大鼠白介素21(IL21)ELISA试剂盒，英文名：IL21 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠α1微球蛋白(A1-MG)ELISA试剂盒，英文名：A1-MG ELISA Kit，规格：48T/96T
胰酪胨大豆琼脂培养基(TSA)，英文名：Soybean-Casein Digest Agar，用途：用于YJ剂效力检查（ZG药典2010）
YSG琼脂培养基基础，英文名：YSG Agar Medium Base，用途：用于耐热耐酸菌的检测,需使用1N或调节pH
KRC/Y细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
DMS153细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ADTC5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KF链球菌琼脂，英文名：KF Streptococcus Agar，用途：用于肠球菌、链球菌滤膜法计数和检验，每100ml培养基添加1支1%TTC溶液
Starky液体培养基，英文名：Starky Medium，用途：用于氧化杆菌的培养
YPD肉汤，英文名：YPD Broth，用途：用于分子生物学实验中酵母菌的培养和保存
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
White培养基，英文名：White Medium，用途：用于植物组织培养，适合于根的培养
牛津琼脂(OXA)基础，英文名：Oxford Agar Base，用途：用于李氏菌分离,每100ml添加多粘菌素E1支
OVMANA细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：5 x 10^4 cells/ml
HCMEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞形态特性：详见细胞说明书
293(HEK-293)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Rat Kidney Podocytes细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Tca-8113[Tca8113]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HUH-7.5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HRC-99细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞培养相关培养基选购基本指南：如何选择培养基：经常听到有人问，这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单，也可以好复杂。为什么这样说呢?如果这种细胞是购自一些细胞库，那很简单，问供应商就行了。或者找到相关的文献，作为参考。培养基这么多种，要选择起来也是个头疼的事情。除了部分培养基是公开配方的，或者是专门针对某一种细胞的，如昆虫基本培养基和神经祖细胞基础培养基， 但是大部分液体培养基都是专利配方的，也就是说其中的成分是保密的。那么你只能是检索文献、让供应商推荐，然后用自己的细胞做几次传代培养来选出Z合适的培养基。毕竟实践出真知。怎么样才可以买到好的培养基产品：首先，当然需要找对品Pai，其次是找对自己所在区域的品Pai代理商，针对自己所养的细胞，咨询供应商该选用哪种的培养基进行培养，这样就可以买到好的而且适合自己的培养基产品。关于培养基品Pai，目前公司所知道的高校实验室有些同学在用Corning系列培养产品，也有同学在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品Pai的产品。培养基的选择和使用；MEM：成分简单，贴壁细胞；DMEM：分高糖型和低糖型；IDMEM：适合细胞密度低，生长困难的细胞。如杂交细胞的筛选，DNA转染后转化细胞的筛选培养；RPM1640：应用Z广泛的培养基之一。悬浮细胞培养，主要针对淋巴细胞，也适合其他细胞；199、109培养基：成分齐全，培养效果较好；F10培养基：适合小鼠及人类二倍体细胞培养；F12培养基：适合单细胞分离培养及无血清培养；McCoy’s培养基：特别适合原代细胞及较难培养细胞的生长。
WILL-2细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：贴壁
NCTC clone 929(L929)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
M1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
庖肉培养基基础，英文名：Cooked Meat Medium Base，用途：含9.8%牛心浸粉,用于厌氧菌的培养,需添加适量庖肉牛肉粒
乙酰胺肉汤，英文名：Acetamide Broth，用途：用于铜绿假单胞菌产试验
Grein – Meyers 琼脂，英文名：Grein and Meyers Agar(Grein and Meyers, 1958)，用途：用于链霉菌属的培养鉴定
