SV40 MES 13小鼠肾小球系膜细胞系 实验室四代复苏
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
人NAD合成酶1(NADSYN1)ELISA试剂盒,英文名:Human NADSYN1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人丁肝抗体IgD(HDV IgD)ELISA试剂盒,英文名:Human HDV IgD ELISA Kit,规格:48T/96T
HT 1197细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Romas细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SUM149PT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞背景资料:肾小球系膜;SV40转化
大鼠软骨寡聚蛋白(COMP)ELISA试剂盒,英文名:COMP ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠肝脏糖原化酶(PYGL)ELISA试剂盒,英文名:Mouse PYGL ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠RAS癌基因家族成员RAB(RAB)ELISA试剂盒,英文名:Mouse RAB ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒,英文名:Mouse MIP-5 ELISA Kit,规格:48T/96T
7.5%化钠肉汤,英文名:7.5%Sodium Chloride Broth,用途:——用于微生态活菌制品中金黄色葡萄球菌的检测
淡水鱼类琼脂培养基(FWA),英文名:Fresh water fish Agar Medium,用途:用于淡水鱼体内细菌的检测
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
melan-a细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Capan-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:多边形;细胞传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
C-33A细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NT2/D1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
多价蛋白胨-酵母膏(PY)培养基,英文名:Poly-Peptone Extract Medium,用途:用于产气荚膜梭菌培养
pH7.2盐缓冲液,英文名:pH7.2 PBS Broth,用途:用于样品的稀释
巧克力血琼脂培养基基础,英文名:Chocolate Blood Agar Medium Base,用途:用于奈瑟球菌、流感嗜血杆菌的培养,需添5%~10%无菌脱纤维绵羊全血
Iso-Sensitest 肉汤,英文名:Iso-Sensitest Broth,用途:用于抗生素药敏试验
溶菌酶营养肉汤基础,英文名:Lysozyme Nutrient Broth Base,用途:用于蜡样芽胞杆菌的溶菌酶试验,每200ml添加1支0.1%溶菌酶溶液
淋病奈瑟菌增菌培养基基础,英文名:N.gonorrhoeae Enrichment Medium Base,用途:用于淋病奈瑟菌的增菌和转送,每100ml添加1支淋病奈瑟菌培养基添加剂和10ml无菌脱纤维绵羊全血
现隐肉汤,英文名:Presence Absence Broth,用途:用于水中大肠菌群计数
抗生素培养基A(PH7.0),英文名:Medium A(PH7.0),用途:用于抗生素检测
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
大鼠TATA盒结合蛋白相关因子4(TAF4)ELISA试剂盒,英文名:TAF4 ELISA Kit,规格:48T/96T
人胰岛素样生长因子2(IGF2)ELISA试剂盒,英文名:Human IGF2 ELISA Kit,规格:48T/96T
1%化钠碱性蛋白胨水,英文名:1%Nacl Alkaline Peptone Water,用途:用于嗜水气单胞菌增菌
BG-11培养基,英文名:BG-11 Medium,用途:——不含琼脂,用于蓝藻的培养
HUMSC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
FD-LSC-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SF-539细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MH肉汤Ⅱ(阳离子调节)/CAMHB,英文名:Mueller Hinton Ⅱ Broth(Cation-Adjusted)/CAMHB,用途:即CAMHB,用于细菌的敏感性试验
m-HPC琼脂,英文名:Heterotrophic Plate Count Agar,用途:用于菌落总数测定,每100ml培养基添加1ml甘油 (甘油)
BPL琼脂,英文名:BPL Agar,用途:用于沙门氏菌的选择性分离与鉴别
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
碱性蛋白胨水,英文名:Alkaline Peptone Water,用途:用于致病性嗜水气单胞菌的培养
果蝇培养基,英文名:Drosophila Medium,用途:用于果蝇的培养
RGCs细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HFT-8810细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞形态特性:详见细胞说明书
5637(HTB-9)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RAT2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CESS细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RAW 264.7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RTE细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:多角;细胞传代方法:1:3传代,3-4天换液一次
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。传代细胞培养操作步骤:1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2-5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2-3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。
KARPAS299细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁
SW 1088[SW-1088]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LS1034细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:3传代,每周2-3次
葡萄糖血琼脂基础(新霉素葡萄糖血琼脂基础),英文名:Glucose Blood Agar,用途:用于细菌的培养,需添加5-10%脱纤维绵羊血。每100ml添加1支新霉素溶液制备新霉素葡萄糖血琼脂
CATC琼脂,英文名:CATC Agar,用途:含TTC,用于肠球菌的分离和培养
XLT4琼脂,英文名:XLT4 Agar,用途:用于沙门氏菌等肠道致病菌的选择性分离