SCC-4人类鳞状上皮舌癌细胞系 专业复苏 传代稳定
菌种培养基,英文名:Strain Medium,用途:用于菌种培养与保存(pH6.5)
Wilkins-Chalgren厌氧菌肉汤,英文名:Wilkins-Chalgren Anaerobe Broth,用途:用于厌氧菌的培养和药敏试验
L型细菌高渗盐增菌培养基,英文名:L-Bacterial Hypertonic Salt Broth,用途:用于样本中L型细菌增菌培养
抗生素培养基34号,英文名:Medium 34,用途:用于微生物方法测定抗生素效价,每100ml添加1支甘油
APM培养基,英文名:Aeromonas Pyrazinamidase activity Medium,用途:用于吡嗪酰胺酶活性实验,溶解于0.2M Tris-马来酸溶液
细胞形态特性:上皮样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝换课题,这个见得太多了,别不当会事。
阿须贝氏无氮培养基,英文名:Ashby’s Nitrogen-Free Agar,用途:用于固氮菌的培养
桑塔基氏培养基基础,英文名:Starkey,s Medium Base,用途:用于脱肠菌属和脱弧菌的培养,每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
TFH细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
FDC-P1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:2-3天换液1次
NCI-H711[H711]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SN4741细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
ME-180细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
3T3-Swissalbino细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
TALL-1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:维持细胞密度在4×105-1×106 cells/ml之间,2-3天换液1次
细胞背景资料:详见相关文献介绍
MA891细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
OAW42细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HepG-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H747[H747]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
4T1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满
SUM159细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SUM102PT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
人V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物B(RELB)ELISA试剂盒,英文名:Human RELB ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞传代方法:1:2传代
人含RUN域半胱酸丰富域苄素1相互作用蛋白(Rubicon)ELISA试剂盒,英文名:Human Rubicon ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠Jo1抗体/抗组酰tRNA合成酶抗体(Jo1/HRS)ELISA试剂盒,英文名:Mouse Jo1/HRS ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠妊娠相关血浆蛋白A(PAPPA)ELISA试剂盒,英文名:PAPPA ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)ELISA试剂盒,英文名:ACEⅠ ELISA Kit,规格:48T/96T
TE-10细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
APRE-19细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
GP293细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
hTERT-HPNE细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:1)CO2培养箱:CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和YJ能力就显得尤为重要;2)烘箱(干燥箱):用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,烘箱内温度一般要达到160℃以上,通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至100℃时,停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门,以免骤冷导致玻璃器皿破裂,应等温度自然下降至100℃以下后可开门。3)超净工作台/生物安全柜:细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。4)液氮罐:为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性。5)超低温冰箱:细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30min,转放-20℃ 1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。6)恒温水浴:从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。7离心机:细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。除上述仪器外,移液器、高压灭菌锅、倒置显微镜、荧光显微镜也是细胞培养的必备仪器,发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
脑-心浸萃琼脂培养基,英文名:Brain-Heart Extraction Agar Medium,用途:用于粪链球菌验证,也可用于苛养菌的培养
MS培养基(1/2蔗糖、不含琼脂),英文名:Murashige & Skoog Medium without Agar (1/2 Sucrose,用途:不含琼脂,蔗糖15g/L,用于植物组织培养
HTM培养基基础,英文名:HTM Medium Base,用途:用于副嗜血杆菌纸片扩散法药敏试验,每100ml添加1支无菌辅酶Ⅰ(NAD)溶液
Hayflick培养基,英文名:Hayflick Medium,用途:需添加马血清、青霉素
淀粉铵盐培养基,英文名:Starch Ammonium Salt Medium,用途:用于放线菌的分离和计数
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
3%NaCl鸟酸脱羧酶试验培养基,英文名:Ornithine Decarboxylase Test Mediu with 3%NaCl,用途:用于弧菌的鸟酸脱羧酶试验
改良Gorodkowa琼脂,英文名:Modified Gorodkowa Agar,用途:用于酵母孢子的形成和培养
碱性琼脂,英文名:Alkaline Agar,用途:用于霍乱弧菌的选择性分离
甘油天门冬素琼脂基础,英文名:ISP Medium 5( Glycerol Asparagine Agar Base),用途:用于链霉菌属的培养鉴定,每100ml添加1支甘油
抗生素培养基32号,英文名:Medium 32,用途:用于微生物方法测定抗生素效价
细胞生长特性:贴壁生长
阿须贝氏甘露醇培养基,英文名:Ashby’S Mannitol Medium,用途:用于固氮菌的培养
精酸葡萄糖斜面琼脂(AGS),英文名:Arginine Glucose Slant Agar,用途:用于霍乱弧菌的复合生化试验
缓冲葡萄糖蛋白胨水培养基(MR-VP培养基),英文名:MR-VP Medium,用途:用于细菌的MR、VP试验
IM9细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
P30/OHK细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:10^5 cells/60mm dish
1.1B4/PANC-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;多角形 ;细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周2-3次。
Ca9-22细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HaCaT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:3—1:6传代,每周换液2—3次
GA-10细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:每周2-3次
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
SNU-C1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:每3-5天换液。
TFH细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SNU-484细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
PMVEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KMB-17细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
SNU354细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)ELISA试剂盒,英文名:Human MART/Melan-A ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠前列腺酸性酶(ACP3)ELISA试剂盒,英文名:Mouse ACP3 ELISA Kit,规格:48T/96T
人血管紧张素III(Ang-III)ELISA试剂盒,英文名:Human Ang-III ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CXCL16 ELISA Kit,规格:48T/96T