Bcpap人甲状腺癌乳头状细胞系 传代很慢要怎么操作
OCI-LY7细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
察氏肉汤,英文名:Czapek Dox Broth,用途:用于真菌的培养
马铃薯葡萄糖琼脂,英文名:Potato Dextrose Agar,用途:药典/欧洲药典,用于霉菌和酵母菌计数
真杆菌选择性琼脂基础(ESA),英文名:Eubacterium Selective Agar,用途:用于真杆菌的选择性分离
细胞培养无菌操作步骤和注意事项:1.打开无菌工作台及净化室的紫外灯,消毒半小时以上。2.进入净化室前先关闭紫外灯,打开超净台风机,等待30min以上,以排尽臭氧。3.穿好隔离衣,戴好口罩,帽子。4.风淋2分钟。5.0.1%水泡手,擦干。6.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管,滴管,试管,培养瓶等均事先灭菌。7.打开各类瓶盖前先过火,以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰,镊子使用前应经火焰烧灼。8.水平式风机的超净台,应使瓶口斜置,应尽量避免瓶口敞开直立。9.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系;吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口0.5cm,避免伸入培养瓶口或试管口;以防止细胞系的互相混杂污染。10.漏在培养瓶上或台上的液体,立即用酒精棉球擦净。11.操作完毕后恢复工作台面。
细胞背景资料:详见相关文献介绍
Middle Brook 7H10琼脂基础,英文名:Middle Brook 7H10 Agar Base,用途:用于分枝杆菌分离培养,每180ml添加1支甘油和4支Middlebrook OADC增菌液
甘露醇盐琼脂,英文名:Mannitol Salt Agar,用途:用于金黄色葡萄球菌选择性分离(日本标准)
RV R10肉汤,英文名:Rappaport-Vassiliadis R10 broth,用途:用于沙门氏菌的分离培养
葡萄糖琼脂,英文名:Dextrose Agar,用途:用于肠杆菌生化试验
VSC4.1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
K7M2-WT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
VP229细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人凝血因子Ⅹ(F10)ELISA试剂盒,英文名:Human F10 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠ZX粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒,英文名:Mouse NE ELISA Kit,规格:48T/96T
人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4)ELISA试剂盒,英文名:Human MCP-4 ELISA Kit,规格:48T/96T
人Bcl2样蛋白11(BCL2L11)ELISA试剂盒,英文名:Human BCL2L11 ELISA Kit,规格:48T/96T
甘油天门冬素琼脂基础,英文名:ISP Medium 5( Glycerol Asparagine Agar Base),用途:用于链霉菌属的培养鉴定,每100ml添加1支甘油
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
拟杆菌胆汁七叶苷琼脂基础(BBE),英文名:Bacteroides Bile Esculin Agar Base,用途:用于脆弱拟杆菌的分离,每100ml添加2支化血红素溶液和5支庆大霉素
如何进行细胞复苏:1)从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化;2)从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;3)离心,1000rpm,5min;4)弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;5)次日更换一次培养液,继续培养。【温馨提醒】1)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但Z好为对数生长期细胞。在冻存前一天Z好换一次培养液;2)将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作(戴棉手套),以免冻伤;3)冻存和复苏Z好用新配制的培养液。细胞复苏的时候,有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后,放在室温下,经常发生冻存管爆炸,该怎么避免出现这种情况吗?其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的?一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口,再稍拧松盖子,再放37度水浴锅中摇溶,在将细胞转移到装有37度预热过的培养基的试管中,迅速离心,再用培养基洗一遍。
KYSE70细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:5传代
Caov-3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:3传代,2—3天换液一次
SEM细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BC-021细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H1092细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
QG-56细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
传代细胞培养注意事项:1)掌握好细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握好消化浓度,当消化液浓度过高时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。体内细胞培养及其操作步骤:瘤细胞悬液接种1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至10(7)~10(8)/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>10(6)细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,固定为一个相对稳定的时间。腹水瘤的建立与腹水瘤的接种:将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下:1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种1×10(6)腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7-12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3-5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞传代方法:1:2传代
LTPEP-a-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
OCI-LY18细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
EMT-6细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
c666-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
动力-盐培养基(A法),英文名:Power-nitrate Medium,用途:用于细菌动力和盐还原试验
SS琼脂,英文名:Salmonella Shigella Agar,用途:用于肠道菌选择性分离
史娃兹鉴别培养基(SDM),英文名:Schwartz Differential Medium,用途:用于啤酒野生酵母的检验
化钠蔗糖琼脂培养基,英文名:Sodium Chloride Sucrose Agar Medium,用途:用于霍乱弧菌的选择性分离
大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪大豆胨液体培养基),英文名:Fluid Soybean-Casein Digest Broth,用途:用于无菌检查和细菌培养
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HCV-29细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
JEG细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
COR-L105细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
PYG液体培养基基础,英文名:PYG Broth Medium Base,用途:用于双歧杆菌乙酸和乳酸代谢物测定,每20ml培养基中添加1支化血红素溶液和2支化血红素溶液
解脲支原体琼脂基础,英文名:Ureaplasma urealyticum Agar Base,用途:用于解脲支原体培养,需添加尿素、小牛血清及YJ剂
碱性胆盐琼脂,英文名:Alkaline Bile Salt Agar,用途:用于霍乱弧菌的选择性分离
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
1%化钠碱性蛋白胨水,英文名:1%Nacl Alkaline Peptone Water,用途:用于嗜水气单胞菌增菌
人封闭蛋白20(CLDN20)ELISA试剂盒,英文名:Human CLDN20 ELISA Kit,规格:48T/96T
人网蛋白3(CALR3)ELISA试剂盒,英文名:Human CALR3 ELISA Kit,规格:48T/96T
APT肉汤,英文名:APT Broth,用途:用于异质发酵乳酸杆菌和其它需高含量胺素菌的培养
细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:详见细胞说明书
酵母基础,无维生素,英文名:Vitamin Free Yeast Base,用途:用于通过维生素的利用对酵母菌进行分类
NCI-H1437细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2-1:6传代,每周换液2次。
SUM149PT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H-EMC-SS细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:4-1:8传代;每周换液3次。
人脱氧辅蛋白羟化酶/单加氧酶(DOHH)ELISA试剂盒,英文名:Human DOHH ELISA Kit,规格:48T/96T
人β-位淀粉样前体蛋白裂解酶2(βACE2)ELISA试剂盒,英文名:Human βACE2 ELISA Kit,规格:48T/96T