HCCC-9810人胆管细胞型肝癌细胞系 传代很慢要怎么操作
NCI-H810[H810]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
根瘤菌培养基Ⅱ基础，英文名：Nodule Bacteria Medium Ⅱ Base，用途：用于根瘤菌的保藏和培养
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(组酸/亮酸/色酸/尿嘧啶缺陷)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
D2a培养基，英文名：D2a Medium，用途：用于原生质体的培养，需添加5%椰子乳
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增3～6次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2％～0.5％，肿瘤细胞可达3～5％；细胞接种2～3天分裂增殖旺盛，是活力Z好时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置5～10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入3～5ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上，2～4天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞背景资料：HCCC-9810细胞株源自一位女性肝胆管细胞癌患者。 HCCC-9810细胞呈上皮细胞样，染色体模式数为71，但染色体数目可以在22-117的范围内变动。倍增时间为20.4小时。 AFP，CEA和CA19-9的分泌水平低，在裸鼠中的成瘤率为20%。
自诱导TB肉汤培养基，英文名：Autoinduction Terrific Broth Medium，用途：用于重组蛋白的表达，需添加甘油
萨氏液体培养基(SDY培养基)，英文名：Sabouraud Dextrose Medium with Yeast Extract，用途：——用于真菌的培养
碱性琼脂，英文名：Alkaline Agar，用途：用于霍乱弧菌的选择性分离
维生素B12测定用培养基，英文名：Vitamin B12 Assay Broth，用途：用于维生素B12的测定
SIRC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HHL-5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PtK1(NBL-3)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)ELISA试剂盒，英文名：Human CRF ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠垂草扁桃酸(VMA)ELISA试剂盒，英文名：VMA ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠可溶性CD44V9(SCD44V9)ELISA试剂盒，英文名：SCD44V9 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠隐花色素1(CRY1)ELISA试剂盒，英文名：CRY1 ELISA Kit，规格：48T/96T
麦康凯肉汤，英文名：MacConkey Broth，用途：用于肠道菌选择性增菌
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
MRSA筛选琼脂基础，英文名：Oxacillin Resistance Screening Agar Base，用途：用于抗甲氧西林金黄色葡萄球菌的筛选,需添加抗生素
细胞冻存的步骤：1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，10分钟)；2)去上清液，加入含20%小牛血清的完全培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为5×106～1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中，每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-80℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜，放入液氮罐)Z好;或者可以在4℃，2h;然后转到-20℃，2h;-80℃，2h;放入液氮罐；5)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，Z好取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
VP303细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
GIST-T1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCT-116细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代，3-4天换液一次
Kit225-k6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BCECs细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BIC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
【冻存细胞操作】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前1d换液；2)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×10(7)/ml左右密度，离心，去上清；3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；4)分装于无菌冻存管中，每管加1.5m悬液；5)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；6)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-1℃/min的速度，在30～40min时间内，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】1)从罐中取出冻存管；2)迅速放入36℃～37℃水浴，不时摇动，使其急速融化，30～60s内完成；3)冻存管用70％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加10ml培养液；4)低速离心(500～1000r/min) 5min，去上清后再用培养液洗一次；5)用培养液适当稀释后，装入培养瓶37℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到10(7)/ml，在融后稀释20倍时，仍能保持5×10(5)/ml数量。
细胞传代方法：1：2传代
bEnd.3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Htori-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RPMI 6666细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：3-4天换液1次。
Lec1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RVS肉汤，英文名：Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth，用途：用于沙门氏菌选择性增菌
伊红美蓝琼脂(不含乳糖)，英文名：Levine’s Eosin-Methylene Blue Agar without Lactose，用途：大肠杆菌基因学研究
三糖铁琼脂培养基，英文名：Triple Sugar-Iron-Agar Medium，用途：用于肠杆菌科细菌生化试验
改良CCDA培养基基础，英文名：Modified CCDA Medium Base，用途：用于弯曲菌选择性分离,每100ml添加1支改良CCDA培养基基础添加剂
脑膜炎奈瑟氏菌糖发酵琼脂基础，英文名：Sugar Fermentation Agar for Neisseria Meningitidi，用途：用于脑膜炎奈瑟氏菌糖发酵试验
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
OVSAHO细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H889[H889]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SK-LMS-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2-1：5传代，2-3天换液1次。
Rogosa SL肉汤，英文名：Rogosa SL Broth，用途：用于口腔、阴道和粪便中乳酸杆菌的检验，每升添加1.32ml冰乙酸和1ml吐温80
含0.2%可溶性淀粉的BCP脱脂奶粉平板计数培养基，英文名：BCP Medium with 0.2% Soluble Starch，用途：用于嗜热菌芽孢计数
去氧胆酸盐柠檬酸盐琼脂，英文名：Deoxycholate Citrate Agar，用途：用于沙门氏菌选择性分离
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
木糖赖酸脱氧胆酸盐琼脂培养基(XLD)，英文名：Xylose lysine Desoxycholate Agar，用途：用于肠道菌选择性分离
人神经纤维素2(NF2)ELISA试剂盒，英文名：Human NF2 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒，英文名：HDL ELISA Kit，规格：48T/96T
肝浸液肉汤，英文名：Liver Infusion Broth，用途：用于布鲁氏菌及其它苛养菌的培养
细胞生长特性：贴壁生长
细胞形态特性：上皮细胞样
无乳固氮螺菌培养基，英文名：Azospirillum Amazonense Medium，用途：用于无乳固氮螺菌的培养
GIST-48细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KLE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代，3-4天换液一次
HELF细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
人癌胚铁蛋白(CEF)ELISA试剂盒，英文名：Human CEF ELISA Kit，规格：48T/96T
人激肽释放酶7(KLK7)ELISA试剂盒，英文名：Human KLK7 ELISA Kit，规格：48T/96T
