Ca9-22人口腔上皮癌细胞系 消化操作需要注意什么
绿脓菌素测定用培养基(PDP)基础，英文名：Pseudomonas Agar for Determine of Pyocyanin，用途：用于绿脓菌素测定,每100ml添加1ml甘油(甘油)
需氧-厌氧菌琼脂培养基，英文名：Aerobe- Anaerobic Agar Medium，用途：用于灭菌与消毒鉴定试验
改良Letheen琼脂基础，英文名：Letheen Agar Base, Modified，用途：用于卫生微生物检测,需添加7g/L吐温80
人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA试剂盒，英文名：Human PGDS ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素12(SIGLEC12)ELISA试剂盒，英文名：SIGLEC12 ELISA Kit，规格：48T/96T
Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基基础，英文名：Karmali’s Campylobacter Medium，用途：用于弯曲菌的选择性分离培养,每100ml添加1支Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基添加剂（含头孢哌酮、化血红素、万古霉素）
细胞背景资料：详见相关文献介绍
葡萄糖血琼脂基础(新霉素葡萄糖血琼脂基础)，英文名：Glucose Blood Agar，用途：用于细菌的培养,需添加5-10%脱纤维绵羊血。每100ml添加1支新霉素溶液制备新霉素葡萄糖血琼脂
人食欲素B/阿立新B(OXB)ELISA试剂盒，英文名：Human OXB ELISA Kit，规格：48T/96T
人凋亡相关因子(FAS)ELISA试剂盒，英文名：Human FAS ELISA Kit，规格：48T/96T
冷冻细胞解冻程序：依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例，制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类，若因实验需要，必须有所不同时，务必以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清)，对细胞而言差异极大，请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于37°C水槽中回温，回温后喷以70%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。取出冷冻管，立即放入37°C水槽中快速解冻，水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿，否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化后，以70%ethanol擦拭冷冻管外部，移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度，于无菌操作台内取10ml培养基加至T25或T75flask中。取出已解冻之细胞悬浮液，缓缓加入T25或T75flask内之培养基，混合均匀，放入37°C，5%CO2培养箱培养。对绝大多数细胞而言，1%以下之冷冻保护剂DMSO，不会对细胞之贴附或活化有不良影响，不需立刻由解冻细胞中去除，待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞，需立即去除DMSO者，则可将解冻后之细胞悬浮液放入5-10ml培养基中，离心300xg(约1000rpm)，5分钟，小心移去上清液，加入适量新鲜培养基，将细胞均匀混合后，转移至培养瓶中，再放入37°C，5%CO2培养箱培养。
细胞形态特性：上皮细胞
抗生素培养基40号，英文名：Medium 40，用途：用于微生物方法测定抗生素效价
自诱导LB肉汤培养基，英文名：Autoinduction Luria-Bertani Broth Medium，用途：用于重组蛋白的表达，需添加甘油
梭状芽孢杆菌计数琼脂，英文名：Clostridia Count Agar，用途：用于梭状芽孢杆菌计数
哥伦比亚血琼脂基础，英文名：Columbia Blood Agar Base，用途：广泛用于细菌,尤其是苛养菌的培养,添加无菌脱纤维绵羊全血
RSMA培养基，英文名：Ruthenium Skim Milk Agar Medium，用途：用于乳酸杆菌、乳酸链球菌的选择性分离
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
Amies运送培养基(含活性碳)，英文名：Amies Transport Medium with carbon，用途：用于致病菌标本的采集、运输和保存
NRK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
M109细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCC-366细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HBVP细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
抗生素培养基8号，英文名：Medium 8，用途：用于微生物方法测定抗生素效价
Martin-Lewis琼脂基础，英文名：Martin-Lewis Agar Base，用途：用于致病性奈瑟氏菌的分离
1%吐温80-玉米琼脂培养基基础，英文名：1% Tween80-Corn Meat Agar Medium Base，用途：用于白色念珠菌产芽管试验,每100ml添加1ml吐温80(吐温80)
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OKT 3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SK-MEL-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：多边形的；细胞传代方法：1：3-1：6传代，2-3天换液1次。
HIPEpiC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Sf-9细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BAr-T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s)，弃之，再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用2%利多卡因消化5-8分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用0.04%的EDTA冲洗一次，再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
LB琼脂(Lennox)，英文名：LB Agar,Lennox，用途：用于分子生物学中大肠杆菌的培养
3%化钠碱性蛋白胨水，英文名：3%Nacl Alkaline Peptone Water，用途：用于副溶血性弧菌选择性增菌
大鼠内皮糖蛋白(ENG)ELISA试剂盒，英文名：ENG ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠纤维连接蛋白(FN)ELISA试剂盒，英文名：FN ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
自诱导TB肉汤培养基，英文名：Autoinduction Terrific Broth Medium，用途：用于重组蛋白的表达，需添加甘油
Caov-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代，2—3天换液一次
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：1)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在1-2min)；2)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加6-8ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；4)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周2-3次)，待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Z长不宜超过72小时)；2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养；3)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
EC9706细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
SK-MEL-5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：星形的；细胞传代方法：1：3-1：6传代，2-3天换液1次。
IFRS1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
乳糖发酵培养基/乳糖复发酵培养基，英文名：Lactose Broth，用途：乳糖复发酵培养基,用于大肠菌群的测定
麦康凯肌醇阿东醇羧苄青霉素琼脂(MIAC)基础，英文名：MIAC Agar Base，用途：用于克雷伯氏菌选择性分离,每100ml添加1支羧苄青霉素
3%NaCl甘露醇发酵培养基，英文名：Mannitol Fermentation Medium with 3%Nacl，用途：用于弧菌的甘露醇发酵试验
细胞生长特性：贴壁生长
HES细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
A-427细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人可溶性44s分子(sCD44s)ELISA试剂盒，英文名：Human sCD44s ELISA Kit，规格：48T/96T
人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA试剂盒，英文名：Human GAP ELISA Kit，规格：48T/96T
人膜联蛋白A3(ANXA3)ELISA试剂盒，英文名：Human ANXA3 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠凝血因子Ⅴ(FⅤ)ELISA试剂盒，英文名：FⅤ ELISA Kit，规格：48T/96T
