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HEL人红白细胞白血病细胞系 复苏时间短 更专注

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  • HEL人红白细胞白血病细胞系 复苏时间短 更专注
    FHL124细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    DTA培养基,英文名:DTA Medium,用途:用于乳与乳制品中嗜热需氧芽孢数的测定
    改良盐缓冲液,英文名:Modified Phosphate Saline Buffer,用途:用于小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌
    NCI-H1781[H1781]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    BHK-21[C-13]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞生长特性:悬浮生长
    MeWo细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    RENCA细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    NKM-1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    Elliker琼脂,英文名:Elliker Agar,用途:用于乳酸杆菌、乳酸链球菌的培养
    胰酪蛋白胨葡萄糖酵母浸粉牛肉浸粉培养基(TPGYB),英文名:Trypticase peptone Glucose Yeast Extract Beef,用途:用于肉毒梭菌增菌培养
    改良Camp-BAP琼脂基础,英文名:Camp-BAP Agar,Modified,用途:用于弯曲杆菌选择性分离,每100ml添加改良Camp-BAP琼脂基础添加剂A、改良Camp-BAP琼脂基础添加剂B各1支
    KCL-22细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
    细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
    MPVECs细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞传代培养的胰酶消化法:传代培养:是指细胞从一个培养瓶以1:2或1:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。传代细胞,可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代,部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤:①入无菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒双手;②倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热;③超净台台面应整洁,用75%酒精棉球擦拭清洁;④打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右,关闭紫外灯,打开风机清洁空气除去臭氧;⑤点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内;⑥将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上;⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每个大培养瓶加入1ml胰酶,小培养瓶用量酌减,盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖,适度拧紧后稍回转,以利于CO2的进入,将培养瓶放回CO2培养箱;⑩对悬浮培养细胞,步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
    3T3-F442A细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    RCM-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:4传代,2-3天换液1次。
    细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
    大鼠蛋白激酶C-γ(PKCg)ELISA试剂盒,英文名:PKCg ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠基质金属蛋白酶1(MMP1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse MMP1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠α2巨球蛋白前体(Pre-α2 MG)ELISA试剂盒,英文名:Mouse Pre-α2 MG ELISA Kit,规格:48T/96T
    豆芽汁蔗糖琼脂培养基,英文名:Soybean sprout Extract Sucrose Agar Medium,用途:用于真菌尤其是霉菌的培养
    含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂(TSA-YE),英文名:Trypticase Soy-Yeast Extract Agar,用途:用于单核增生李斯特氏菌的纯化培养
    N6培养基,英文名:N6 Medium,用途:适合于愈伤组织和悬浮细胞培养
    细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满。
    细胞冻存知识普及:细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜(DMSO),可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。 采用"慢冻快融"的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1到-2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。
    普通肉汤培养基,英文名:Routine Broth Medium,用途:用于金黄色葡萄球菌及其他细菌的增菌
    人细丝蛋白A(FLNα)ELISA试剂盒,英文名:Human FLNα ELISA Kit,规格:48T/96T
    人可溶性血管细胞粘附分子1(Svcam-1)ELISA试剂盒,英文名:Human Svcam-1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人肌球蛋白ⅠC(MYO1C)ELISA试剂盒,英文名:Human MYO1C ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠肝细胞核因子4α(HNF4a)ELISA试剂盒,英文名:Mouse HNF4a ELISA Kit,规格:48T/96T
    人唾液酸转移酶7D(SIAT7D)ELISA试剂盒,英文名:Human SIAT7D ELISA Kit,规格:48T/96T
    人胆囊收缩素/缩胆囊素B受体(CCKBR)ELISA试剂盒,英文名:Human CCKBR ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠谷胱甘肽还原酶(GR)ELISA试剂盒,英文名:Mouse GR ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒,英文名:Mouse TPA ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次Z多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
    231-luc细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
    细胞背景资料:这株淋巴母细胞样细胞株,源自一位30岁白人男性一,患有恶性红细胞白血病,能够自然产生并能诱导球蛋白合成。细胞的EB病毒核抗原阴性,没有表面免疫球蛋白与细胞质免疫球蛋白。HEL细胞表达HLA抗原(HLA-A3,AW32,BW35),β-2小球蛋白,一定比例的细胞还表达Ia抗原。这个细胞株提供了一种用于研究红细胞分化和球蛋白基因表达的模型。它类似于小鼠中的血友病。
    FL62891细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    KF链球菌肉汤,英文名:KF Streptococcus Broth,用途:用于肠球菌、链球菌计数和检验,视须要每100ml培养基添加1支1%TTC溶液
    赫氏琼脂,英文名:Hiss Agar,用途:用于鼠疫杆菌的分离培养
    GC-1 spg细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    酸性肉汤,英文名:Acid Broth,用途:用于酸性罐头食品无菌检验
    缓冲李斯特氏菌增菌肉汤基础(BLEB基础),英文名:Buffered Listeria Enrichment Broth Base,用途:用于李氏菌的选择性增菌,每225ml添加2支啶酮酸溶液
    LB肉汤(Miller),英文名:LB Broth,Miller,用途:用于分子生物学中大肠杆菌的培养
    B12肉汤培养基,英文名:B12 Assay Medium,用途:用于维生素B12检测
    SNU-C2B细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
    Hs 821.T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2传代;每周换液2-3次
    赫奇逊液体培养基,英文名:Hutchison Fluid Medium,用途:用于纤维素分解菌的培养
    SC琼脂基础,英文名:Sulfite Cycloserine Agar Base,用途:用于产气荚膜梭菌的计数和培养,需添加D-环丝酸溶液及50%卵黄盐水悬液
    NCI-H716细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长,聚团,少数贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:3—1:6传代,每周换液2—3次
    Cates-1B细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    L-cell细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    KMB17细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    抗生素培养基5号,英文名:Medium 5(Streptomycin Assay Agar),用途:用于微生物方法测定抗生素效价
    细胞形态特性:淋巴母细胞样
    酵母基酸缺陷型合成液体培养基(组酸缺陷/ SC-His),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium without Hist,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
    TPY液体培养基,英文名:TPY Broth Medium,用途:用于双歧杆菌F6PPK测定
    CAL-85-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
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