BxPC-3人原位腺癌细胞系 细胞培养平台直销价
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2~3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握好消化浓度,当消化液浓度过高时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。
人白介素35(IL35)ELISA试剂盒,英文名:Human IL35 ELISA Kit,规格:48T/96T
Duckembryo细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维母细胞样;细胞传代方法:1:2传代
OSK-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人前列腺素F受体(FP)ELISA试剂盒,英文名:Human FP ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
LADMAC细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KNS-42细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:多边形;细胞传代方法:1:2传代
HFB细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Neuro-2a[N2a]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HKF细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
改良桑塔基氏培养基基础(含2.5%NaCl),英文名:Starkey,s Medium Base, Modified with 2.5% NaCl,用途:用于脱肠菌属和脱弧菌的培养,每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
吡嗪酰胺酶检测酪蛋白大豆琼脂,英文名:Casein Digest Soybean Agar for Pzase Test,用途:用于吡嗪酰胺酶检测,溶解于Tris-马来酸缓冲液(0.2mol/L,pH6)中
HTM培养基基础,英文名:HTM Medium Base,用途:用于副嗜血杆菌纸片扩散法药敏试验,每100ml添加1支无菌辅酶Ⅰ(NAD)溶液
动力-盐培养基(B法)基础,英文名:Power-nitrate Medium,用途:用于细菌动力和盐还原试验,每100ml添加1ml甘油
细胞形态特性:上皮样
细菌L型分离琼脂,英文名:L-Bacterial Isolation Agar,用途:用于样本中L型细菌的分离培养
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(亮酸/色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(组酸/亮酸/色酸/尿嘧啶缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
苛养厌氧菌琼脂,英文名:Fastidious Anaerobe Agar (FAA),用途:用于厌氧菌的培养
细胞复苏基本方法:1.从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。3.剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。4.低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。5.加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。收到T25 flask细胞时,处理方式为:在寄送过程中,为避免起泡造成细胞脱落死亡,T25 flask均加满培养基。请检查flask外观,并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象,若有任何问题,不要打开盖子,请立即通知细胞实验室。将原封之T25 flask静置于37°C,5%CO2培养箱中,使细胞回温至37°C,并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后,于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用),仅留约5-10ml培养基于flask内,依一般培养方式再将细胞置入培养箱中,或细胞已长满盘,则将细胞做传代培养。
人单链DNA(SsDNA)ELISA试剂盒,英文名:Human SsDNA ELISA Kit,规格:48T/96T
人核仁蛋白(NPM)ELISA试剂盒,英文名:Human NPM ELISA Kit,规格:48T/96T
人衰老关键蛋白5(FBLN5)ELISA试剂盒,英文名:Human FBLN5 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞背景资料:这个细胞株不表达囊肿性纤维化跨膜电导调节子(CFTR)。CFTR阳性的细胞株是Capan-1(ATCCHTB-79)。
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,Z近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
SW 1353细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2传代。3天内可长满。
MDA-MB-435S细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:纺锤形;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满
TC7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤(TPGYT基础),英文名:TPGY Broth(TPGYT Base),用途:用于肉毒梭菌增菌培养,添加1:250胰蛋白酶配制成TPGYT
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(尿嘧啶/亮酸/色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
酵母膏-麦芽膏琼脂,英文名:ISP Medium 2(Yeast Extract Malt Extract Agar),用途:用于链霉菌属的培养鉴定
TYC肉汤培养基,英文名:Tryptone Yeast Cystine Broth Medium,用途:用于血链球菌的分离,每100ml可选择性添加1支多粘菌素B溶液以增加选择性
人兴奋性基酸转运蛋白2(EAAT2)ELISA试剂盒,英文名:Human EAAT2 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠成纤维细胞生长因子6(FGF6)ELISA试剂盒,英文名:Mouse FGF6 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA试剂盒,英文名:Mouse PF-3 ELISA Kit,规格:48T/96T
人原黏素α9(PCDHα9)ELISA试剂盒,英文名:Human PCDHα9 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
Min6细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
M4e细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KYSE-70细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
GM12878细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CCD-18Co细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
U266B1/U266细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H345[H345]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
小鼠中间α-球蛋白YZ因子H5(ITIH5)ELISA试剂盒,英文名:Mouse ITIH5 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞传代方法:消化5-10分钟。1:2。3天内可长满。
CL-11细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KBM5细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
JB6Cl30-7b细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
FHC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H2170[H2170]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
PAMC82细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H748[H748]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
金氏B培养基,英文名:King’s B Medium,用途:用于绿脓杆菌产荧光鉴定,每100ml添加1ml甘油(甘油)
幽门螺杆菌液体培养基基础,英文名:Helicobacter pylori Broth Medium Base,用途:用于幽门螺杆菌的增菌培养,每100ml添加1支幽门螺杆菌选择性添加剂和7ml无菌裂解马血
酵母浸膏葡萄糖土霉素琼脂培养基基础,英文名:OGYE Agar Base,用途:用于霉菌、酵母菌计数,葡萄糖20g/L,每100ml添加1支土霉素溶液
K2培养基基础,英文名:K2 Medium Base,用途:用于镰刀菌的选择性分离,每100ml培养基需添加1支链霉素溶液
细胞生长特性:贴壁生长
HeLa[Chang Liver]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MC53细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SJCRH30[RC13,RMS 13,SJRH30]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
AC16细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
mouseN3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
硅酸盐细菌液体培养基,英文名:Silicate Bacteria Fluid Medium,用途:用于硅酸盐细菌的培养
改良月桂基盐胰蛋白胨(mLST)肉汤基础,英文名:Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth Base,用途:用于阪崎肠杆菌增菌,每100ml中加入万古霉素1mg
四号琼脂基础,英文名:No.4 Agar Base,用途:用于霍乱弧菌选择性分离,每200ml添加1支亚碲酸钾溶液
血琼脂基础,英文名:Blood Agar Base,用途:用于血琼脂制备,需添加无菌脱纤维绵羊全血
人外显肽(Extein)ELISA试剂盒,英文名:Human Extein ELISA Kit,规格:48T/96T