YD-38人肺鳞状细胞癌细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料:详见相关文献介绍
P30/OHK细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:10^5 cells/60mm dish
KYSE-14细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
KMBC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
PT-K75细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞样;细胞传代方法:1:2传代
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因比较复杂,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浑细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟,转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r为离心机转轴ZX与离心套管底部内壁的距离;rpm为离心机每分钟的转数;RCF(relative centrifugal force)为相对离心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
C8166细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H1569细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
PASMCS细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H522细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
FAT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HSC(Human Schwann)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
TCCSUP细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代,2-3天换液1次。
COR-L279细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MKN45细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁+悬浮;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H2141[H2141]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SW1573细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-295R细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代方法:1:2传代
NZYM肉汤,英文名:NZYM Broth,用途:用于大肠杆菌菌株培养,配方被推荐用于重组l噬菌体的复制
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium without Trypt,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
四号琼脂基础,英文名:No.4 Agar Base,用途:用于霍乱弧菌选择性分离,每200ml添加1支亚碲酸钾溶液
KF链球菌肉汤,英文名:KF Streptococcus Broth,用途:用于肠球菌、链球菌计数和检验,视须要每100ml培养基添加1支1%TTC溶液
BL琼脂基础,英文名:BL Agar Base,用途:用于双歧杆菌的分离和培养,需添加5%脱纤维马血
改良牛津培养基(MOX)基础,英文名:Modified Oxford Medium Base,用途:用于李氏菌分离培养,每200ml添加1支多粘菌素E和2支拉氧头孢溶液
NCI-H650[H650]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HuT 78细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H209[H209]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
C1498细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
U266B1/U266细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NP69细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Hs 578T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RPMI 7666细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
OVHM细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
小鼠防御素α1(DEFα1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse DEFα1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人核仁蛋白58(NOP58)ELISA试剂盒,英文名:Human NOP58 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠糖原化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒,英文名:Mouse GP-BB ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠热休克蛋白60(Hsp60)ELISA试剂盒,英文名:Hsp60 ELISA Kit,规格:48T/96T
人Ⅳ型胶原α1(COL4α1)ELISA试剂盒,英文名:Human COL4α1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人TBP结合转录向下调节因子1(DR1)ELISA试剂盒,英文名:Human DR1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人XVII型胶原(COL17)ELISA试剂盒,英文名:Human COL17 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠化P38蛋白激酶(P-P38MAPK)ELISA试剂盒,英文名:Mouse P-P38MAPK ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠V-Myc细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)ELISA试剂盒,英文名:Mouse MYC ELISA Kit,规格:48T/96T
NAC液体培养基,英文名:Nalidixic Acid Cetrimide Broth,用途:——用于微生态活菌制品中铜绿假单胞菌选择性增菌
强化梭菌琼脂,英文名:Reinforced Clostridium Agar,用途:用于梭菌的分离培养
Schaedler琼脂,英文名:Schaedler Agar,用途:用于厌氧菌的分离培养
抗生素培养基3号,英文名:Medium 3(Penassay Broth),用途:用于微生物方法测定抗生素效价
BC-028细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
c666-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
UMUC-14细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
Hugh-Leifson培养基(O/F试验用),英文名:Hugh-Leifson Medium,用途:用于细菌葡萄糖利用试验,确定发酵型或氧化型
B5培养基,英文名:B5 Medium,用途:含蔗糖20g/L,适合于愈伤组织和悬浮细胞培养
双抗巧克力琼脂基础,英文名:Bi-Anti Chocolate Agar Base,用途:用于嗜血杆菌和奈瑟菌的培养,每100ml添加1支双抗巧克力琼脂添加剂和5%无菌脱纤维绵羊全血
Hayflick培养基,英文名:Hayflick Medium,用途:需添加马血清、青霉素
抗生素培养基32号,英文名:Medium 32,用途:用于微生物方法测定抗生素效价
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性:详见细胞说明书
CW-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
OVCA420细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人抗甲型肝炎病毒IgG抗体(anti-HAV)ELISA试剂盒,英文名:Human anti-HAV ELISA Kit,规格:48T/96T
人视黄醇脱酶11(RDH11)ELISA试剂盒,英文名:Human RDH11 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)ELISA试剂盒,英文名:PPARγ ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠精酸加压素受体1A(AVPR1A)ELISA试剂盒,英文名:AVPR1A ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒,英文名:Mouse NAG ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞的冻存:目前,细胞冻存Z常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×10(6)~1×10(7)/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,Z好取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
NWRI琼脂/HPCA培养基,英文名:NWRI Agar/HPC Agar,用途:用于水中异养微生物的计数
梭菌增菌培养基,英文名:Clostridium Enrichment Medium,用途:用于梭菌的增菌培养
抗生素培养基2号,英文名:Medium 2(Penassay Base Agar),用途:用于微生物方法测定抗生素效
肉浸液琼脂,英文名:Meat Infusion Agar,用途:用于细菌的培养
胱酸乳糖无电解质培养基(CLED),英文名:C.L.E.D Medium,用途:用于泌尿系统致病菌的分离和培养,也可做深部培养的贮