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LU99A人大细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富

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  • LU99A人大细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富
    细胞背景资料:详见相关文献介绍
    Y-1 cell line细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
    DAKiKi细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    Hs 706.T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2—1:3传代;每周换液2-3次
    HCC94细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
    MDA-MB-231-luc细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
    KLM1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    KBM7细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    IHC-ST1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HCC-1171细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    GT1.1 /GT1-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
    TFK-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    NCI-H358细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    CT26WT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    Mino细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:1:2传代
    NCI-H719细胞专业复苏;细胞生长特性:半贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    SK-MES-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
    细胞传代方法:1:10传代
    酵母粉葡萄糖霉素琼脂(YGC),英文名:Yeast Extract Glucose Chloramphenicol Agar,用途:用于霉菌酵母菌的分离和计数
    麸皮液体培养基,英文名:Wheat Bran Medium,用途:用于细菌、真菌的培养
    胰蛋白胨酵母浸粉肉汤,英文名:ISP Medium 1(Tryptone Yeast Extract Broth,用途:用于链霉菌属的培养鉴定
    毛藓菌琼脂6号,英文名:Trichophyton Agar #6,用途:用于毛藓菌属的鉴定
    霉菌琼脂培养基,英文名:Mould Agar Medium,用途:含琼脂,用于霉菌分离培养
    化十六烷三甲铵琼脂培养基基础,英文名:Cetrimide Agar Base,用途:用于铜绿假单胞菌选择性分离,每100ml添加1ml甘油(甘油)
    VP303细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    MIMVEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    MA-c细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    SW1990细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
    细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
    KYSE510细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    GM0637细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    B6Tert-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    MOLT-3细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞学在生命科学科中起着至关重要的作用,近年来细胞学蓬勃发展,并取得了重大的进展,细胞实验室的构建也是各个院校生物学科必备的实验室。细胞实验谨慎复杂,需要的实验设备种类繁多,下面就一些动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和YJ能力就显得尤为重要。纯水系统:细胞培养用水一般要求双蒸水,实际上普通蒸馏水经玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水是不能满足要求的,而且水中的内毒素直接参与细胞凋亡,血清中内毒素含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内毒素含量过高,会直接导致细胞提前老化。因此建议配置正式的水纯化系统。超净工作台/生物安全柜:细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。液氮罐:为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性。超低温冰箱:细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30min,转放-20℃ 1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。恒温水浴:从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。离心机:细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。移液器和细胞培养的大量耗材:细胞实验中有大量频繁的移液操作,因此各种微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各类细胞培养板、细胞培养瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量极大。除上述仪器外,高压灭菌锅、倒置显微镜也是细胞培养的必备仪器,发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
    GA-10细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:每周2-3次
    大鼠可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒,英文名:sCD30L ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠前列腺素D合酶(PTGDS)ELISA试剂盒,英文名:PTGDS ELISA Kit,规格:48T/96T
    人Intersectin人2蛋白(ITSN2)ELISA试剂盒,英文名:Human ITSN2 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人Synerginγ蛋白(SYNRγ)ELISA试剂盒,英文名:Human SYNRγ ELISA Kit,规格:48T/96T
    人一型C端前胶原(PICP)ELISA试剂盒,英文名:Human PICP ELISA Kit,规格:48T/96T
    人胆囊收缩素/肠促胰酶肽B受体(CCKBR)ELISA试剂盒,英文名:Human CCKBR ELISA Kit,规格:48T/96T
    人C-型凝集素域家族3成员B(CLEC3B)ELISA试剂盒,英文名:Human CLEC3B ELISA Kit,规格:48T/96T
    人REST辅YZ因子3(RCOR3)ELISA试剂盒,英文名:Human RCOR3 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA试剂盒,英文名:Mouse β Manase ELISA Kit,规格:48T/96T
    包姜氏琼脂培养基基础,英文名:Bordet-Gengou Agar Medium Base,用途:用于百日咳杆菌的分离,每100ml添加1支甘油、1支青霉素溶液和15ml 无菌脱纤维绵羊全血
    YPD肉汤,英文名:YPD Broth,用途:用于分子生物学实验中酵母菌的培养和保存
    Nitsch&Nitsch培养基,英文名:Nitsch&Nitsch Medium,用途:Nitsch & Nitsch (1969) 含蔗糖不含琼脂
    萨氏培养基(SDAY培养基),英文名:Sabouraud Dextrose Agar with Yeast Extract,用途:用于真菌的分离和培养
    KBM5细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    PC-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    H9c2(2-1)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
    细胞生长特性:贴壁生长
    盐肉汤,英文名:Nitrate Broth,用途:用于盐还原试验
    麦氏(Meclary)琼脂,英文名:Meclary Agar,用途:用于真菌培养
    高氏合成一号液体培养基,英文名:Gauze’s Synthetic Broth Medium,用途:用于放线菌的培养
    橄榄油培养基基础,英文名:olive oil medium for Malassezia,用途:用于马拉色菌的培养,每80ml添加3.2ml橄榄油
    N6培养基(不含琼脂),英文名:N6 Medium without Agar,用途:适合于愈伤组织和悬浮细胞培养
    细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
    细胞形态特性:成纤维细胞
    NCI-H226细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
    Toledo细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:每2-3天换液
    人基质细胞衍生因子4(SDF4)ELISA试剂盒,英文名:Human SDF4 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠微管关联蛋白1A(MAP1A)ELISA试剂盒,英文名:Mouse MAP1A ELISA Kit,规格:48T/96T
    人Ⅵ型胶原α3(COL6α3)ELISA试剂盒,英文名:Human COL6α3 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠水蛭素(HRD)ELISA试剂盒,英文名:Mouse HRD ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)ELISA试剂盒,英文名:ERK1/2 ELISA Kit,规格:48T/96T
    因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,Z近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
    玉米粉琼脂,英文名:Corn Meal Agar,用途:用于真菌培养
    缓冲葡萄糖蛋白胨水培养基(MR-VP培养基),英文名:MR-VP Medium,用途:用于细菌的MR、VP试验
    TGY肉汤培养基,英文名:Tryptone Glucose Yeast Broth Medium,用途:用于芽孢菌的培养
    MS培养基(1/2蔗糖),英文名:Murashige & Skoog Medium (1/2 Sucrose),用途:含琼脂,蔗糖15g/L,用于植物组织培养
    改良NBB肉汤基础,英文名:NBB Broth Base,Modified,用途:用于啤酒中微生物的检测
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