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QGY-7703人肝癌细胞系 细胞实验ZX更专注

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  • QGY-7703人肝癌细胞系 细胞实验ZX更专注
    细胞背景资料:该细胞系来自35岁女性的肝癌。染色体数目变化大,异倍体多。免疫荧光间接法AFP阳性反应。异体移植能力强。亚显微结构方面,核与细胞质的比例高,大的多形核和多种细胞器亚显微结构改变。在ConA作用下凝集。倍增时间约为20.5小时。用Northernblot方法,未能检测到细胞中1.3kbLFIRE-1/HFREP-1mRNA的表达。
    细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
    NSC-34细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HSC-3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    KBM5细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    NCI-H2172细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:3-1:6传代;每周换液2-3次。
    NCI-H2405细胞专业复苏;细胞生长特性:混合生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:5-1:8传代
    NCI-H1299细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;多角形;细胞传代方法:1:2传代;3天传代一次。
    T1N1琼脂,英文名:T1N1 Agar,用途:用于霍乱弧菌的纯化
    大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪大豆胨液体培养基),英文名:Fluid Soybean-Casein Digest Broth,用途:用于无菌检查和细菌培养
    结晶紫中性红胆盐琼脂(含葡萄糖和乳糖),英文名:Violet Red Bile Agar with Glucose and Lactose,用途:用于肠道菌选择性分离和计数
    9K培养基,英文名:Nine K Medium(9K Medium),用途:用于氧化亚铁杆菌的培养,需添加
    植物胨酵母琼脂,英文名:Phytone Yeast Extract Agar,用途:用于皮肤真菌尤其是癣状毛癣菌等致病性真菌的选择性分离
    细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐)Z好;或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,Z好取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
    NCI-H446细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁/悬浮生长,混合;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
    GC-2spd细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HuFACs-11细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    MS培养基(1/2蔗糖),英文名:Murashige & Skoog Medium (1/2 Sucrose),用途:含琼脂,蔗糖15g/L,用于植物组织培养
    V-P半固体琼脂(VP),英文名:Voges-Proskauer Semisolid Agar,用途:用于细菌V-P试验
    明胶盐缓冲液,英文名:Gelatin PBS Broth,用途:用于肉毒梭菌和肉毒毒素检样的制备
    人细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白(CVL)ELISA试剂盒,英文名:Human CVL ELISA Kit,规格:48T/96T
    人磷酯酶Cγ1(PLCγ1)ELISA试剂盒,英文名:Human PLCγ1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人布皮质素4(BEST4)ELISA试剂盒,英文名:Human BEST4 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人毒蕈碱型胆碱受体M3(CHRM3)ELISA试剂盒,英文名:Human CHRM3 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人白介素1θ(IL1θ)ELISA试剂盒,英文名:Human IL1θ ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒,英文名:Mouse ISR-β ELISA Kit,规格:48T/96T
    SUM149PT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    ZR75-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    KM8P培养基,英文名:Kao&Michayluk Medium,用途:用于原生质体的培养,每100ml需添加2ml椰子乳
    蛋白胨水培养基,英文名:Peptone Water Medium,用途:用于细菌靛基质试验
    西蒙氏柠檬酸盐琼脂/枸橼酸盐琼脂,英文名:Simmons Citrate Agar,用途:用于柠檬酸盐利用实验
    抗生素培养基A(PH8.0),英文名:Medium A(PH8.0),用途:用于抗生素检测
    细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满
    细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
    细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力Z好时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
    Dey/Engley中和肉汤基础,英文名:Dey/Engley Neutralizing Broth Base,用途:用于样品的制备和细菌培养,每200ml添加1支吐温80
    半固体琼脂,英文名:Semisolid Agar,用途:用于细菌动力试验
    酵母浸粉葡萄糖肉汤,英文名:Yeast Extract Glucose Broth,用途:用于地衣芽孢杆菌、芽孢菌、密执安棍状杆菌、金黄杆菌、蜂房哈夫尼菌、荧光假单胞菌和粘质沙雷氏菌的培养
    洋葱假单胞菌琼脂基础(PC),英文名:Pseudomonas Cepacia Agar Base,用途:用于洋葱假单胞菌的分离,每升培养基添加多粘菌素B300000单位
    HSC-4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    RGE细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    NCI-H1417细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    MLE 12细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
    细胞生长特性:贴壁生长
    HUVECs细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    SV-HUC-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
    MKN45细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁+悬浮;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    NPC-TW01细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HOC1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    我妻氏血琼脂基础,英文名:Wagstsuma Blood Agar Base,用途:用于副溶血性弧菌神奈川试验,每100ml添加5%无菌脱纤维绵羊全血
    Candida Elective 琼脂,英文名:Candida Elective Agar to Nickerson,用途:用于食品中假丝酵母和酵母菌总数的测定
    盐肉汤,英文名:Nitrate Broth,用途:用于盐还原试验
    B5培养基,英文名:B5 Medium,用途:含蔗糖20g/L,适合于愈伤组织和悬浮细胞培养
    细胞形态特性:上皮样
    传代细胞培养注意事项:1)掌握好细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握好消化浓度,当消化液浓度过高时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。体内细胞培养及其操作步骤:瘤细胞悬液接种1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至10(7)~10(8)/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>10(6)细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,固定为一个相对稳定的时间。腹水瘤的建立与腹水瘤的接种:将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下:1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种1×10(6)腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7-12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3-5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
    大鼠二酰甘油-O-酰基转移酶同源物1(DGAT1)ELISA试剂盒,英文名:DGAT1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人血管紧张素Ⅰ受体抗体(ANG-ⅠR)ELISA试剂盒,英文名:Human ANG-ⅠR ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠内分泌腺来源血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒,英文名:Mouse EG-VEGF ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠肌动蛋白纤维相关蛋白1(AFAP1)ELISA试剂盒,英文名:AFAP1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠α1-抗胰蛋白酶(α1AT)ELISA试剂盒,英文名:Mouse α1AT ELISA Kit,规格:48T/96T
    人胰脂肪酶(PL)ELISA试剂盒,英文名:Human PL ELISA Kit,规格:48T/96T
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