NG108-15 [108CC15]小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞系 冷藏ZX复苏更快

NG108-15 [108CC15]小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞系 冷藏ZX复苏更快
细胞背景资料：详见相关文献介绍
HMVEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HUAEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SU-DHL-5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37度消化；什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞)，吹打不超过20次后(一般10次即可)，成小规模聚集(10个细胞左右)，是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打1h，等待单细胞悬液出现。
胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤(TPGYT基础)，英文名：TPGY Broth（TPGYT Base），用途：用于肉毒梭菌增菌培养,添加1:250胰蛋白酶配制成TPGYT
改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB)/(mTSB+N基础)，英文名：mTSB Broth with Novobiocin Base，用途：用于O157菌选择性增菌,每225ml中添加1支新生霉素储备液组成含新生霉素的改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB+N)
改良罗氏培养基基础，英文名：Lowenstein-Jensen Medium Base, Modified，用途：不含天冬酰胺,含谷酸钠,用于结核杆菌检验,添加PNB制成PNB培养基,添加TCH制成TCH培养基
人白介素3受体α(IL3Rα)ELISA试剂盒，英文名：Human IL3Rα ELISA Kit，规格：48T/96T
CCC-SMC-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
A-704细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HepG-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CAL-120细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
P30/OHK细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：10^5 cells/60mm dish
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO2培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于4°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于4°C冰箱中，培养基内之CO2会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO2，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
抗生素培养基39号，英文名：Medium39，用途：用于微生物方法测定抗生素效价
麦康凯琼脂基础，英文名：MacConkey Agar Base，用途：不含碳水化合物,用于大肠杆菌的发酵研究
改良Frey氏固体培养基基础，英文名：Modified Mycoplasma Agar Medium Base（Frey），用途：每 100ml 培养基中添加 1 支 改良Frey氏培养基基础添加剂 和 10ml 马血清
蜡状芽孢杆菌琼脂基础，英文名：Bacillus Cereus Selective Agar Base，用途：用于蜡样芽孢杆菌的选择性分离，每100ml添加1支多粘菌素B溶液
大鼠脂肪酸结合蛋白3(FABP3)ELISA试剂盒，英文名：FABP3 ELISA Kit，规格：48T/96T
人花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)ELISA试剂盒，英文名：Human ALOX12 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞传代方法：1：6-1：10传代，每周换液2-3次
1.1B4/PANC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；多角形　；细胞传代方法：1：2-1：4传代；每周2-3次。
Ca9-22细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HaCaT细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：3—1：6传代，每周换液2—3次
GA-10细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：每周2-3次
PW(蛋白胨水)，英文名：Peptone Water，用途：用于样品制备
改良盐缓冲液，英文名：Modified Phosphate Saline Buffer，用途：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌
PEA琼脂基础，英文名：Phenylethyl Alcohol Agar Base，用途：用于从样本中分离革兰氏阳性球菌,每95ml添加5ml无菌脱纤维绵羊全血和1支β-乙醇
改良EC肉汤(mEC+n)基础，英文名：Modified EC Broth Base，用途：用于O157选择性增菌,每225ml中添加1支新生霉素储备液,每100ml中添加1支新生霉素储备液
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
EC-MUG培养基，英文名：EC-MUG Medium，用途：用于大肠埃希氏菌计数
EEM培养基，英文名：Enterobacteriaceae Enrichment Mannitol Medium，用途：用于肠道致病菌的增菌
EG琼脂培养基，英文名：EG Agar Medium，用途：用于厌氧菌计数，每95ml培养基需添加5ml无菌马血
小鼠血幼素(HJV)ELISA试剂盒，英文名：Mouse HJV ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠法尼基二法尼基转移酶1(FDFT1)ELISA试剂盒，英文名：FDFT1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒，英文名：C-Peptide ELISA Kit，规格：48T/96T
人大脑糖原化酶(PYGB)ELISA试剂盒，英文名：Human PYGB ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞生长特性：贴壁生长
细胞形态特性：成纤维细胞样　
甘露醇盐琼脂，英文名：Mannitol Salt Agar，用途：用于金黄色葡萄球菌选择性分离（日本标准）
肠球菌肉汤，英文名：Enterococcus Broth，用途：用于肠球菌选择性菌
改良巴尔斯氏培养基基础，英文名：Baar,s Medium for Sulfate Reducers, Modified，用途：用于脱肠球菌等盐还原细菌的培养，每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒，英文名：Mouse IGFBP-4 ELISA Kit，规格：48T/96T
人V-Myb髓细胞组织增生病毒癌基因同源物(MYB)ELISA试剂盒，英文名：Human MYB ELISA Kit，规格：48T/96T
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前1d换液；2)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×10／ml左右密度，离心，去上清；3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；4)分装于无菌冻存管中，每管加1.5m悬液；5)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；6)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-1℃／min的速度，在30～40min时间内，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管；2)迅速放入36℃～37℃水浴，不时摇动，使其急速融化，30～60s内完成；3)冻存管用70％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加10ml培养液；4)低速离心(500～1000r／min) 5min，去上清后再用培养液洗一次；5)用培养液适当稀释后，装入培养瓶37℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到10／ml，在融后稀释20倍时，仍能保持5×10／ml数量。
马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基(不含霉素)，英文名：Potato Dextrose Agar Medium（PDA），用途：用于霉菌和酵母菌计数
改良MSRV培养基基础(MSRV培养基基础)，英文名：Rappaport-Vassiliadis Medium,Semisolid Modificatio，用途：用于沙门氏菌选择性分离,每100ml需添加2mg新生霉素
BG 11海洋琼脂培养基基础，英文名：Medium BG 11 for Marine Cyanobacteria，用途：用于海洋蓝细菌的培养，每100ml添加1支维生素B12溶液
DU4475细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮，多细胞聚集；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：每周换液2—3次
HL7702细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TU212细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
NCI-H774[H774]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SF-295细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
IFRS1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SUM52PE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BHK-21[C-13]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠溶性糖蛋白130(sgp130)ELISA试剂盒，英文名：sgp130 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠白细胞分化抗原28(CD28)ELISA试剂盒，英文名：CD28 ELISA Kit，规格：48T/96T