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猪胚胎睾丸传代细胞;ST说明书

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  • 猪胚胎睾丸传代细胞;ST说明书实验要点及说明 
    1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
    2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
    3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
    4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
    5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

    以下是猪胚胎睾丸传代细胞;ST说明书详细说明:
    细胞名称   猪胚胎睾丸传代细胞;ST说明书
    形态特性 上皮细胞样

    生长特性 贴壁生长
    特征特性 ST细胞系建系于1960年(Mcclurkin,A W,et al)。ST细胞一般用于病毒增殖和分离,是猪细小病毒的理想宿主,可用于这类病毒的分离及增殖。
    培养条件 MEM-EBSS:
    Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  
    传代方法 1:
    3传代,2-3天传一代  
    传代情况 C125
    冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 
    支原体检测 阴性 
    STR STR鉴定
    同工酶
    染色体
    使用权限 A类​​
    猪胚胎睾丸传代细胞;ST说明书培养操作步骤 
    1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
    2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
    3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
    4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 
    5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。​​​​​


    猪胚胎睾丸传代细胞;ST说明书冷冻保存细胞之方法?
    冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
    冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

     


    猪胚胎睾丸传代细胞;ST说明书1aR,Ingenol
    5,7-Dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one; Chamomile; Flavone; NSC 83244; VersulinApigenin
    Ammoniated Ruthenium OxychlorideRuthenium Red
    Heroin (exempt preparation) (1 mg)3,6-Diacetylmorphine|Acetomorphine|Diamorphine; 7,8-didehydro-4,5-epoxy-17-methyl-(5α,6α)-3,6-diacetate-morphinan-3,6-diol
    Ro 01-6128 (1 mg)N-(2,2-diphenylacetyl)-ethyl ester-carbamic acid; Ro 01-6128
    Dorsomorphin (10 mg)6-[4-[2-(1-pipeidinyl)ethoxy]phenyl]-3-(4-pyridinyl)-pyrazolo[1,5-a]pyrimidine; Compound C; Dorsomorphin
    Petromyzonol (1 mg)3α,7α,12α,24-tetrahydroxy-5α-cholane; Petromyzonol
    Glycogen Hydrolysis Buffer (8 ml)Glycogen Hydrolysis Buffer
    Cyanine 5, 单琥珀酰亚胺脂 [相当于Cy5 NHS脂]Cyanine 5, monosuccinimidyl ester [equivalent to Cy5 NHS ester]
    N-[2-Methyl-4-[2-(2-methylphenyl)diazenyl]phenyl]-2-furancarboxamideCHD-5


     
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