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pCXWB-EBNA1(Plasmid #37624) 协助哺乳动物细胞中质粒复制,增强外源质粒转染效率和表达

产品信息
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    提取码:868m 

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        EBNA1 和oriP 是EB 病毒中与复制和保持病毒基因组游离性有关的重要基因元件。EBNA1 为EB 病毒核抗原1 的基因, 编码一个磷酸化的核蛋白, 蛋白的C 端为一个二聚化的DNA 结合区, EBNA1 同源二聚化与DNA 上的特异序列结合。Or iP 含有双对称( dyad symmetry DS) 和成簇的重复序列( the family of repeats FR) 。这些序列均包含与EBNA1 结合的多个同源序列, DS 区含有约共120bp 的四个EBNA1 结合位点, FR 区包含有大约20 个串联重复的30bp 序列。当EBNA1与这些序列结合后, 使病毒的基因组以稳定的游离体形式存在, 并使病毒基因组依赖宿主复制的方式复制。其复制与宿主细胞染色体复制的前S 期同步, 一个细胞周期只复制一次。游离体在分裂过程中, 通过EBNA1 以非共价的方式与宿主染色体结合, 保证了分裂时游离体进行正确的分离 。除与复制有关外, EBNA1 还有利于游离基因组的核转移, 核定位信号位于EBNA1 蛋白的中部, 其作用与转运蛋白karyopherinA2 相关 。EBNA1 也能与RNA 结合, 对基因表达进行转录后调节[3] 。此外, EBNA1 介导EB 病毒对宿主的免疫逃逸 。OriP 序列的FR 区是依赖于EBNA1 的转录增强子。
        鉴于EBNA1PoriP 的特点, Yate 在1985 年首次将这两个基因元件引入质粒。具有EBNA1PoriP 的质粒转染入靶细胞后不整合, 可以长期稳定存在, 不会造成宿主的突变 。同时, 由于它的转运入核、转录增强、免疫逃逸等功能, 使质粒携带的目的基因能够获得较高的转染效率, 高水平、持续的表达。因此, 基于EBNA1PoriP 的质粒是非病毒型基因ZL载体中比较理想的一个, 在多个基因ZL方案中, 显示了良好的应用前景。


    参考文献
    An Efficient Non-viral Method to Generate Integration-Free Human iPS Cells from Cord Blood and Peripheral Blood Cells. Okita K, Yamakawa T, Matsumura Y, Sato Y, Amano N, Watanabe A, Goshima N, Yamanaka S. Stem Cells. 2012 Nov 29. doi: 10.1002/stem.1293. 10.1002/stem.1293PubMed 23193063




    全序列

    1        TCGACATTGA TTATTGACTA GTTATTAATA GTAATCAATT ACGGGGTCAT TAGTTCATAG
    61       CCCATATATG GAGTTCCGCG TTACATAACT TACGGTAAAT GGCCCGCCTG GCTGACCGCC
    121      CAACGACCCC CGCCCATTGA CGTCAATAAT GACGTATGTT CCCATAGTAA CGCCAATAGG
    181      GACTTTCCAT TGACGTCAAT GGGTGGAGTA TTTACGGTAA ACTGCCCACT TGGCAGTACA
    241      TCAAGTGTAT CATATGCCAA GTACGCCCCC TATTGACGTC AATGACGGTA AATGGCCCGC
    301      CTGGCATTAT GCCCAGTACA TGACCTTATG GGACTTTCCT ACTTGGCAGT ACATCTACGT
    361      ATTAGTCATC GCTATTACCA TGGTCGAGGT GAGCCCCACG TTCTGCTTCA CTCTCCCCAT
    421      CTCCCCCCCC TCCCCACCCC CAATTTTGTA TTTATTTATT TTTTAATTAT TTTGTGCAGC
    481      GATGGGGGCG GGGGGGGGGG GGGGGCGCGC GCCAGGCGGG GCGGGGCGGG GCGAGGGGCG
    541      GGGCGGGCGA GGCGGAGAGG TGCGGCGGCA GCCAATCAGA GCGGCGCGCT CCGAAAGTTT
    601      CCTTTTATGG CGAGGCGGCG GCGGCGGCGG CCCTATAAAA AGCGAAGCGC GCGGCGGGCG
    661      GGAGTCGCTG CGCGCTGCCT TCGCCCCGTG CCCCGCTCCG CCGCCGCCTC GCGCCGCCCG
    721      CCCCGGCTCT GACTGACCGC GTTACTCCCA CAGGTGAGCG GGCGGGACGG CCCTTCTCCT
    781      CCGGGCTGTA ATTAGCGCTT GGTTTAATGA CGGCTTGTTT CTTTTCTGTG GCTGCGTGAA
    841      AGCCTTGAGG GGCTCCGGGA GGGCCCTTTG TGCGGGGGGA GCGGCTCGGG GGGTGCGTGC
    901      GTGTGTGTGT GCGTGGGGAG CGCCGCGTGC GGCTCCGCGC TGCCCGGCGG CTGTGAGCGC
    961      TGCGGGCGCG GCGCGGGGCT TTGTGCGCTC CGCAGTGTGC GCGAGGGGAG CGCGGCCGGG
    1021     GGCGGTGCCC CGCGGTGCGG GGGGGGCTGC GAGGGGAACA AAGGCTGCGT GCGGGGTGTG
    1081     TGCGTGGGGG GGTGAGCAGG GGGTGTGGGC GCGTCGGTCG GGCTGCAACC CCCCCTGCAC
    1141     CCCCCTCCCC GAGTTGCTGA GCACGGCCCG GCTTCGGGTG CGGGGCTCCG TACGGGGCGT
    1201     GGCGCGGGGC TCGCCGTGCC GGGCGGGGGG TGGCGGCAGG TGGGGGTGCC GGGCGGGGCG
    1261     GGGCCGCCTC GGGCCGGGGA GGGCTCGGGG GAGGGGCGCG GCGGCCCCCG GAGCGCCGGC
    1321     GGCTGTCGAG GCGCGGCGAG CCGCAGCCAT TGCCTTTTAT GGTAATCGTG CGAGAGGGCG
    1381     CAGGGACTTC CTTTGTCCCA AATCTGTGCG GAGCCGAAAT CTGGGAGGCG CCGCCGCACC
    1441     CCCTCTAGCG GGCGCGGGGC GAAGCGGTGC GGCGCCGGCA GGAAGGAAAT GGGCGGGGAG
    1501     GGCCTTCGTG CGTCGCCGCG CCGCCGTCCC CTTCTCCCTC TCCAGCCTCG GGGCTGTCCG
    1561     CGGGGGGACG GCTGCCTTCG GGGGGGACGG GGCAGGGCGG GGTTCGGCTT CTGGCGTGTG
    1621     ACCGGCGGCT CTAGAGCCTC TGCTAACCAT GTTCATGCCT TCTTCTTTTT CCTACAGCTC
    1681     CTGGGCAACG TGCTGGTTAT TGTGCTGTCT CATCATTTTG GCAAAGAATT CGCCCTTGTC
    1741     GACACCATGT CTGACGAGGG GCCAGGTACA GGACCTGGAA ATGGCCTAGG AGAGAAGGGA
    1801     GACACATCTG GACCAGAAGG CTCCGGCGGC AGTGGACCTC AAAGAAGAGG GGGTGATAAC
    1861     CATGGACGAG GACGGGGAAG AGGACGAGGA CGAGGAGGCG GAAGACCAGG AGCCCCGGGC
    1921     GGCTCAGGAT CAGGGCCAAG ACATAGAGAT GGTGTCCGGA GACCCCAAAA ACGTCCAAGT
    1981     TGCATTGGCT GCAAAGGGAC CCACGGTGGA ACAGGAGCAG GAGCAGGAGC GGGAGGGGCA
    2041     GGAGCAGGAG GGGCAGGAGC AGGAGGAGGG GCAGGAGCAG GAGGAGGGGC AGGAGGGGCA
    2101     GGAGGGGCAG GAGGGGCAGG AGCAGGAGGA GGGGCAGGAG CAGGAGGAGG GGCAGGAGGG
    2161     GCAGGAGGGG CAGGAGCAGG AGGAGGGGCA GGAGCAGGAG GAGGGGCAGG AGGGGCAGGA
    2221     GCAGGAGGAG GGGCAGGAGG GGCAGGAGGG GCAGGAGCAG GAGGAGGGGC AGGAGCAGGA
    2281     GGAGGGGCAG GAGGGGCAGG AGCAGGAGGA GGGGCAGGAG GGGCAGGAGG GGCAGGAGCA
    2341     GGAGGAGGGG CAGGAGCAGG AGGGGCAGGA GGGGCAGGAG GGGCAGGAGC AGGAGGGGCA
    2401     GGAGCAGGAG GAGGGGCAGG AGGGGCAGGA GGGGCAGGAG CAGGAGGGGC AGGAGCAGGA
    2461     GGGGCAGGAG CAGGAGGGGC AGGAGCAGGA GGGGCAGGAG GGGCAGGAGC AGGAGGGGCA
    2521     GGAGGGGCAG GAGCAGGAGG GGCAGGAGGG GCAGGAGCAG GAGGAGGGGC AGGAGGGGCA
    2581     GGAGCAGGAG GAGGGGCAGG AGGGGCAGGA GCAGGAGGGG CAGGAGGGGC AGGAGCAGGA
    2641     GGGGCAGGAG GGGCAGGAGC AGGAGGGGCA GGAGGGGCAG GAGCAGGAGG AGGGGCAGGA
    2701     GCAGGAGGGG CAGGAGCAGG AGGTGGAGGC CGGGGTCGAG GAGGCAGTGG AGGCCGGGGT
    2761     CGAGGAGGTA GTGGAGGCCG GGGTCGAGGA GGTAGTGGAG GCCGCCGGGG TAGAGGACGT
    2821     GAAAGAGCCA GGGGGGGAAG TCGTGAAAGA GCCAGGGGGA GAGGTCGTGG ACGTGGAGAA
    2881     AAGAGGCCCA GGAGTCCCAG TAGTCAGTCA TCATCATCCG GGTCTCCACC GCGCAGGCCC
    2941     CCTCCAGGTA GAAGGCCATT TTTCCACCCT GTAGGGGAAG CCGATTATTT TGAATACCAC
    3001     CAAGAAGGTG GCCCAGATGG TGAGCCTGAC GTGCCCCCGG GAGCGATAGA GCAGGGCCCC
    3061     GCAGATGACC CAGGAGAAGG CCCAAGCACT GGACCCCGGG GTCAGGGTGA TGGAGGCAGG
    3121     CGCAAAAAAG GAGGGTGGTT TGGAAAGCAT CGTGGTCAAG GAGGTTCCAA CCCGAAATTT
    3181     GAGAACATTG CAGAAGGTTT AAGAGCTCTC CTGGCTAGGA GTCACGTAGA AAGGACTACC
    3241     GACGAAGGAA CTTGGGTCGC CGGTGTGTTC GTATATGGAG GTAGTAAGAC CTCCCTTTAC
    3301     AACCTAAGGC GAGGAACTGC CCTTGCTATT CCACAATGTC GTCTTACACC ATTGAGTCGT
    3361     CTCCCCTTTG GAATGGCCCC TGGACCCGGC CCACAACCTG GCCCGCTAAG GGAGTCCATT
    3421     GTCTGTTATT TCATGGTCTT TTTACAAACT CATATATTTG CTGAGGTTTT GAAGGATGCG
    3481     ATTAAGGACC TTGTTATGAC AAAGCCCGCT CCTACCTGCA ATATCAGGGT GACTGTGTGC
    3541     AGCTTTGACG ATGGAGTAGA TTTGCCTCCC TGGTTTCCAC CTATGGTGGA AGGGGCTGCC
    3601     GCGGAGGGTG ATGACGGAGA TGACGGAGAT GAAGGAGGTG ATGGAGATGA GGGTGAGGAA
    3661     GGGCAGGAGT GAGGATCCAA GGGCGAATTC AAGCTTCGGG GACTAGTCAT ATGATAATCA
    3721     ACCTCTGGAT TACAAAATTT GTGAAAGATT GACTGGTATT CTTAACTATG TTGCTCCTTT
    3781     TACGCTATGT GGATACGCTG CTTTAATGCC TTTGTATCAT GCTATTGCTT CCCGTATGGC
    3841     TTTCATTTTC TCCTCCTTGT ATAAATCCTG GTTGCTGTCT CTTTATGAGG AGTTGTGGCC
    3901     CGTTGTCAGG CAACGTGGCG TGGTGTGCAC TGTGTTTGCT GACGCAACCC CCACTGGTTG
    3961     GGGCATTGCC ACCACCTGTC AGCTCCTTTC CGGGACTTTC GCTTTCCCCC TCCCTATTGC
    4021     CACGGCGGAA CTCATCGCCG CCTGCCTTGC CCGCTGCTGG ACAGGGGCTC GGCTGTTGGG
    4081     CACTGACAAT TCCGTGGTGT TGTCGGGGAA GCTGACGTCC TTTCCATGGC TGCTCGCCTG
    4141     TGTTGCCACC TGGATTCTGC GCGGGACGTC CTTCTGCTAC GTCCCTTCGG CCCTCAATCC
    4201     AGCGGACCTT CCTTCCCGCG GCCTGCTGCC GGCTCTGCGG CCTCTTCCGC GTCTTCGCCT
    4261     TCGCCCTCAG ACGAGTCGGA TCTCCCTTTG GGCCGCCTCC CCGCATCGGT AAATTCACTC
    4321     CTCAGGTGCA GGCTGCCTAT CAGAAGGTGG TGGCTGGTGT GGCCAATGCC CTGGCTCACA
    4381     AATACCACTG AGATCTTTTT CCCTCTGCCA AAAATTATGG GGACATCATG AAGCCCCTTG
    4441     AGCATCTGAC TTCTGGCTAA TAAAGGAAAT TTATTTTCAT TGCAATAGTG TGTTGGAATT
    4501     TTTTGTGTCT CTCACTCGGA AGGACATATG GGAGGGCAAA TCATTTAAAA CATCAGAATG
    4561     AGTATTTGGT TTAGAGTTTG GCAACATATG CCCATATGCT GGCTGCCATG AACAAAGGTT
    4621     GGCTATAAAG AGGTCATCAG TATATGAAAC AGCCCCCTGC TGTCCATTCC TTATTCCATA
    4681     GAAAAGCCTT GACTTGAGGT TAGATTTTTT TTATATTTTG TTTTGTGTTA TTTTTTTCTT
    4741     TAACATCCCT AAAATTTTCC TTACATGTTT TACTAGCCAG ATTTTTCCTC CTCTCCTGAC
    4801     TACTCCCAGT CATAGCTGTC CCTCTTCTCT TATGGAGATC CCTCGACCTG CAGCCCAAGC
    4861     TTGGCGTAAT CATGGTCATA GCTGTTTCCT GTGTGAAATT GTTATCCGCT CACAATTCCA
    4921     CACAACATAC GAGCCGGAAG CATAAAGTGT AAAGCCTGGG GTGCCTAATG AGTGAGCTAA
    4981     CTCACATTAA TTGCGTTGCG CTCACTGCCC GCTTTCCAGT CGGGAAACCT GTCGTGCCAG
    5041     CGGATCCGCT GCATTAATGA ATCGGCCAAC GCGCGGGGAG AGGCGGTTTG CGTATTGGGC
    5101     GCTCTTCCGC TTCCTCGCTC ACTGACTCGC TGCGCTCGGT CGTTCGGCTG CGGCGAGCGG
    5161     TATCAGCTCA CTCAAAGGCG GTAATACGGT TATCCACAGA ATCAGGGGAT AACGCAGGAA
    5221     AGAACATGTG AGCAAAAGGC CAGCAAAAGG CCAGGAACCG TAAAAAGGCC GCGTTGCTGG
    5281     CGTTTTTCCA TAGGCTCCGC CCCCCTGACG AGCATCACAA AAATCGACGC TCAAGTCAGA
    5341     GGTGGCGAAA CCCGACAGGA CTATAAAGAT ACCAGGCGTT TCCCCCTGGA AGCTCCCTCG
    5401     TGCGCTCTCC TGTTCCGACC CTGCCGCTTA CCGGATACCT GTCCGCCTTT CTCCCTTCGG
    5461     GAAGCGTGGC GCTTTCTCAT AGCTCACGCT GTAGGTATCT CAGTTCGGTG TAGGTCGTTC
    5521     GCTCCAAGCT GGGCTGTGTG CACGAACCCC CCGTTCAGCC CGACCGCTGC GCCTTATCCG
    5581     GTAACTATCG TCTTGAGTCC AACCCGGTAA GACACGACTT ATCGCCACTG GCAGCAGCCA
    5641     CTGGTAACAG GATTAGCAGA GCGAGGTATG TAGGCGGTGC TACAGAGTTC TTGAAGTGGT
    5701     GGCCTAACTA CGGCTACACT AGAAGAACAG TATTTGGTAT CTGCGCTCTG CTGAAGCCAG
    5761     TTACCTTCGG AAAAAGAGTT GGTAGCTCTT GATCCGGCAA ACAAACCACC GCTGGTAGCG
    5821     GTGGTTTTTT TGTTTGCAAG CAGCAGATTA CGCGCAGAAA AAAAGGATCT CAAGAAGATC
    5881     CTTTGATCTT TTCTACGGGG TCTGACGCTC AGTGGAACGA AAACTCACGT TAAGGGATTT
    5941     TGGTCATGAG ATTATCAAAA AGGATCTTCA CCTAGATCCT TTTAAATTAA AAATGAAGTT
    6001     TTAAATCAAT CTAAAGTATA TATGAGTAAA CTTGGTCTGA CAGTTACCAA TGCTTAATCA
    6061     GTGAGGCACC TATCTCAGCG ATCTGTCTAT TTCGTTCATC CATAGTTGCC TGACTCCCCG
    6121     TCGTGTAGAT AACTACGATA CGGGAGGGCT TACCATCTGG CCCCAGTGCT GCAATGATAC
    6181     CGCGAGACCC ACGCTCACCG GCTCCAGATT TATCAGCAAT AAACCAGCCA GCCGGAAGGG
    6241     CCGAGCGCAG AAGTGGTCCT GCAACTTTAT CCGCCTCCAT CCAGTCTATT AATTGTTGCC
    6301     GGGAAGCTAG AGTAAGTAGT TCGCCAGTTA ATAGTTTGCG CAACGTTGTT GCCATTGCTA
    6361     CAGGCATCGT GGTGTCACGC TCGTCGTTTG GTATGGCTTC ATTCAGCTCC GGTTCCCAAC
    6421     GATCAAGGCG AGTTACATGA TCCCCCATGT TGTGCAAAAA AGCGGTTAGC TCCTTCGGTC
    6481     CTCCGATCGT TGTCAGAAGT AAGTTGGCCG CAGTGTTATC ACTCATGGTT ATGGCAGCAC
    6541     TGCATAATTC TCTTACTGTC ATGCCATCCG TAAGATGCTT TTCTGTGACT GGTGAGTACT
    6601     CAACCAAGTC ATTCTGAGAA TAGTGTATGC GGCGACCGAG TTGCTCTTGC CCGGCGTCAA
    6661     TACGGGATAA TACCGCGCCA CATAGCAGAA CTTTAAAAGT GCTCATCATT GGAAAACGTT
    6721     CTTCGGGGCG AAAACTCTCA AGGATCTTAC CGCTGTTGAG ATCCAGTTCG ATGTAACCCA
    6781     CTCGTGCACC CAACTGATCT TCAGCATCTT TTACTTTCAC CAGCGTTTCT GGGTGAGCAA
    6841     AAACAGGAAG GCAAAATGCC GCAAAAAAGG GAATAAGGGC GACACGGAAA TGTTGAATAC
    6901     TCATACTCTT CCTTTTTCAA TATTATTGAA GCATTTATCA GGGTTATTGT CTCATGAGCG
    6961     GATACATATT TGAATGTATT TAGAAAAATA AACAAATAGG GGTTCCGCGC ACATTTCCCC
    7021     GAAAAGTGCC ACCTGGG
     





     
    温馨提示:不可用于临床ZL。
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