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核苷酸胶体染料 SYBR Green I核酸染料 10000×

产品信息
  • 1 产品简介
    高灵敏的DNA荧光染料。适用于各种电泳分析，操作简单，无须脱色或冲洗。至少可检出20 pg DNA，高于EB染色法25~100倍。与dsDNA 结合荧光信号会增强800~1000倍，0.1 ml Green-DNA Dye is sufficient for 20-25 minigels, as 1ul will prepare 10ml of agarose or PAGE gels.
    2 储存条件
    长期贮存置于-20℃。
    3 使用方法
    SYBR Green I 预染方法
    ◆   该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳
    ◆   工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的SYBR GreenⅠ稀释100倍，即为SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
    ◆   制胶：按常规方法制胶，不含任何染料。
    ◆   样品染色：向分析样品中加入SYBR GreenⅠ工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使SYBR GreenⅠ与样品中DNA充分结合。SYBR GreenⅠ工作液加入量为总上样量的1/10。
    ◆   DNA Marker染色：将5μL DNA Marker和5μL DNA Marker稀释液和1μLSYBR GreenⅠ工作液混匀，室温放置5分钟，使SYBR GreenⅠ与DNA充分结合。
    ◆   上样、电泳：按常规操作。
     
    SYBR Green I 后染方法
    ◆   按照常规方法进行电泳。
    ◆   用PH 7.0 - 8.5 的缓冲液（如：TAE，TBE 或 TE），按照10000：1的比例稀释SYBR GreenⅠ浓缩液，混匀，制成染色溶液。
    ◆   将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。凝胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上，让工作液均匀地覆盖整个胶板，并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料吸附在玻璃表面上）。
    ◆   用蓝盾TM观测。蓝光可透过玻璃，观测凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入蓝盾TM内观测。
    4 使用注意事项
    ◆ 在”SYBR GreenⅠ预染色方法”中，电泳时间不要超过2小时，否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来，会产生弥散状条带。
    ◆ 在常规用酒精沉淀核酸的过程中，SYBR Green I可以全部从双链核酸上去掉。
    ◆ 如果想对用 SYBR Green I 染过的胶进行 Southern blots，建议在预杂化和杂化溶液中加入0.1- 0.3 的SDS。
    ◆ 在紫外照射透视下，与双链 DNA 接合的 SYBR Green I 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。
    ◆ SYBR Green 对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
     
    温馨提示：不可用于临床ZL。
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