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人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH图片

产品信息
  • 人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH图片培养方法:
    收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况,如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
    培养实验又要开始了,科研工作者又该忙碌了,大家可能都在寻找适合自己的细胞,不用急,我们帮您掌舵,让您满意!
    传代方法:细胞完全汇合时,倒掉旧液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,显微镜下观察细胞完全脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉胰酶,加培养基混匀分瓶,T25瓶中加培养基至6-8ml,T75瓶加培养基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培养。

    人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH图片产品基本信息:
    细胞名称 人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH图片
    形态特性 上皮细胞样

    生长特性 贴壁生长 
    特征特性 该细胞是由Biedler JL建立的两株神经组织来源的细胞中的一株(另一株是SK-N-MC)。与SK-N-MC不同,该细胞倍增时间更长,表达更高水平的多巴胺-β-羟化酶;常作为细胞介导的细胞毒性分析的靶细胞。
    培养条件 MEM-EBSS:
    Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  
    传代方法 1:
    3传代,2-3天传一代  
    传代情况 C7
    冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 
    支原体检测 阴性 
    STR STR鉴定
    同工酶
    染色体
    使用权限 A类

    人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH图片培养操作
    1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
    2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
    3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
    1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
    2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
    3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
    人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH图片注意事项
    1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
    2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
    3.   用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
    4.   静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。
    5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
    6.   建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
    7.该细胞仅供科研使用。


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    EGFL7 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
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    GCAP1 / GUCA1A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
    甲型流感 H7N7 (A/chicken/Netherlands/1/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
    PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
    人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH图片TF3 马来酰亚胺 的Cy3替代品Tide Fluor 3 maleimide [TF3 maleimide] Supeior replacement to Cy3
    DNP马来酰亚胺DNP maleimide
    5-trans Prostaglandin F2β (50 mg)5,6-trans PGF2β|5-trans-9β-PGF2α, 5-trans Prostaglandin F2β, 9β,11α,15S-trihydroxy-prosta-5E,13E-dien-1-oic acid
    D-Carnitine (50 mg)(+)-Carnitine; 3-carboxy-2S-hydroxy-N,N,N-trimethyl-1-propanaminium, inner salt
    Cdk2 Inhibitor II (1 mg)4-[2-(5-bromo-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidene)hydrazinyl]-benzenesulfonamide; Cyclin-Dependent Kinase 2 Inhibitor II|SC-221409; Cdk2 Inhibitor II
    2,5-DMMA (5 mg)2,5-dimethoxy-N,α-dimethyl-benzeneethanamine; 2,5-Dimethoxymethamphetamine; 2,5-DMMA
    Nevirapine (50 mg)11-cyclopropyl-5,11-dihydro-4-methyl-6H-dipyrido[3,2-b:2’,3’-e][1,4]diazepin-6-one; Viramune|BI-RG 587|NSC 641530|NVP; Nevirapine
    3-Ethylmethcathinone (hydrochloride) (5 mg)1-(3-ethylphenyl)-2-(methylamino)propan-1-one, monohydrochloride; 3-EMC; 3-Ethylmethcathinone (hydrochloride)
    13,14-dihydro-15(R)-Prostaglandin E1 (100 mg)9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-prostan-1-oic acid; 13,14-dihydro-15(R)-PGE1; 13,14-dihydro-15(R)-Prostaglandin E1
    钙离子荧光探针Fluo-3, AM 大包装Fluo-3, AM Bulk package

     
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