单酰甘油脂肪酶试剂盒品Pai

单酰甘油脂肪酶试剂盒品Pai实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记 的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成 的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
产品名称: 单酰甘油脂肪酶试剂盒品Pai
英文名称: MGL ELISA Kit
英文缩写：MGL
单酰甘油脂肪酶试剂盒品Pai试剂配制
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
检测原理：本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人EPCR单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的EPCR与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(streptavidin-HRP)。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中EPCR的浓度成正比。加入终止液终止反应，在 450 nm 波长测定吸光度值。                       实验方法：双抗夹心ELISA（定量）                                                                                                                         
样本类型：血清、血浆、细胞上清、组织等相关生物样本。                                                                                                 
规格型式：96孔板、48孔板，可拆卸                                                                                                                                             
保存条件：试剂盒未拆开，2-8℃保存。已拆开，标准品-20℃保存，其它2-8℃℃保存。                                                                           
有效期：6个月。                                                                                                                                                     
检测范围：0.312-20ng/ml。                                                                                                                                  
灵敏度：10.0pg/mL。敏感性/检测浓度计算方式：敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性。                                                                         变异系数：板内变异系数<10%,板间变异系数<15%。                                                                                                                                          
回收率：三组已知的高、中、低浓度样品，进行五次回收率评估，回收率在85%-115%之间。
单酰甘油脂肪酶试剂盒品Pai需用户自己提供的实验器材和试剂： 
1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS。试剂盒内提供足量。如需额外缓冲液可参考如下配方)。
0.01M TBS: Add 1.2g Tris, 8.5g Nacl; 450μl of purified acetic acid or 700μl of concentrated hydrochloric acid to 1000ml H2O and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.0.01M PBS: Add 8.5g sodium chloride, 1.4g Na2HPO4 and 0.2g NaH2PO4 to 1000ml distilled water and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.*样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。
单酰甘油脂肪酶试剂盒品Pai注意事项：
1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物请避光保存。
6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为 630nm
7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸，使用时必须注意安全。
Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-CD74 Immunomagnetic Beads IP    5 mL
Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-TGM2 / Transglutaminase 2 Immunomagnetic Beads IP    5 mL
Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-HA Immunomagnetic Beads IP    5 mL
Immunoprecipitation/
CD5 / LEU1 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg
CD5 抗體, 兔單抗 ELISA   FCM    50 µg
CD5 抗體 (PE), 兔單抗 FCM    25 Test
CD5 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM    25 Test
CD5 抗體 (PE), 兔單抗 FCM    25 Test
RUVBL1 / RVB1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB  IHC-P   IP    50 µg
HBP1 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg
TALLA-1 / TSPAN7 / CD231 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg
RPRD1B 抗體, 鼠單抗 WB    50 µg
RPRD1B 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC-P   IP   50 µg
人 ERMN 基因全长ORF克隆
人 AP5M1 基因全长ORF克隆
人 SIX1 基因全长ORF克隆
人 TPM1 基因全长ORF克隆
人 MAPRE3 基因全长ORF克隆
小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 VEGF121b / VEGF-A 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 SCN2B 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 ILT6 / LILRA3 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 PGRL / IGSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
单酰甘油脂肪酶试剂盒品Pai大鼠 GNPDA1 基因全长ORF克隆
大鼠 GTPBP5 基因全长ORF克隆
大鼠 PPT2 基因全长ORF克隆
大鼠 PLBD1 基因全长ORF克隆
大鼠 G6PC 基因全长ORF克隆
单酰甘油脂肪酶试剂盒品Pai操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。