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北京碱性磷酸酶标记兔抗山羊IgG(H+L)厂家

产品信息
  • 特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京碱性磷酸酶标记兔抗山羊IgG(H+L)厂家在内的一系列抗体抗原产品,并提供一系列相关的技术服务。


    名称:北京碱性磷酸酶标记兔抗山羊IgG(H+L)厂家
    编号:ZN1982
    规格:100μl
    英文名:Rabbit Anti-Goat IgG(H+L)Secondary Antibody,AP Conjugate
    品Pai:百奥莱博
    产地:北京
    Western Blotting:1:3000-10000(Enhanced chemilμminescent detection)
    Western Blotting:1:500-3000(DAB detection)
    Direct ELISA:1:5000-30000(TMB detection)
    Optimal working dilutions must be determined by end users.
    保存:4℃ for one year.

    北京碱性磷酸酶标记兔抗山羊IgG(H+L)厂家极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:

    ·人组织因子途径YZ物2(TFPI2)检测试剂盒
    编号:ZN2439
    英文名称:Human Tissue factor pathway inhibitor 2 ELISA Kit
    规格:96T
    本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析人血清、细胞裂解液、细胞培养上清中TFPI2的含量。预先包被的抗体和检测相抗体都是亲和纯化级的TFPI2多克隆抗体。检测抗体经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的TFPI2呈正相关。

    检测指标:TFPI2;TFPI-2
    检测范围:156pg/ml~10000pg/ml
    特异性:系统和其它细胞因子无交叉反应
    敏感性:<5pg/ml

    产品组成:

     
    组分 规格 数量
    预包被抗人TFPI2抗体的96孔板 96T 1板
    重组人TFPI2标准品(冻干) 10ng/管 2管
    生物素标记抗人TFPI2(100X) 130μl 1管
    亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X) 130μl 1管
    样品稀释液 30ml 1瓶
    抗体稀释液 12ml 1瓶
    ABC稀释液 12ml 1瓶
    TMB显色液 10ml 1瓶
    TMB终止液 10ml 1瓶
    洗涤缓冲液(25X) 20ml 1瓶
    封板膜   4张


    储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)。
    有效期:6个月(4℃);12个月(-20℃)。

    参考标准曲线数据:(取自某一批次质检数据,仅供参考,用户需要自己建立标准曲线)
    浓度(pg/ml) 0 156 312 625 1250 2500 5000 10000
    OD值 0.038 0.134 0.203 0.394 0.664 1.146 1.952 2.469



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    ·Capza3 mRNA原位杂交试剂盒
    编号:ZN0182
    规格:100T
    基本信息:
    保存条件:4℃保存一年
    工作量:100张切片。
    有效期:一年。
    适用种属:rat
    标记方式:3’—尾段标记
    试剂盒中内容:
    1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
    2.预杂交液2ml;
    3.Capza3 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液2ml;
    4.封闭液5ml;
    5.生物素化鼠抗Digoxin5ml;
    6.SABC-POD 5ml;
    7.生物素化过氧化物酶5ml。
    用户自备试剂:
    原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
    缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用PBS)
    一.培养细胞和冰冻切片
    准备工作:
    固定液:4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)
    3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
    2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
    0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
    0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
    20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
    原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
    操作程序:
    注意:Z重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以YZRNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
    1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
    2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
    3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
    4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
    5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
    6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
    7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
    8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
    9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
    10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
    11.滴加生物素化鼠抗Digoxin:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
    14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
    15.必要时苏木素复染,充分水洗。
    16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
    二.石蜡切片
    如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
    1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
    2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
    3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
    4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
    结果观察:
    Capza3的细胞胞浆着色呈棕黄色。
    注意事项:
    由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。


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    Q02082 CMBL抗体 Anti-CMBL Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
    K13476 磷酸化转录调节因子C/EBPε抗体 Rabbit Anti-phospho-CEBPE (Thr74) antibody
    K22579 蛋白激酶A抗体 Rabbit Anti-PKA alpha + beta antibody
    K19225 角蛋白相关蛋白KCP3抗体 Rabbit Anti-KCP3 antibody
    K28328 跨膜蛋白SEMA4B抗体 Rabbit Anti-SEMA4B antibody
    K11350 BRD3蛋白抗体 Rabbit Anti-BRD3 antibody
    K20452 细胞增殖诱导蛋白60(早老素相关蛋白) Rabbit Anti-MTCH1 antibody
    K17099 γ-内啡肽抗体 Rabbit Anti-gamma Endorphin antibody
    K26202 磷酸化微管相关蛋白抗体 Rabbit Anti-phospho-Tau (Ser673) antibody
    Q06932 TRP1/TYRP1抗体 Anti-TRP1 Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
    K18326 整合素alpha E2 抗体 Rabbit Anti-Integrin alpha E2 antibody
    K14974 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体 Rabbit Anti-phospho-MEK1 (Ser385) antibody
    K24076 磷酸化核糖体S6蛋白激酶抗体 Rabbit Anti-phospho-RPS6KB1(Ser427) antibody
    Q04806 IL-1β抗体 Anti-IL-1 beta Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
    Q01453 CNDP1/CN1抗体 Anti-CNDP1 Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
    K12848 表皮生长因子样蛋白2抗体  Rabbit Anti-CELSR2 antibody
    K21950 */*交换样结构域蛋白1抗体 Rabbit Anti-NHEDC1 antibody
    Q02680 Arylsulfatase A/ARSA抗体 Anti-ARSA Antibody(Rabbit Monoclonal antibody)
    K27699 锌指蛋白442抗体 Rabbit Anti-ZNF442 antibody
    K10722 α增强子结合蛋白1抗体 Rabbit Anti-ATBF1 antibody
    K19823 胞浆亮*酸tRNA连接酶抗体 Rabbit Anti-Leucyl tRNA synthetase antibody
    Q00554 Endoglin/CD105抗体 Anti-Endoglin/CD105 Antibody(Mouse Monoclonal antibody)

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