特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括Western Blotting DAB显色法检测试剂盒(黄色)(兔IgG)北京厂家现货在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。
名称：Western Blotting DAB显色法检测试剂盒(黄色)(兔IgG)
编号：ZN1933
规格：1盒
品Pai：百奥莱博
产地：北京
工作原理：聚合标记法是一种酶标记方法，其敏感性比普通酶标法有明显提高。用于Western Blotting的免疫学检测，更能体现其优点。不仅能大量地节约一抗，更重要的是使条带更清晰，甚至能检测出普通酶标法无法检测出的微量条带。DAB是过氧化物酶Z重要的显色剂之一，反应产物为不溶于水、二甲*和醇的棕色沉淀物，适合于免疫印迹的显色反应。本产品采用特殊配方，具有操作简单，储存稳定，信号灵敏度高，持续时间长，背景低，结果易保存等优点。
保存条件：－20℃冷冻保存。DAB显色试剂应避光保存。
有效期：一年。
试剂盒的内容：
(1)封闭试剂：10g蛋白干粉×2包。
(2)浓缩抗体稀释液：20 ml×1瓶，为10倍浓缩液。
(3)聚合过氧化物酶标记山羊抗兔IgG0.2ml，效价1：200-400。亲和纯化抗体，经聚合法标记过氧化物酶。
(4)DAB显色试剂，含：
显色剂A：DAB×40倍浓缩液，3ml。
显色剂B：H2O2×40倍浓缩液，3ml。
显色剂C：×40倍TBS浓缩缓冲液，3ml。
使用说明需要而未提供的试剂和器材：
1．转印了蛋白样品的NC膜或PVDF膜：通过SDS-PAGE凝胶电泳分离蛋白质抗原，将PAG胶上的蛋白质转印到硝酸纤维素膜(NC膜)或PVDF膜上。
2．稀释缓冲液：使用中性稀释缓冲液即0.02M PBS(AR0030)或0.02M TBS(AR0144)配制封闭液和抗体稀释液。0.02M PBS(pH7.2-7.6)：1000ml蒸馏水加Na2HPO4 2.8g ，NaH2PO4 0.4g，NaCl 8.5g。如果用的是含水磷酸盐，应加上分子式中水的含量。0.02M TBS(pH7.2-7.6)：1000ml蒸馏水中加Tris 2.42g,NaCl 9g;纯乙酸或浓盐*(代"酸")调节pH值(7.2-7.6)。
3．洗涤缓冲液：每1000ml中性稀释缓冲液中加入0.5ml Tween20即可。
4．一抗：选择适合的一抗，用抗体稀释液稀释相应的一抗，一般特异性抗体工作浓度为1μg/ml,具体的稀释度取决于特异性的一抗和膜上的抗原的量。
5．摇床：膜的封闭、抗体孵育和洗涤都需平稳摇晃，需在摇床上操作。
6．相机：记录结果。
操作程序：
1．通过聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳分离蛋白样本和分子量标准。
2．将蛋白样本转移至硝酸纤维素膜或PVDF膜上。
3．封闭硝酸纤维膜：用封闭蛋白干粉2g,加稀释缓冲液100ml，20-37℃封闭1-2小时。用量以浸没整张膜为准。
4．用洗涤缓冲液洗涤硝酸纤维素膜5分钟,1次。
5．配制抗体稀释液：取90ml稀释缓冲液加1g封闭蛋白干粉和10ml浓缩抗体稀释液即可。一抗、二抗均用此稀释液稀释。
6．硝酸纤维膜孵育一抗：用抗体稀释液稀释相应的一抗，一般特异性抗体浓度1μg/ml,20-37℃孵育2小时左右。如果缺乏特异性的条带或阳性不强，应提高一抗的浓度；如果有非特异性的条带，应提高一抗的稀释度。
7．用洗涤缓冲液振荡洗涤硝酸纤维素膜3次,每次5分钟。
8．硝酸纤维膜孵育二抗：用抗体稀释液稀释相应的酶标二抗，效价1：200-400。37℃孵育一个半小时左右。用户可根据实际染色情况对稀释度做适当调整。
9．用洗涤缓冲液振荡洗涤硝酸纤维膜4次,每次5分钟。
10．DAB显色:使用DAB显色试剂。按每2ml蒸馏水加显色剂A，B，C各１滴，混匀。混匀后加至膜上。室温显色。一般显色1－30分钟。
若无背景出现则可继续显色。显色后用蒸馏水洗涤以终止反应。
11．观察，照相。
注意事项：
1．试剂频繁使用时置４℃，不常使用时置－20℃。显色剂A需置－20℃冷冻保存。如有结晶析出，应确保结晶完全溶解再行使用。
2．显色工作液应新鲜配制。
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我公司的Western Blotting DAB显色法检测试剂盒(黄色)(兔IgG)北京厂家现货，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
| 编号 | 名称 |
| ZN2197 | 人生长分化因子15(GDF15)检测试剂盒(ELISA方法) |
| ZN0757 | Integrin-β1 mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN0457 | Eotaxin mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN2462 | 人TACI(TNFRSF13B)检测试剂盒 |
| ZN2352 | 人骨桥蛋白(OPN)检测试剂盒(ELISA方法) |
| ZN2031 | 人Artemin(ATRN)ELISA试剂盒 |
| ZN0189 | Caspase-1 mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN0597 | GluR3 mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN1204 | Rad51 mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN0771 | Interleukin 1β/IL-1β mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN1192 | PTHR1 mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN1362 | Telomerase mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN0371 | CYR61 mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN0655 | HINT1 mRNA原位杂交试剂盒 |
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| ZN0846 | LH mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN0834 | Laminin B mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN2454 | 人组织基质金属蛋白酶YZ剂3(TIMP-3)检测试剂盒 |
| ZN0116 | Bad mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN0514 | FGFR2 mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN2331 | 人基质金属蛋白酶10(MMP-10)检测试剂盒(ELISA方法) |
| ZN0368 | Cyp11B2 mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN2357 | 人纤溶酶原激活物YZ剂1(PAI-1)检测试剂盒 |
| ZN2341 | 人神经纤毛蛋白1(Neuropilin-1)检测试剂盒(ELISA方法) |
| ZN1595 | 人CD56重组蛋白 |
| ZN1938 | 即用型ECM试剂盒(小鼠IgG) |
| ZN2810 | 小鼠WntYZ因子1(WIF-1)检测试剂盒 |
| ZN1742 | 小鼠cathepsin B重组蛋白 |
| ZN2690 | 小鼠基膜聚糖(Lumican)检测试剂盒 |
| ZN1037 | OCCLUDIN-2 mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN2713 | 小鼠β神经生长因子(β-NGF)检测试剂盒 |
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| ZN1843 | 浓缩型免疫组化试剂盒(SABC-POD)(山羊IgG) |
| ZN1875 | SDS-PAGE Tricine蛋白上样缓冲液2×(变性) |
| ZN2881 | 大鼠白介素10(IL-10)检测试剂盒 |
| ZN0478 | ERG1 mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN2139 | 人DAND5检测试剂盒(ELISA方法) |
| ZN1538 | 生物素化鼠抗Digoxin(ISH) |
| ZN2381 | 人R-spondin3(Rspo3)检测试剂盒(ELISA方法) |
| ZN2039 | 人脑源性神经生长因子(BDNF)ELISA试剂盒 |
| ZN2396 | 人血清淀粉样蛋白A(SAA)检测试剂盒(ELISA方法) |
| ZN1596 | 人CD68重组蛋白 |
| ZN2382 | 人R-spondin4(Rspo4)检测试剂盒(ELISA方法) |
| ZN0079 | APOER2 mRNA原位杂交试剂盒 |
| ZN2093 | 人CD36(GPIV)ELISA试剂盒 |
| ZN1534 | 寡核苷酸探针稀释液 |
| ZN2234 | 人胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP-7)检测试剂盒(ELISA方法) |
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