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快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)北京现货促销

产品信息
  • 特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

    快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)北京现货促销是高品质的核酸扩增(PCR)产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。

    北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)北京现货促销,产品信息:

    类别:核酸扩增(PCR)

    英*(代"文")名:Fast TaqMan Mixture

    产品名 产品编号 包装规格
    快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针) WE0151 1ml|5ml

    编号:WE0151

    规格:1ml|5ml

    英*(代"文")名:Fast TaqMan Mixture

    品Pai:百奥莱博

    产地:北京

      本品是专用于探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含Fast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+等,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列检测。本品含有的Fast Taq DNA Polymerase,能有效减少在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活仅需在95℃孵育30s。整个PCR反应过程比普通反应可节省约40分钟,大大缩短了PCR的反应时间。独特的PCR缓冲体系与快速热启动酶的组合,有效YZ了非特异产物的产生,并显著提高了PCR的扩增效率,荧光信号更强,灵敏度更高,线性范围更宽。该产品适用范围广,可用于普通和快速定量PCR程序。

     

      ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。

    不需要ROX校正的仪器(WE0151):

    Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。

    需要Low ROX校正的仪器(WE0152):

    ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。

    需要High ROX校正的仪器(WE0153):

    ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。

     

    试剂盒组成

     

    组份 WE0151-5ml WE0152-5ml WE0153-5ml
    2×Fast TaqMan Mixture 5×1ml 5×1ml 5×1ml
    50×Low ROX - 200μl -
    50×High ROX - - 200μl
    ddH2O 5×1ml 5×1ml 5×1ml

     

    注意事项

    1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。

    2、避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。

     

    使用方法

    以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

     

    1、PCR反应体系

     

    试剂 50μl反应体系 终浓度
    2×Fast TaqMan Mixture(With ROX) 25μl
    Forward Primer,10μM 1μl 0.2μM
    Reverse Primer,10μM 1μl 0.2μM
    Probe,10μM 1μl 0.2μM
    Template DNA 2μl  
    50×Low ROX or High ROX(可选) 1μl
    ddH2O up to 50μl  

    注意:

    1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。

    2)所用探针的终浓度,与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。

    3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定的模板使用量。

    4)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。

     

    2、PCR反应程序:

    建议采用两步法PCR反应程序,本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定。

     

     

    步骤 温度 时间 循环数
    预变性 95℃ 30 s  
    变性 95℃ 5 s 35-40 个循环
    退火/延伸 60℃ 30 s

    注意:

    1)本产品所采用的酶须在预变性95℃、30s条件下实现酶的活化。在此条件下,大多数模板可良好的进行解链。对GC含量高、二级结构复杂的模板,可将预变性时间延长至1-4分钟,以使起始模板充分解链。

    2)建议采用两步法PCR反应程序,若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。

     

    储存条件:-20℃,避免反复冻融

    快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)北京现货促销专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司

    关键词:WE0151,Fast TaqMan Mixture,快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)

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    编号 类别 名称
    WE0343 一抗 抗V5标签单克隆抗体
    WE0242 核酸电泳和回收 UltraStain DNA Marker
    WE0240 基因结构和功能 二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24)
    WE0255 克隆与表达 DNATrans转染试剂
    WE0103 核酸扩增(PCR) Bes Taq DNA Polymerase
    WE0131 核酸扩增(PCR) GXcDNA链合成试剂盒
    WE0212 工具酶 蛋白酶K
    WE0381 二抗 Cy3标记山羊抗兔IgG(H+L)
    WE0340 一抗 抗VSV-G标签单克隆抗体
    WE0224 工具酶 RNase A溶液(10mg/ml)
    WE0161 核酸扩增(PCR) 寡聚核苷酸Oligo(dT)15
    WE0191 RNA纯化 TRIzon试剂(总RNA提取)
    WE0153 核酸扩增(PCR) 快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(高含量ROX校正染料)
    WE0304 蛋白质研究 蛋白印迹膜再生液
    WE0181 DNA纯化 酵母基因组DNA提取试剂盒
    WE0279 蛋白质研究 Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
    WE0353 一抗 抗β-Actin单克隆抗体(植物)
    WE0316 蛋白质研究 通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)
    WE0285 蛋白质研究 0.5 M Tris-HCl缓冲液(pH6.8)
    WE0267 蛋白质研究 His标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白)
    WE0246 核酸电泳和回收 2kb DNA Marker
    WE0379 二抗 RRX标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
    WE0319 蛋白质研究 EDTA缓冲液(IHC抗原修复液,50×)
    WE0370 HRP标记抗体 HRP标记驴抗鸡IgY(IgG)(H+L)

     

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    温馨提示:不可用于临床ZL。
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