WE0400型口腔拭子DNA样本保存管(国产,进口)

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖WE0400型口腔拭子DNA样本保存管(国产,进口)在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：WE0400型口腔拭子DNA样本保存管(国产,进口)
编号：WE0400
规格：200μl×20支
英文名：Swab DNA Storage Tube
品Pai：百奥莱博
产地：北京
本产品采用YL专用的聚*脂海绵为原材料，具有吸液性强、柔软洁净、发尘量低等优点。采样拭子头可折断，使用方便。采用的物料对微生物无毒害，能大量地增加样本的采集、释放量，增强样本送检期间的保存效果。能够常温保存口腔拭子DNA长达12个月，其获得的DNA可用来完成各种基因检测及分析实验，如qPCR、NGS、SNP分析。为运输和存储提供方便，并减低其成本。

使用方法：
1．取样前清洁双手，用清水漱口1-2次，去除口腔中的食物残渣，咽尽口腔中剩余的清水。
2．撕开采样棉签外包装。
3．将棉签伸进口腔内，在内侧颊粘膜处反复擦拭20次以上，至棉头已经被唾液充分浸润(应无食物残渣等异物粘附)。
4．打开样本采集管盖，将采样后的棉签放入样本采集管内，沿手柄上的折痕折断手柄。
5．随即盖上样本采集管，完成样品取样。



WE0400型口腔拭子DNA样本保存管(国产,进口)正在火爆，除此之外，为您推荐下别产品：

·FITC标记驴抗山羊IgG(H+L)
编号：WE0364
英文名称：Donkey Anti-Goat IgG, FITC Conjugated
规格：100μl
本产品为FITC标记的经亲和纯化的驴抗体，特异识别山羊IgG，检测灵敏度高，本底低，对其他种属IgG无明显交叉反应，常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。FITC即硫*酸荧光素，为一种常用荧光染料，常用于免疫荧光和流式细胞检测等多标记检测。经本荧光抗体染色的标本，在荧光显微镜下观察呈现明亮的绿色荧光。

免疫原：山羊IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：FITC，Amax=492; Emax=520
应用范围：对于大多数实验(1：50-200)

·抗MBP标签单克隆抗体
编号：WE0338
英文名称：Anti MBP-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格：20μl|100μl
该抗体为高纯度的鼠单克隆抗体，与MBP结构域具有高亲和性，可灵敏特异地检测各种MBP编码载体表达的MBP-Tag融合蛋白。

抗体类型：鼠单克隆抗体IgG1
免疫原：全长MBP蛋白
应用范围：WB(1：500-5000)、ELISA(需摸索稀释度)

·无内毒素质粒中提试剂盒
编号：WE0166
英文名称：NoEndo Plasmid Midi Kit
规格：50次
  内毒素是质粒提取中常见的污染物，由于真核细胞对内毒素非常敏感，因此，如果质粒中含有内毒素会大大降低真核细胞转染效率。本试剂盒提供一种简单、快捷、GX提取无内毒素质粒的新方法，提取的质粒限度去除内毒素，并能有效去除基因组DNA、RNA、蛋白等污染。

  本试剂盒通过碱裂解法裂解细胞，新型硅基质膜GX专一的结合质粒DNA，同时采用特殊的缓冲液系统和除内毒素过滤柱，有效去除内毒素、蛋白等杂质。由本试剂盒所得质粒纯度高、质量稳定，特别适用于细胞转染，同时也可用于DNA测序，PCR，基于PCR的突变，体外转录，转化细菌，内切酶消化等下游实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次
Buffer P1	30ml
Buffer P2	30ml
Buffer E3	30ml
Buffer PS	15ml
Buffer PW(浓缩液)	10ml
Endo-Free Buffer EB	10ml
RNase A(10 mg/ml)	600μl
过滤柱FM及收集管	50套
吸附柱DL及收集管	50套

自备试剂：无水乙醇、异丙醇。

实验前准备及重要注意事项：
1、所有组分可在干燥、室温(15～30℃)环境稳定保存1年，更长时间保存可置于2～8℃，加入RNase A的Buffer P1 置于2～8℃可稳定保存6个月。
2、次使用前，将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中，混匀，置于2–8℃保存，使用前需在室温中放置一段时间，恢复至室温后使用。
3、次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请先检查Buffer P2 和Buffer E3是否出现结晶或沉淀，如有结晶或沉淀现象，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清。
5、注意不要直接接触Buffer P2和Buffer E3，使用后应立即盖紧盖子。
6、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。

操作步骤：
1、取5-15ml过夜培养的菌液，加入离心管(自备)中，13000rpm(~～～16200×g)离心1分钟收集细菌，尽量吸弃全部上清。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入500μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A)，使用移液器或涡旋振荡器充分混匀，悬浮细菌沉淀。
注意：如果菌块未彻底混匀，将会影响裂解效果，使提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入500μl Buffer P2，温和地上下颠倒混匀8-10次，使菌体充分裂解，室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。
注意：温和混匀，不要剧烈震荡，以免打断基因组DNA，造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。如果溶液未变得清亮，提示可能菌量过大，裂解不彻底，应减少菌体量。
4、向离心管中加入500μl Buffer E3，立即上下颠倒混匀8-10次，此时出现白色絮状沉淀，室温放置5分钟。13000rpm离心5分钟，吸取上清，将上清加入过滤柱FM中(已装入收集管)，13000rpm离心1分钟过滤，将收集管中的滤液转移到离心管(自备)中。
注意：
1)Buffer E3 加入后应立即混匀，避免产生局部沉淀。
2)吸附柱的容积为750μl，所以上清液请分两次过滤，并混合于同一自备离心管中。
5、向滤液中加入450μl异丙醇，上下颠倒混匀。
6、柱平衡：向已装入收集管的吸附柱中加入200μl Buffer PS，13000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、将步骤5中滤液与异丙醇的混合溶液转移到平衡好的吸附柱(已装入收集管)中。
8、13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：吸附柱的容积为750μl，所以第5步中所得溶液分多次过柱。
9、向吸附柱中加入750μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇)，13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。
10、将吸附柱重新放回收集管中，13000rpm离心1分钟。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
11、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附膜的中间部位加入100-200μl Endo-Free Buffer EB，室温放置2-5分钟，13000rpm离心2分钟。-20℃保存质粒。
注意：
1)为了增加质粒的回收效率，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，13000rpm离心2分钟。Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴预热，适当延长吸附和洗脱的时间，可以增加提取效率。
2)质粒拷贝数较低或>10 kb时，Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴预热，可以增加提取效率。

储存条件：室温(15～30℃)


WE0400型口腔拭子DNA样本保存管(国产,进口)关键词：口腔拭子DNA样本保存管,Swab DNA Storage Tube,WE0400


·RIPA裂解液(强)
编号：WE0258
英文名称：RIPA Lysis Buffer(Strong)
规格：100ml
  RIPA裂解液是一种传统的组织以及细胞快速裂解液，主要用于从动物组织和哺乳动物细胞中抽取可溶性蛋白，可用于裂解贴壁细胞和悬浮细胞。按照其裂解液的强度可以分为强、中、弱三类，具体特点和差异请参考附表2，可根据实验需求选择相应产品。RIPA裂解液(强)可以有效提取细胞核、细胞膜和胞浆蛋白，提取的蛋白可应用于蛋白定量、Western Blot、IP等检测分析。
  RIPA裂解液(强)的主要成分为50mM Tris(pH 7.4)，150mM NaCl，1%Triton X-100，1% sodiu*(代"m") deoxycholate，0.1% SDS以及sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等。


注意事项：
1、为防止蛋白降解，所有的操作尽量在冰上进行。
2、使用RIPA裂解液得到的蛋白样品，可采用BCA法进行蛋白定量，以测定蛋白浓度。产品可单独向本公司订购，如：WE0276 BCA蛋白定量试剂盒。本品含有高浓度的去垢剂，不能用Bradford法进行蛋白定量。
3、建议在使用RIPA裂解液前，向溶液中加入蛋白酶YZ剂或磷酸酶YZ剂，以防止蛋白降解，或保持蛋白的磷酸化状态。产品可单独向本公司订购，如：WE0259 蛋白酶YZ剂混合物，WE0256 磷酸酶YZ剂混合物。
4、若需获得更高浓度的蛋白，应减少哺乳动物蛋白抽提试剂的使用量。
5、对于培养瓶中的贴壁细胞，推荐先使用常规方法消化细胞，再参考悬浮细胞蛋白提取步骤操作。
6、对于离心获得的细胞，若不确定细胞体积，可根据细胞数量计算RIPA裂解液的使用量。如5×106个Hela细胞约需加入500μl RIPA裂解液，以此类推。

使用方法：

一、细胞样品
贴壁细胞蛋白抽提
1、小心倾去贴壁细胞的培养液。
2、可选步骤：若培养基中含有酚红或其他可能影响实验结果的物质，请先使用预冷的PBS漂洗细胞。
3．加入适量RIPA Lysis Buffer(Strong)(使用前2-3分钟内加入蛋白酶YZ剂)，试剂使用量请参考附表1，在冰上用枪头吹打贴壁细胞。

表1 贴壁细胞RIPA 裂解液使用量推荐表

细胞培养板类型或培养面积	RIPA 裂解液使用量
100 mm	500-1000μl
60 mm	250-500μl
6孔培养板	200-400μl /孔
24孔培养板	100-200μl /孔
96孔培养板	50-100μl /孔

4、将裂解液转移至新的离心管中，冰上孵育20分钟，使细胞充分裂解。
5、14000×g离心10分钟。转移上清液至新管中，进行下一步分析。

悬浮细胞蛋白提取
1、悬浮细胞，2,500×g离心5分钟，弃去上清。
2、可选步骤：若培养基中含有酚红或其他可能影响实验结果的物质，请使用PBS漂洗细胞。漂洗后的细胞悬浮液2,500×g离心5分钟，弃去上清。
3、加入适量RIPA Lysis Buffer(Strong)(使用前2-3分钟内加入蛋白酶YZ剂)，每5×106细胞加入约200-500μl RIPA Lysis Buffer(Strong)，吹打均匀。
4、冰上放置20分钟，使细胞充分裂解。
5、14000×g离心10分钟。转移上清液至新管中，进行下一步分析。

二、组织样品
1、取适当的RIPA Lysis Buffer(Strong)，在使用前2-3分钟内加入蛋白酶YZ剂。
2、称量实验组织的重量，按照1:10(g/ml)的比例加入RIPA Lysis Buffer(Strong)后将组织剪成细小碎片，用电动匀浆器匀浆处理。若需要浓缩的蛋白提取物，可适当减少组织蛋白抽提试剂使用量。
3、冰上孵育20分钟，使细胞充分裂解。
4、14000×g 离心10分钟。转移上清液至新管中，进行下一步分析。
注：RIPA裂解液的裂解产物中可能会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为基因组。

表2 蛋白裂解液性能、参数比较
 

目录号	WE0258	WE0257
名称	RIPA裂解液(强)	RIPA裂解液(中)	RIPA裂解液(弱)	SDS裂解液
裂解强度	强	中	温和	强
有效裂解成分	1%Triton X-100， 1%脱氧胆酸*, 0.1% SDS	1% NP-40， 0.5%脱氧胆酸* , 0.1% SDS	1% NP-40， 0.25%脱氧胆酸*	1%SDS
膜蛋白提取	很好	较好	一般	很好
胞浆蛋白提取	很好	很好	很好	很好
核蛋白提取	很好	较好	较好	很好
主要用途	WB，IP	WB，IP	WB，IP，CO-IP	WB，CHIP

储存条件：2～8℃


WE0400型口腔拭子DNA样本保存管(国产,进口)关键词：口腔拭子DNA样本保存管,Swab DNA Storage Tube,WE0400


·抗GFP标签单克隆抗体
编号：WE0346
英文名称：Anti GFP-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格：100μl
GFP或其突变体EGFP与目的蛋白融合表达常用于检测目的蛋白的表达和分布。该抗体特异识别GFP以及EGFP、YFP、EYFP、CFP 等一些突变体。

抗体类型：鼠单克隆抗体IgG1
免疫原：人工合成多肽
应用范围：WB(1：500-2000)、ELISA(1：200-20000)

·BCA蛋白定量试剂盒
编号：WE0276
英文名称：BCA Protein Assay Kit
规格：500次微孔板(50管次)
  BCA蛋白定量法是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。本产品是基于BCA(Bicin-choninic Acid)法研制而成，实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与Cu2+络合生成络合物，同时将Cu2+还原成Cu+。BCA试剂可敏感特异地与Cu+结合，形成稳定的有颜色的复合物。在562 nm处有高的光吸收值，颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒含有牛血清白蛋白(BSA)溶液作为蛋白质标准品溶液，测定范围为20～2000μg/ml。

试剂盒组成：

组成	规格
BCA-A	2×50ml
BCA-B	3ml
BSA Standard Solution(2mg/ml)	2ml

保存条件：BSA Standard Solution：2～8℃，其它组分：室温

注意事项：
1、本产品可以采用分光光度计(试管检测法)或者酶标仪(微孔检测法)测定蛋白浓度。
2、建议每次测定蛋白样品时，绘制标准曲线，以获得准确数据。
3、BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致(可用1×PBS或0.9%生理盐水稀释)。
4、如待测样品中含较多的干扰物质(具体见附表1)，可采用Bradford法蛋白定量试剂盒(WE0275)或其他蛋白定量产品。

使用方法：
1、稀释BSA标准品：用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。

管号	稀释液用量(μl)	BSA标准品用量(μl)	BSA标准品浓度(μg/μl)
A	0	100	2
B	200	200	1
C	200	200(从B管中取)	0.5
D	200	200(从C管中取)	0.25
E	200	200(从D管中取)	0.125
F	200	200(从E管中取)	0.0625
G	200	0	0(空白)

2、配置BCA工作液：
1)计算BCA工作液总量：
BCA工作液总量=(BSA标准品样本个数+未知样本个数)×复孔数×每个样本BCA工作液体积
举例：BSA标准品样本个数为7个，未知样本个数2个，复孔数3个。
试管检测法：
BCA工作液总量=(7个BSA标准品样本+2个未知样本)×3个复孔×2ml/每个样本工作液体积=54ml
微孔检测法：
BCA工作液总量=(7个BSA标准品样本+2个未知样本)×3个复孔×200μl/每个样本工作液体积=5.4ml
2)根据计算出的BCA工作液需要总量，将BCA-A和BCA-B按照50:1的体积比，配制BCA工作液，充分混匀。
注意：
a. 由于加样可能存在误差，建议配制BCA工作液时，多配制1-2个孔。
b. 新配制的BCA工作液室温密封条件下可稳定保存24小时。

3、定量检测
①试管检测法(蛋白浓度检测范围：20-2000μg/ml)
1)按上表，将稀释好的A-G BSA标准品和待测蛋白样品(原液或稀释液)各100μl分别加到作好标记的试管中。推荐每个测定的样本做2-3个平行反应。
2)向每个试管中各加入2ml BCA工作液，充分混匀，37℃水浴中孵育30分钟 ，将各管冷却至室温，须在3-5分钟内完成检测。
3)用分光光度计在562 nm处，测定每个样品及BSA标准品的吸光值，同时做好记录。
4)绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。
② 微孔检测法(蛋白浓度检测范围：20-2000μg/ml)
1)按上表，将稀释好的A-G BSA标准品和待测蛋白样品(原液或稀释液)各25μl分别加到作好标记的96孔板微孔中。推荐每个测定的样本做2-3个平行反应。
2)每孔加入200μl BCA工作液，充分混匀，盖上96孔板盖，37℃孵育30分钟，冷却至室温，须在3-5分钟内完成检测。
3)用酶标仪在540-590 nm范围内，测定每个样品及BSA标准品的吸光值，同时做好记录。
4)绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。
注意：
a. BCA法测定蛋白浓度时，吸光值会随着时间的延长不断加深。因此所有样品测定需在3-5分钟内完成，否则会影响蛋白定量的准确度。
b. 建议以去除背景值后的吸光值读数绘制标准曲线。
c. 由于操作误差导致标准品读数严重偏离线性曲线的应舍去。
d. 未知样品浓度可以从标准曲线方程中计算得出, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。
e. 如果得到的蛋白浓度不在检测范围内，请重新稀释样品后再次测定。

4、BCA蛋白定量分析结果举例：
微孔板检测法结果

蛋白浓度(μg/μl)	原始吸光值	去除背景值后的吸光值
0	0.086(背景值)	0.000
0.125	0.123	0.037
0.25	0.280	0.194
0.5	0.551	0.465
1	1.068	0.982
2	2.000	1.913

附表1. 干扰物质表
 

化合物	耐受浓度
缓冲液
乙酸盐	0.2M
甘*酸	1M
HEPES	0.1M
MES	50mM
MOPS	50mM
Na+-柠檬酸	＜1mM
PIPES	50mM
磷酸*	0.1M
乙酸*	0.2M pH 5.5
TES	50mM
Tris	0.1M
盐类
硫*(代"酸")铵	干扰
NaCl	1M
尿素	3M
极性化合物
DMSO	5%
甘油	10%
去垢剂和变性剂
Brij35	1%
CHAPS	1%
盐*(代"酸")胍	4M
NP-40	1%
辛葡糖	1%
SDS	1%
Triton X-100	1%
糖类
葡萄糖	10mM
蔗糖	1M
螯合剂
EDTA	10mM
还原剂
β-巯基乙醇	50μM
DTT	1mM
其他
脂类	干扰
HCl/NaOH	0.1M

储存条件：2～8℃

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