血液RNA提取试剂盒(含DNase I) RNA纯化

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")血液RNA提取试剂盒(含DNase I) RNA纯化，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：血液RNA提取试剂盒(含DNase I) RNA纯化
编号：WE0197
规格：50次
英文名：RNAtiqu Blood RNA Extraction Kit(DNase I)
品Pai：百奥莱博
产地：北京
  本试剂盒适用于从新鲜全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)中提取总RNA，可处理多至1.5ml的全血，洗脱得到分子量大于200 bp的高纯度RNA，多个样品可以在1小时内同时完成。本产品无需CsCl纯化的超离心步骤和LiCl或乙醇沉淀，不含有*酚或*仿等有毒溶剂，经过纯化的RNA有效去除血红素、肝素等酶YZ剂和污染物，可直接用于各种分子生物学常规实验，如RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次
DNase I	1000 U
10×Reaction Buffer	1000μl
Buffer RBL(10×)	60ml
Buffer RL	35ml
Buffer RW1	40ml
Buffer RW2(浓缩液)	11ml
RNase-Free Water	10ml
过滤柱FL及收集管	50套
吸附柱RM及收集管	50套
RNase-Free离心管(1.5ml)	50个

保存条件：DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存，其它组分室温(15～30℃)。

自备试剂：β-巯基乙醇、无水乙醇。

实验前准备及重要注意事项：
1、预防RNase污染，应注意以下几方面：
1)使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2)配制溶液应使用无RNase的水。
3)操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
2、样品应避免反复冻融，否则影响提取RNA提取得率和质量。样品在Buffer RL中，可于-70℃保存一个月。
3、Buffer RL在使用前请加入β-巯基乙醇，1ml Buffer RL加10μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RL室温可保存1个月。
4、次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer RL是否出现结晶或者沉淀，可置于于56℃水浴重新溶解。
6、本试剂盒不能用于加入抗凝剂的冷冻血液样本RNA的提取。
7、10×Buffer RBL需在使用前将溶液用无RNase的水进行10倍稀释，稀释后置于2～8℃保存。

操作步骤：
1、向新鲜的抗凝全血样本中，加入5倍血液样本体积的1×Buffer RBL(请于使用前用无RNase水将10×Buffer RBL稀释10倍)，轻轻涡旋或颠倒混匀。冰上孵育10-15分钟，孵育过程中混匀两次。
注意：孵育过程中浑浊的悬液会变成透明，证明红细胞被裂解，必要时可以把孵育时间延长至20分钟。
2、4℃ 2,100 rpm(~400×g)离心10分钟，小心吸弃上清。
3、向以上沉淀中加入2倍血液样本体积的1×Buffer RBL(请于使用前用无RNase水将10×Buffer RBL稀释10倍)，轻轻涡旋，充分重悬沉淀。
4、4℃ 2,100 rpm离心10分钟，小心并彻底吸弃上清。
注意：此步一定要完全去除上清否则影响裂解导致RNA产量下降。
5、向沉淀中加入Buffer RL(使用前检查是否已经加入β-巯基乙醇)，具体加量按照下表进行，涡旋混匀。
注意：如果血液不是健康人的全血，需要根据血液中白细胞的数量来确定所需Buffer RL的加入量。完全混匀后细胞应完全裂解，块状沉淀消失。

Buffer RL(μl)	健康人类全血(ml)	白细胞数量
350	小于0.5	多至2×106
600	0.5-1.5	2×106 至1×107

6、将以上所得液体转移到已装入收集管的过滤柱中，12000rpm(~～13400×g)离心2分钟，收集滤液，弃掉过滤柱。
7、向滤液中加入1倍体积(600μl或350μl)的70%乙醇(无RNase水配制)，混匀。
注意：加入乙醇后可能会产生沉淀，不会影响后续实验。
8、将上步所得溶液全部加入到吸附柱中(已装入收集管)，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心15秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1，12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
10、配制DNase I 混合液：取52μl RNase-Free Water，向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl)，混匀， 配制成终体积为80μl的反应液。
11、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液，20-30℃孵育15分钟。
12、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1，12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
13、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心15秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
14、重复步骤13。
15、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
16、将吸附柱置于一个新的RNase-Free的1.5ml离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water，室温放置1分钟，12000rpm离心1分钟，收集RNA溶液，-70℃保存RNA，防止降解。
注意：
1)RNase-Free Wate体积不应小于30μl，体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量，可用30-50μl新的RNase-Free Water再次洗脱，室温放置1分钟，12000rpm离心1分钟。
3)如果要提高RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置1分钟，12000rpm离心1分钟。

储存条件：室温(15～30℃)。

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·HRP标记抗His标签单克隆抗体
编号：WE0335
英文名称：HRP Conjugated Anti His-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格：100μl
该抗体可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端和内部的六个连续组*酸标签，而不受邻近*基酸组成的影响，可用于检测各种表达载体表达的His-Tag融合蛋白。产品经HRP直接标记，无需使用二抗，可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白，减化了实验步骤，避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。

抗体类型：鼠IgG
免疫原：人工合成多肽
标记物：HRP
应用范围：WB(1：500-3000)、ELISA(1：1000-20000)

·抗GST标签琼脂糖介质
编号：WE0331
英文名称：Anti-GST Mouse Monoclonal Antibody Agarose Resin
规格：100μl|500μl
抗GST标签免疫亲和介质是将抗GST标签的单克隆抗体共价偶联到琼脂糖上，这种琼脂糖能进行免疫沉淀或者免疫共沉淀，能检测含有GST标签的蛋白。

抗体类型：鼠单克隆抗体IgG1
免疫原：人工合成多肽序列
应用范围：IP

·DyLight594标记山羊抗人IgG(H+L)
编号：WE0358
英文名称：Goat Anti-Human IgG, DyLight 594 Conjugated
规格：100μl
本产品为DyLight 594标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体，特异识别人IgG，吸收光谱为591nm，发射光谱为616nm。使用本产品检测灵敏度高，本底低，对其他种属IgG无明显交叉反应，常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。DyLight 594是近年来新开发的一种荧光素，较普通的荧光素具有较高的荧光强度和耐光性，在pH4-9的范围内均具有较高的荧光信号，被激发后产生明亮的橙红色荧光。

免疫原：人IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：Amax=591; Emax=616
应用范围：对于大多数实验(1：100-800)


血液RNA提取试剂盒(含DNase I) RNA纯化关键词：血液RNA提取试剂盒(含DNase I),RNAtiqu Blood RNA Extraction Kit(DNase I),WE0197


·多彩预染蛋白Marker
编号：WE0282
英文名称：Multicolor Protein Marker
规格：20次(100μl)|100次(5×100μl)
  本品由10.5-175 kD范围的11条蛋白组成(10.5 kD、14 kD、22 kD、29 kD、42 kD、51 kD、62 kD、70 kD、95 kD、130 kD、175 kD)。由低到高的分子量范围可监测电泳过程中的蛋白分离情况、判断目标蛋白的分子量，并且可以监测Western Blot实验中的转膜效率。10.5 kD、42 kD、95 kD的三条带结合有蓝色染料更便于实时观察电泳进程、判断蛋白分子量。本产品推荐上样量为5μl。

注意事项：
1、本品已包含上样缓冲液，直接使用，不可在100℃加热或煮沸。
2、为避免反复冻融及污染，可将本产品分装后，-20℃保存。

操作步骤：
1、加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀，以确保溶液混合均匀。
2、根据加样孔的大小，每泳道加5μl进行聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳。

实验图例

15%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳后结果

储存条件：-20℃保存，避免反复冻融。

·FITC标记驴抗大鼠IgG(H+L)
编号：WE0368
英文名称：Donkey Anti-Rat IgG, FITC Conjugated
规格：100μl
本产品为FITC(硫*酸荧光素)标记的经亲和纯化的山羊抗体，特异识别小鼠IgG重链和轻链。本产品检测灵敏度高，本底低，对其他种属IgG无明显交叉反应。荧光素标记抗体广泛应用于免疫学、细胞化学、流式细胞分析等研究，在临床检验上也用于细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。

免疫原：大鼠IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：FITC，Amax=492; Emax=520
应用范围：对于大多数实验(1：50-200)


血液RNA提取试剂盒(含DNase I) RNA纯化关键词：血液RNA提取试剂盒(含DNase I),RNAtiqu Blood RNA Extraction Kit(DNase I),WE0197

YT117 FITC抗小鼠免疫荧光染色试剂盒 Immunol Fluorence Staining Kit with FITC-Labeled Goat Anti-Mouse IgG
SY0035 热启动PCR Master Mix(不含染料) HotStart PCR Master Mix (No Dye)
HR0253 血小板线粒体提取试剂盒 Platelet mitochondria Extraction Kit
BTN100831 5-*-4-*-3-吲哚磷酸(BCIP) 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate
SV0210 BspEI限制性内切酶 BspEI Restriction Endonuclease
SY0394 His标签蛋白纯化预装柱 Ni-NTA 6FF Chromatography Column, 5ML
KFS158 线粒体红色荧光探针 MitoRed
RFT043 彩色预染超低分子量蛋白Marker(1.2～45kD) Rainbow pre dyeing ultra low molecular weight protein
SV1082 核酸外切酶 V (RecBCD) Exonuclease V (RecBCD)
BTN3660 非冻型组织DNA保存液 DNAhold Tissue RNA non-freezing preservation
WE0212 蛋白酶K Proteinase  K
SV0627 PvuI-HF限制性内切酶 PvuI-HF Restriction Endonuclease
ALH044 DNA消化试剂盒(DNase I) DNA digestion kit
BTN120514 即用型蓝白T载体D型(无RNA启动子，有MCS) Instant Blue-White Vector T，Type D
YT224 HIF-1α凝胶迁移探针(10μM) HIF-1α Probe For EMSA(10μM)
SY0139 RORE-Luc荧光素酶报告基因质粒 RORE Luciferase Reporter Plasmid
HR0443 细胞凋亡形态学检测试剂盒 Cell apoptosis morphology detection kit
BTN130430 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ E.coli DNA Polymerase I

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