绿色核酸染料(RNA染料)(DNA染料)说明书

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括绿色核酸染料(RNA染料)(DNA染料)说明书在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：绿色核酸染料(RNA染料)(DNA染料)说明书
编号：YT016
规格：1ml|5ml
英文名：Nucleic Acid Green(2000X)
品Pai：百奥莱博
产地：北京
本核酸绿色染料是*化乙锭(EB)的升级替代产品，用于凝胶中DNA、RNA等核酸的染色。本品核酸绿染料具有安全(未检测到致突变性和细胞毒性)、灵敏度高、稳定性好等优点，凝胶中的核酸在使用本产品后经约500nm波长蓝光(也可以使用约260nm紫外光)激发呈现绿色荧光，适用于原先使用SYBR Green或SYBR Gold为核酸染料的凝胶成像和检测系统。

由于本品核酸绿染料在500nm左右处有的激发波长，可以使用对人体无害的蓝光灯或蓝光成像仪进行核酸检测，从而避免常规的紫外检测对核酸样品的致突变性，以及紫外对人的眼睛和皮肤的伤害。特别在切胶回收时，使用本品核酸绿染料并用蓝光灯具有很大的优势，不仅可以避免核酸样品的突变，也可以避免紫外光对人体的伤害。

本品核酸绿染料比EB或SYBR Green更安全。本品核酸绿染料在远高于其工作浓度范围时均没有细胞毒性及诱变性。艾姆斯氏试验(Ames test)结果表明，即使在S9代谢活化时，也没有检测到致突变性。本品核酸绿染料和百奥莱博另外一种安全型核酸染料核酸红色染料(YT015)，由于它们特殊的化学结构使其难以进入细胞，从而大大降低甚至避免了染料的致突变性和细胞毒性。艾姆斯氏试验结果表明，本品核酸绿染料比核酸红色染料(YT015)更安全，即便在S9代谢活化时，当本品核酸绿染料浓度高达约20微克/毫升时，也没有检测到致突变性。而SYBR Green染料可以穿透细胞膜，进入活细胞并染色DNA。并且有报道SYBR Green可以强烈增强紫外线诱导的基因突变。

本品核酸绿染料检测灵敏度高，对于小分子量核酸的染色效果好。本品核酸绿染料的检测灵敏度比EB高8-10倍，在检测低浓度、微量DNA或RNA方面比EB更佳，尤其对小分子量的DNA检测非常灵敏。在使用浸泡染色法时，本品核酸绿染料和SYBR Gold的灵敏度相近甚至更高；与SYBR Gold不同的是，本品核酸绿染料预先配制在凝胶中也有很高的灵敏度。EB对于小分子量核酸染色效果差，而本品核酸绿染料对于小分子量核酸的染色效果很好，便于观察酶切或PCR获得的小分子量核酸片段。本说明书推荐使用的本品核酸绿染料浓度，其检测效果略优于EB。如果希望获得更高的染色灵敏度，可以适当提高本品核酸绿染料的工作浓度。

本品核酸绿染料的稳定性好，染色重复性高。含SYBR Green的凝胶核酸染色的重复性比较差，这通常是由于SYBR系列染料的稳定性差导致的。而本品核酸绿染料的稳定性很好，可以室温长时间保存及使用微波炉加热。本品核酸绿染料的光稳定性良好，可以在室内正常光线下操作而无需避光。由于其热稳定性和光稳定性，含本品核酸绿染料的凝胶在核酸染色时的重复性非常好。

本品核酸绿染料可以使用和SYBR Green或EB相同的检测体系。本品核酸绿染料具有和SYBR Green或SYBR Gold几乎相同的光学性质，两者的激发光和发射光都非常接近，这样可以直接用本品核酸绿染料替换SYBR Green，以使用SYBR Green的凝胶观察、拍照或成像系统(约500nm激发)。对于原来用于EB染料观察的系统，可以考虑选用百奥莱博的核酸红色染料(YT015)染料来替代EB，但也可以使用没有致突变性的本品核酸绿染料来替代EB。使用本品核酸绿染料来替代EB，并且用EB的紫外检测体系时，检测灵敏度会比使用核酸红色染料(YT015)低约4-5倍。对于既可以观察EB也可以观察SYBR Green的具有紫外和蓝光两种激发光的凝胶成像系统，则推荐直接用本品核酸绿染料来替换EB。本品核酸绿染料的激发光谱和发射光谱请参考下图。


本品核酸红染料的激发光谱和发射光谱

本品核酸绿染料的使用方法和EB一致。本品核酸绿染料可以按适当比例直接加入琼脂糖中配制成凝胶，也可以在电泳完毕后对凝胶进行染色。前者更加方便，而后者灵敏度要更加高一些。但由于本品核酸绿染料本身已经非常灵敏，通常采用把本品核酸绿染料直接配制在凝胶中就可以了。对于一些特殊的情况，如核酸样品量特别少的情况等，则可以考虑电泳后再对凝胶进行染色。本品核酸绿染料对于核酸的迁移率影响非常小，小于SYBR Green对于核酸迁移率的影响。

通过凝胶回收试剂盒(YT010)或酚*仿抽提，可以有效去除与DNA或RNA结合的本品核酸绿染料，从而确保不会影响后续的连接、酶切、PCR、测序等常规的分子生物学用途。

储存条件：室温，避光，有效期一年。

注意事项:
1. 使用蓝光灯来检测本品核酸绿染料染色的核酸胶时，需要注意避免使用一些实为紫外灯的假冒伪劣的蓝光灯，以减少紫外线对于核酸样品和人体的伤害。比较简单的判断方法是，对于EB或核酸红色染料(YT015)染色的核酸胶，蓝光灯照射后是不会出现荧光条带的，而仅对于本品核酸绿染料染色的核酸胶，蓝光灯照射后才会出现荧光条带。如果对于EB或核酸红色染料(YT015)染色的核酸胶照射后也能观察到荧光条带，则说明使用的蓝光灯实际为紫外灯。
2. 本品核酸绿染料和EB一样作为荧光染料均需避光保存，但在使用过程中的常规室内光照不会影响其使用效果。
3. 制备好的本品核酸绿染料琼脂糖凝胶，在4oC避光条件下通常可以保存3-5天。
4. 本品核酸绿染料琼脂糖凝胶再次熔化使用时，为取得更好的观察效果，需要添加适量本品核酸绿染料。
5. 电泳之后的凝胶不建议重复使用。
6. 电泳后再使用本品核酸绿染料染色的凝胶一般不需要脱色，如果发现背景太高，可以使用不含核酸酶的水进行脱色处理。
7. 本品核酸绿染料和核酸红色染料(YT015)除了可以染色双链DNA外，也可染色单链DNA和RNA。核酸红色染料(YT015)对单链核酸的染色灵敏度约为对双链DNA染色灵敏度的一半。核酸红色染料(YT015)对单链核酸的染色灵敏度约为本品核酸绿染料的5倍。
8. 如果使用聚丙*(代"烯")酰胺凝胶，请使用浸泡染色法染胶，并延长染色时间至30分钟-1小时。
9. 如果观察到条带弥散或者分离不理想，建议使用浸泡染色法染色以确认是否与染料有关。如果浸泡染色法染色后仍然出现类似的问题，说明与染料无关，请尝试以下方法：使用新鲜配制的电泳缓冲液、降低核酸的上样量、降低染料的浓度、降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、降低电泳电压一倍以上并延长凝胶电泳时间以改善电泳效果、使用更薄的梳齿等。
10. 本产品兼容常用的电泳缓冲液，例如TAE和TBE。
11. 本品核酸绿染料适用于约500nm或260nm激发的成像系统，如果使用普通的适用于核酸红色染料(YT015)或EB的紫外灯或成像系统(约300nm激发)，也能较好地观察到荧光，但强度会略弱一些。

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