WE0105型BAmp DNA Polymerase厂家

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WE0105型BAmp DNA Polymerase厂家的品Pai：百奥莱博，是优质的核酸扩增(PCR)产品，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多BAmp DNA Polymerase等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：WE0105型BAmp DNA Polymerase厂家
编号：WE0105
规格：500U
英文名：BAmp DNA Polymerase
品Pai：百奥莱博
产地：北京
  BAmp DNA Polymerase在具有5"-3"DNA聚合酶活性的同时具有3"-5"外切酶活性，是一种兼具高扩增效率和高保真性的耐热聚合酶。其主要特点是可以GX扩增长片段DNA，尤其在扩增>10 kb的DNA片段方面，其优势更加明显，所扩增的片段Z长可以达到40 kb。该酶具有高度的延伸和校对能力，保真度高于普通Taq酶。优化的缓冲体系使酶的应用更加广泛，即使以复杂的基因组DNA为模板，也可以保证很高的特异性和长片段的扩增。特有的PCR增强剂(C-Solution)使GC含量高，有二级结构和重复序列的复杂模板也能得到GX扩增。使用本制品扩增得到的PCR产物的3"端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。适用于高保真度的长片段PCR扩增和复杂模板的PCR扩增，如构建基因图谱、序列测定及分子遗传学研究等。

产品组成：

 

组份	500U
BAmp DNA Polymerase, 5 U/μl	100μl
10×PCR Buffer	1.8ml
5×C-Solution(PCR Enhancer)	1.8ml

注意：本产品的10×PCR Buffer中含有15 mM*离子。

活性定义：
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制：
1、经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；
2、经检测无外源核酸酶活性；
3、PCR方法检测无宿主残余DNA；
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；
5、室温存放一个月，无明显活性改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
10×PCR Buffer	5μl	1×
dNTP Mix，10 mM each	1μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
BAmp DNA Polymerase, 5 U/μl	0.5μl	2.5 U/50μl
5×C-Solution	10μl	1×
ddH2O up to	50μl

注意：
1)引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2)当利用常规条件仍然未能得到扩增时，可以加入5×C-Solution(PCR Enhancer)，PCR增强剂可以使富含GC，有二级结构和重复序列的复杂模板到GX扩增，可以提高反应的特异性。但PCR增强剂也有可能使常规条件成功扩增的反应扩增失败，因此次使用PCR增强剂时建议设置一个不加PCR增强剂的对照。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	25-35 个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	30 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，BAmp DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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·生物素化兔抗山羊IgG(H+L)
编号：WE0389
英文名称：Rabbit Anti-Goat IgG, Biotin Conjugated
规格：100μl
本产品为生物素标记的经亲和纯化的兔抗体，特异识别山羊IgG，检测灵敏度高，本底低，可用于Western Blot、ELISA、免疫组化、免疫荧光和流式细胞分析检测。
生物素(Biotin)与链霉亲和素(Streptavidin，SA)具有极高的亲和力，反应呈高度专一性。每个链霉亲和素分子具有4个生物素分子结合位点，因此，链霉亲和素可同时以多价形式结合生物素。生物素化的抗体与辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的链霉亲和素联合使用，将检测信号级联放大，通过显色反应或化学发光可检测到微量蛋白。

免疫原：山羊IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：无
防腐剂：0.05%叠氮*
应用范围：
WB(1：1000-20000)
ELISA(1：2000-50000)
Immunohisto/Cytochemistry(1：100-500)
Fluorescence Immunohisto/cytochemistry(1：100-500)
Flow cytometry(1：100-500)


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