特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应微球菌核酸酶 工具酶,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:微球菌核酸酶 工具酶
编号:BTN120412
规格:5000U
英文名:Micrococcal Nuclease
品Pai:百奥莱博
产地:北京
微球菌核酸酶是一种内切核酸酶,作用于单链及双链核酸,生成3´磷酸末端。对单链核酸的作用较好,能较好地分解DNA或RNA的富含AT或AU区域。本酶不需要Mg2+,其催化作用需要Ca2+的存在。
产品用途:
➤细胞粗抽提液中核酸的水解。
➤ 为制备核小体时消化分解染色质。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
储存Buffer:Tris-HCl(pH8.0)50mM,NaCl 50mM,DTT 1mM,Glycerol 50%。
反应Buffer(10×):Tris-HCl(pH8.0)200mM,NaCl 50mM,CaCl₂ 25mM。
活性定义:以热变性小牛胸腺DNA作底物,在37℃、pH8.0的条件下,30分钟生成1 OD260的酸可溶性物质所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。
纯度:
1.50U的本酶和1μg的λDNA在Mg 存在下,37℃反应10分钟,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.SDS-PAGE:>95%。
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更多有关微球菌核酸酶 工具酶的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·SuperTOPO-Amp平末端克隆试剂盒
编号:BTN160684-2
英文名称:SuperTOPO Blunt Cloning Kit
规格:25次
本试剂盒是基于Topoisomerase能够在几秒钟之内高速连接DNA片段的原理开发的无背景克隆试剂盒,它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶,连接效率比野生型更高。
产品特点:
1.GX快速,连接反应几乎在几秒钟内完成,连接率几乎达到。
2.适用于pfu、KOD等高保真聚合酶扩增的平末端片段的克隆。
3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。
4. 零背景,无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选,故不需要IPTG-X-Gal培养基。
5. 本试剂盒按10μL标准反应体系,有25次和50次两种规格包装供选择。
6. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择(BTN160684-2是含Amp抗性TOPO载体,BTN160684-25K是含Kan抗性TOPO载体)。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
SuperTOPO-Amp Blunt载体 | 25μl(BTN160684-2) |
SuperTOPO-Kan Blunt载体 | 25μl(BTN160684-25K) |
连接缓冲液 | 25μl |
M13F引物 | 50μl |
M13R引物 | 50μl |
超纯水 | 1ml |
说明书 | 1份 |
注意:BTN160684-2提供SuperTOPO-Amp Blunt载体,BTN160684-25K提供SuperTOPO-Kan Blunt载体。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:1. 如果是PCR 制备插入片段,所用引物不能磷酸化,使用pfu、KOD等产生平末端片段的高保真DNA聚合酶。为保证扩增产物的完整性,PCR循环结束后,再延伸5-10分钟,确保片段延伸完全。
2.电泳检测并相对定量PCR片段(跟DNA marker 比较)。根据插入片段长度和下表确定每次连接反应需要的用量:
插入片段长度 | 用量 |
100-1000bp | 20-50 ng |
1000-2000bp | 50-100 ng |
2000-5000bp | 100-200 ng |
3.在一个干净的塑料离心管中,室温下(不要放在冰上)设置如下连接反应体系:
成分 | 用量 |
纯化后的PCR产物 | 不超过8μl(详见注意事项) |
SuperTOPO-Amp Blunt载体或 SuperTOPO-Kan Blunt载体 | 1μl |
连接缓冲液 | 1μl |
超纯水 | 补到10μL |
注意:如果使用未经纯化的PCR产物,则需要加入量不能超过1μL,否则PCR 体系会干扰连接体系。
4. 轻柔吹打混匀后,短暂离心,常温(20-30℃)放置0-5分钟。如果在冬天室温低于20℃,建议使用25℃水浴或金属浴。注意:连接时间超过5分钟的话连接效率会降低。
5. 如果当天不转化,可以将离心管放-20℃保存。如果转化,则取5μL连接液加到50-100μL 刚刚融化的感受态细胞中,轻柔混匀。注意:本产品要求感受态细胞的转化效率不得低于5×10E7cfu/ug。
6. 如果片段长度小于2Kb,则不需要冰浴和热激,直接在离心管中加入500μL 不含KJ素的SOC或LB培养基,然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后,弃掉大部分上清,只留约100μl左右,然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上,37℃过夜培养。
7. 如果片段长度长于2Kb,则按常规转化方式,先冰浴2-30分钟,然后42℃热激30秒,冰上防放置2分钟,再在离心管中加入500μl 不含KJ素的SOC或LB培养基,37℃ 250rpm培养60分钟,然后取200μL 涂盘。也可以先3000g离心2分钟后,弃掉大部分上清,只留约100μL左右,然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-AmpBlunt载体)或Kan(对SuperTOPO-Kan Blunt载体)的培养皿上,37℃过夜培养。
8. 用M13F/M13R通用引物进行菌落PCR或直接测序来鉴定重组子。
微球菌核酸酶 工具酶关键词:微球菌核酸酶,Micrococcal Nuclease,BTN120412
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BTN80923 大提柱式动物DNA提取试剂盒 Animal DNA Column large-scale extraction kit
WE0223 RNA酶YZ剂 Rnasin
SV0666 SalI-HF RE-Mix限制性内切酶 SalI-HF RE-Mix Restriction Endonuclease
SY0559 7-*基放线菌*(代"素")D 7-AAD
BTN81109B 酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型) Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit
YT235 生物素标记OCT-1凝胶迁移探针(0.2μM) Biotin-labeled OCT-1 Probe For EMSA
SV1440 PURExpress 体外蛋白合成试剂盒
HR0457 Rhodamine 123染色试剂盒 Rhodamine 123 Staining Kit
BTN130614 Therminator DNA聚合酶 Therminator DNA Polymerase
YT888 YT?免疫荧光染色二抗稀释液 YT? Secondary Antibody Dilution Buffer for Immunofluorescence
HR0077 白细胞蛋白提取试剂盒 White cell protein extraction kit
KFS272 Ac-LEED-FMK(caspase 13 YZ剂) Caspase 13 Inhibitors Z-AEVD-FMK
RFT193 即用型PMSF溶液(100mM) Phenylmethanesulfonyl fluoride
SY0298 BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) BCA Protein Quantification Kit
KFS071 2%封闭试剂
WE0327 Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
微球菌核酸酶 工具酶关键词:微球菌核酸酶,Micrococcal Nuclease,BTN120412
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·尿嘧啶糖基化酶YZ剂(UGI)
编号:BTN130647
英文名称:Uracil Glycosylase Inhibitor
规格:200U
尿嘧啶-DNA糖基化酶YZ剂(UGI)分子量为9.5kDa,可以YZ大肠杆菌和其他物种的尿嘧啶-DNA糖基化酶。UGI和UDG以1:1的比例可逆结合。UGI可以分离UDG-DNA复合物。
产品组成: 成份 | 规格 |
UDI(2000U/mL) | 100μL |
10×Buffer | 1mL |
使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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温馨提示:不可用于临床ZL。