北京脱脂奶粉大量库存促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应北京脱脂奶粉大量库存促销，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京脱脂奶粉大量库存促销
编号：BTN130907
规格：50g
英文名：Non-fat Milk
品Pai：百奥莱博
产地：北京
本产品为分子生物学级脱脂奶粉，可广泛用于Southern、Northern和Western印迹杂交实验的封闭试验。

储存条件：常温运输和保存、有效期半年。

欲了解更多北京脱脂奶粉大量库存促销的品Pai、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:

·一步式复杂样品DNA提取试剂盒
编号：BTN61202
英文名称：One-step DNA extraction kit
规格：10mL
本试剂盒是专用于从各种常见的样品中快速提取用于PCR扩增的DNA。

试剂盒特点：
1.操作简单，只用一步(约5-10分钟)即可以得到用于PCR扩增的DNA 模板，不需要任何离心、抽提等操作步骤，比常用的Chelex100提取方法和*酚/*仿方法快。
2.兼容性广，可以用于几乎所有的分子生物学样品，包括细菌、昆虫、真菌、各种植物、各种动物、法医样品(包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛发、组织样品、口腔细胞和FTA卡)、石蜡组织切片等。
3.环保健康，不使用任何有毒有害的试剂。
4.尤其适用于大规模育种筛选和临床筛选。

试剂盒组成：

 

成分	规格
一步式广谱DNA提取试剂	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将约2μl液体样品(如全血、细胞培养液)或2mg的固体样品(如动物组织，约半粒芝麻大小)加入到50μl 本产品中。
注意：样品加入量可能需要根据其DNA的含量稍做调节，如果样品DNA含量少，则用量要增加，但总液体样品用量Z好不要超过本产品用量的1/10；固体样品用量Z好不要超过1mg/10μl的比例。下面是部分常见生物样品的DNA含量：

材料	DNA含量
精液	150-300μg/mL
血液	20-40μg/mL
精斑	20-30μg/cm2
唾液	1-10μg/mL
血斑	250-500 ng/cm2
口腔拭子	100-1500 ng/拭子
组织	50-500 ng/mg
阴道拭子	10-3000 ng/拭子
骨头	3-10 ng/mg
拔出的带发根头发	1-750 ng/发根
尿液	1-20 ng/mL
自然脱落的带发根头发	1-10 ng/发根

2. 80℃加热5分钟后。
注意：此步的条件可以根据样品的质地稍做调节。如果是液体样品，室温处理1-3分钟即可。如果是难以破裂的细胞和材料(如酵母、石蜡组织切片、血斑)，则保温时间可以延长到10-30分钟。
3. 简短振荡混匀后取裂解物直接进行PCR(裂解物体积Z好不要超过PCR 体积的1/10)。
4.其余同常规操作。

疑难解答：
Q： 本产品与美国BioVenture的GeneReleaser 有何区别？
A： 本产品处理简单，只需要80℃加热5分钟即可；而GeneReleaser 加热处理复杂而繁琐，共需要9 步处理，累计时间需要10 余分钟量(具体是65℃ 30s，8℃ 30s，65℃ 90s，97℃ 180s，8℃ 60s，65℃ 180s，97℃ 60s，65℃ 60s，80℃放置)，手工操作时十分难以控制。
Q： 用本产品提取的DNA 能否用电泳方法检测？
A： 由于DNA含量太少，不能用电泳方法检测。



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YT001 质粒小量抽提试剂盒 Plasmid Mini Preparation Kit
SV0940 Bst 2.0 DNA 聚合酶
HR0019 膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒 Membrane protein and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
BTN131046 n-十二烷基β-D-麦芽糖苷 n-Dodecyl-β-D-Maltoside
YT355 MEK1/2YZ剂(U0126) MAPKK Inhibitor
SY0269 总RNA提取试剂(同Trizol) Total RNA Extraction Reagent
KFS043 kFluor647标记抗兔免疫荧光染色试剂盒 Immunol Fluorescence Staining Kit with kFluor647-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG
BTN131096 生物素化的碱性磷酸酶 Biotin-AP
SY0066 RAR萤火虫荧光素酶报告基因质粒 RAR luciferase reporter plasmid
SY0748 Alexa Fluor 594标记链霉亲和素 Alexa Fluor 594 Streptavidin
KFS388 超氧化物歧化酶(SOD)测试盒(总SOD，WST-1法)
SV0287 Cac8I限制性内切酶 Cac8I Restriction Endonuclease
SY0428 T7 Tag多肽 T7 Tag Peptide
BTN120676 Southern封堵液(NC专用) Southern Blocking Buffer (NC)
YT107 Cy3抗兔免疫荧光染色试剂盒 Immunol Fluorence Staining Kit with Cy3-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG
SV1145 HpaII 甲基转移酶 HpaII methyl transferase
HR0227 酵母蛋白快速提取试剂盒(离心柱法，2D电泳用) Yeast protein quick extraction kit (centrifugal column method, 2D electrophoresis)
BTN100829 中pH缓冲液套装 Medium pH Buffer Set
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·2×YT培养基(干粉型)
编号：BTN100821
英文名称：2×YT Medium Powder
规格：250g
2×YT的全称是2×Yeast Extract and Typeptone，就是表示其成分是LB broth的2×，主要用于繁殖M13噬菌体。本产品加水灭菌后即得液体培养基，即可使用。配制一升液体培养基需要50g本产品。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

·His标记蛋白质微量纯化套装(含核酸酶和溶菌酶)
编号：BTN100102B
英文名称：One-Stop His-Tagged Protein Miniprep Pack(B)
规格：2mL
本产品基于His-Ni亲和层析的蛋白质纯化方法是目前分离纯化重组表达蛋白质的重要方法，本产品就是专门用于上述实验的一站式产品。

产品特点：
1.一站式套装，含所需的介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达His蛋白的细菌(酵母、杆状病毒、培养细胞)即可，非常方便。
2. 专一性强，一次过柱即可获得纯度高达95%的His-标记蛋白。
3.变性和非变性条件均可使用，也适用于纯化包涵体中的His标记蛋白。
4. 每次可以处理20mL的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5. 提供4mL浓度为50%的Ni-Agarose介质，其载量为20-30mg His标记蛋白质/mL介质。
6. 介质为CL-6B琼脂糖，含四个Ni离子螯合基团，比只有四个Ni离子螯合基团的Ni-IDA更有效。
7. 本介质可以反复使用多次。
试剂盒组成：

成份	规格
Ni-Agarose介质，50%	4mL
1M咪唑溶液	25mL
1M Tris-HCl pH7.9	25mL
5M NaCl溶液	25mL
溶菌酶(20 KU/mg)	30mg(A型无)
Benzonase(2U/μL)	20μL(A型无)
盐*(代"酸")胍	6g
尿素	20g
PMSF(10mg/mL)	0.5mL
亲和层析柱，6mL	1套
使用手册	1份

储存条件：常温运输和保存，但介质需4℃保存，溶菌酶、Benzonase和PMSF需-20℃保存，有效期一年。

自备试剂：去离子水、20%乙醇、0.45μm滤膜

使用方法：
1．将Ni-Agarose介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中(介质用量需要根据His蛋白产量决定，其载量为20-30mg His标记蛋白质/mL介质，请根据实验需要取适量的Ni-Agarose介质加入层析柱)。
2．用5倍柱体积(指填料的体积，下同)自备去离子水洗柱，共三次。
3．用5倍柱体积的新配结合液洗柱(配方如下，以10mL为例)，共三次：

成分	用量	在结合缓冲液中浓度
1M Tri-HCl(pH7.9)	0.2mL	20mM
1M咪唑溶液	0.1mL	10mM
5M NaCl溶液	1mL	500mM
自备去离子水	8.7mL	-

4．室温5000g离心10分钟收集20mL表达菌液，弃上清，沉淀(约100mg)放冰上待用或放-80℃保存。Z好用不加诱导物的菌液做对照样。
5．如果用本产品A型：加入1mL冰浴的结合液(1mL菌液需要用50μL结合液)，再加入25μL PMSF(10mg/mL)溶液，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。如果用本产品B型：加入1mL冰浴的含溶菌酶的结合液(先取20mL结合液，加入所有30mg溶菌酶干粉，溶解后分装成1mL/管，剩余的-20℃放置)，再加入25μL PMSF(10mg/mL)溶液和1μL Benzonase，冰上放置30分钟。
6．4℃下13000-15000g离心10分钟，去除残留细胞和细胞碎片以防堵柱，收集上清，留样做SDS-PAGE电泳对照。如果要纯化裂解液中可溶部分的His标记蛋白，则直接进入第7步；如果要纯化裂解液中包涵体(沉淀部分)中的His标记蛋白，则直接进入第12步。

A、纯化细胞裂解液中可溶部分的His标记蛋白
7．将上步得到的上清液上柱，让重力使裂解液自然流出。如要提高His标记蛋白与介质的结合效率，可用试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合30分钟或过夜。
8．用10倍柱体积结合液洗柱(配方见上表)，收集并保存穿透液(含杂质或没被吸附的His标记蛋白，可做SDS-PAGE电泳的对照)。
9．如果用一步式洗脱法(适合已经找到咪唑浓度的情况)，则直接用适量的新鲜配制的洗脱液洗柱，收集并保存穿透液(含His标记蛋白)。洗脱液的配方如下(以1mL体积和咪唑浓度是500mM为例)：

成分	用量	在洗脱液中的浓度
1M Tri-HCl(pH7.9)	20μL	20mM
1M咪唑溶液	500μL	500mM
5M NaCl溶液	100μL	500mM
自备去离子水	380μL	-

10．如果用多步式洗脱(适合不知道咪唑浓度或一步式洗脱杂质多的情况)，则按上表配制一系列咪唑浓度不同(如40、60、100、200、300和500mM)，其他成分浓度不变的洗液，按从低到高的顺序洗涤并收集样品，SDS-PAGE电泳检测His标记蛋白所在的区域。
11．洗脱后，依次使用10倍柱体积的去离子水洗涤柱子，再用3倍柱体积的20%乙醇平衡(乙醇要将填料浸没)，堵住层析柱下端的漏口，4℃保存待下次使用。

B、纯化包涵体中His标记蛋白
12．将第6步离心得到的包涵体沉淀重悬于1-3mL含盐*(代"酸")胍结合液中或1-3mL含尿素结合液中(建议优先使用尿素做变性剂，因为得到的洗脱液可以直接跑SDS-PAGE，而用盐*(代"酸")胍的洗脱液需先除盐后才能电泳)。冰浴1小时以使包涵体溶解，期间可轻柔摇晃几次。含变性剂的结合液配方如下(以10mL为例)：

成分	含盐*(代"酸")胍结合液	含尿素结合液
1M Tri-HCl(pH7.9)	200μL	200μL
5M NaCl溶液	1mL	1mL
盐*(代"酸")胍(MW=95.6)	5.7g	无
尿素(MW=60.1)	无	4.8g
自备去离子水	加水到10mL	加水到10mL

13．室温10000×g离心20分钟，沉淀为未溶解的包涵体。将上清(含溶解后的His标记蛋白)以自备的0.45μm滤膜过滤。
14．将滤过液上柱，后续纯化步骤同第7-第11步。只是所用结合液和洗脱液均含变性剂，含变性剂的洗脱液配方见下表(以1mL为例)：

成分	含盐*(代"酸")胍洗脱液	含尿素洗脱液
1M Tri-HCl(pH7.9)	20μL	20μL
1M咪唑溶液	500μL	500μL
5M　NaCl溶液	100μL	100μL
盐*(代"酸")胍(MW=95.6)	0.57g	无
尿素(MW=60.1)	无	0.48g
自备去离子水	补水到1mL	补水到1mL

注意事项：整个实验需避免含巯基乙醇、DTT和EDTA等成分。若洗脱液不能将His标记蛋白洗脱下来，可改用pH6.5- 4.5的pH递减的Tris-HCl洗脱。

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