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小鼠TREML1检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒

产品信息
  • 特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

    小鼠TREML1检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒的品Pai:百奥莱博,是优质的小鼠ELISA试剂盒产品,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多小鼠TREML1检测试剂盒(ELISA方法)等小鼠ELISA试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。


    名称:小鼠TREML1检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒
    编号:ZN2789
    规格:96T
    英文名:Mouse Triggering receptor expressed on myeloid cells-like protein 1 ELISA Kit
    品Pai:百奥莱博
    产地:北京
    本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析小鼠血清、血浆、细胞裂解液或细胞培养上清中TREML1的含量。预先包被的抗体为TREML1单克隆抗体。检测相抗体为TREML1多克隆抗体,经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的TREML1呈正相关。

    检测指标:TREML1
    检测范围:15.6pg/ml~1000pg/ml
    特异性:系统和其它细胞因子无交叉反应
    敏感性:<1pg/ml

    产品组成:

     
    组分 规格 数量
    预包被抗小鼠TREML1抗体的96孔板 96T 1板
    重组小鼠TREML1标准品(冻干) 10ng/管 2管
    生物素标记抗小鼠TREML1(100X) 130μl 1管
    亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X) 130μl 1管
    样品稀释液 30ml 1瓶
    抗体稀释液 12ml 1瓶
    ABC稀释液 12ml 1瓶
    TMB显色液 10ml 1瓶
    TMB终止液 10ml 1瓶
    洗涤缓冲液(25X) 20ml 1瓶
    封板膜   4张


    储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)
    有效期: 6个月(4℃);12个月(-20℃)

    注意事项:
    1.使用前TMB显色液应为无色透明溶液,若发现颜色异常,请及时与我司联*(代"系")。
    2.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
    3.要严格避免操作过程中酶标板干燥。干燥会使酶标板上生物成份迅速失活。
    4.为免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和试管。
    5.禁止混用不同批次试剂盒内的试剂。
    6.本公司提供的96孔酶标板是单条可拆型酶标板,用户可按需求使用,剩余的酶标板请按保存条件贮存。
    7.揭封板膜和覆盖封板膜时应避免用力过大导致液体溅出。

    需自备的仪器和试剂:
    1.标准规格酶标仪。
    2.自动洗板机。
    3.恒温箱
    4.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,Z好用多通道移液器。
    5.干净的试管和Eppendof管。
    6.用去离子水将25X洗涤缓冲液稀释25倍,成1X洗涤缓冲液。

    参考标准曲线数据:(取自某一批次质检数据,仅供参考,用户需要自己建立标准曲线)
    浓度(pg/ml) 0 15.6 31.2 62.5 125 250 500 1000
    OD值 0.048 0.098 0.148 0.231 0.430 0.922 1.620 2.322


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    ·Heme Oxygenase 2/HO-2 mRNA原位杂交试剂盒
    编号:ZN0643
    规格:100T
    基本信息:
    保存条件:4℃保存一年
    工作量:100张切片。
    有效期:一年。
    适用种属:hμman
    标记方式:3’—尾段标记
    试剂盒中内容:
    1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
    2.预杂交液 2ml;
    3.Heme Oxygenase 2/HO-2 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
    4.封闭液 5ml;
    5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
    6.SABC-POD 5ml;
    7.生物素化过氧化物酶 5ml。
    用户自备试剂:
    原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
    缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
    一.培养细胞和冰冻切片
    准备工作:
    固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
    3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
    2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
    0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
    0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
    20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
    原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
    操作程序:
    注意:Z重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以YZRNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
    1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
    2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
    3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
    4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
    5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
    6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
    7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
    8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
    9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
    10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
    11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
    14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
    15.必要时苏木素复染,充分水洗。
    16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
    二.石蜡切片
    如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
    1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
    2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
    3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
    4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
    结果观察:
    Heme的细胞胞浆着色呈棕黄色。
    注意事项:
    由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。


    小鼠TREML1检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒关键词:Mouse Triggering receptor expressed on myeloid cel,ELISA方法,小鼠TREML1检测试剂盒(ELISA方法),ZN2789


    ·Western半干法转膜液(固体)(1×干粉)
    编号:ZN1899
    规格:1包
    产品保存:室温保存,一年有效。
    产品简介:
    Western 半干法转膜液是一种安全无毒的转膜液,没有使用剧毒的甲醇。配制 Western 半干法转膜液的方法非常便捷,不需要调节 pH值。本 Western 转膜液共 1 瓶,可以配制 1 升 Western 半干转膜液。
    使用说明:
    1.将 Western 转膜液的粉剂,倒入到一洁净的烧杯中,加入蒸馏水到约700 毫升,溶解。
    2.加入 200 毫升无水乙醇,混匀。
    3.定容到 1 升。混匀后即可使用,无需调节 pH 值。
    注意事项:
    1.配制好的半干法转膜液可室温或 4℃保存。如果颜色变成浅棕色或黄褐色,应丢弃。
    2.需使用分析纯级别及以上级别的乙醇。

    ·小鼠GITR配体(GITRL)检测试剂盒
    编号:ZN2780
    英文名称:Mouse Glucocorticoid-induced TNF-related ligand ELISA Kit
    规格:96T
    本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析小鼠血清、血浆、细胞裂解液、细胞培养上清中GITRL的含量。预先包被的抗体为GITRL多克隆抗体。检测相抗体为GITRL多克隆抗体,经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的GITRL呈正相关。

    GITRL属于TNF家族的成员,又称TNFSF18。GITRL在血管内皮细胞中表达,在外周组织中可以调节淋巴细胞的成活。此外,GITRL在淋巴细胞与内皮细胞的相互影响中起重要作用。

    检测指标:TNFSF18;GITRL;AITRL;GITR ligand;GITR配体
    检测范围:31.2pg/ml~2000pg/ml
    特异性:系统和其它细胞因子无交叉反应
    敏感性:<2pg/ml

    产品组成:
    组分 规格 数量
    预包被抗小鼠GITRL抗体的96孔板 96T 1板
    重组小鼠GITRL标准品(冻干) 10ng/管 2管
    生物素标记抗小鼠GITRL(100X) 130μl 1管
    亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X) 130μl 1管
    样品稀释液 30ml 1瓶
    抗体稀释液 12ml 1瓶
    ABC稀释液 12ml 1瓶
    TMB显色液 10ml 1瓶
    TMB终止液 10ml 1瓶
    洗涤缓冲液(25X) 20ml 1瓶
    封板膜   4张


    储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)
    有效期: 6个月(4℃);12个月(-20℃)

    参考标准曲线数据:(取自某一批次质检数据,仅供参考,用户需要自己建立标准曲线)
    浓度(pg/ml) 0 31.2 62.5 125 250 500 1000 2000
    OD值 0.076 0.094 0.115 0.162 0.267 0.520 1.009 2.063



    小鼠TREML1检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒关键词:Mouse Triggering receptor expressed on myeloid cel,ELISA方法,小鼠TREML1检测试剂盒(ELISA方法),ZN2789


    ·PH4/Transciptvariant1 mRNA原位杂交试剂盒
    编号:ZN1119
    规格:100T
    基本信息:
    保存条件:4℃保存一年
    工作量:100张切片。
    有效期:一年。
    适用种属:hμman
    标记方式:3’—尾段标记
    试剂盒中内容:
    1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
    2.预杂交液 2ml;
    3.PH4/Transciptvariant1 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
    4.封闭液 5ml;
    5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
    6.SABC-POD 5ml;
    7.生物素化过氧化物酶 5ml。
    用户自备试剂:
    原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
    缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
    一.培养细胞和冰冻切片
    准备工作:
    固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
    3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
    2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
    0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
    0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
    20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
    原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
    操作程序:
    注意:Z重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以YZRNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
    1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
    2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
    3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
    4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
    5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
    6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
    7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
    8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
    9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
    10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
    11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
    14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
    15.必要时苏木素复染,充分水洗。
    16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
    二.石蜡切片
    如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
    1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
    2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
    3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
    4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
    结果观察:
    PH4/Transciptvariant1的细胞胞浆着色呈棕黄色。
    注意事项:
    由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。



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