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北京人Serpin A4重组蛋白现货

产品信息
  • 特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产供应北京人Serpin A4重组蛋白现货,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:北京人Serpin A4重组蛋白现货
    品Pai:百奥莱博
    编号:ZN1708
    规格:100ng
    产地:国产|进口
    来源:大肠杆菌
    特异性:人
    应用:WB 阳性对照
    形态:冻干粉
    纯度:>98%,RP-HPLC&SDS-PAGE
    保存条件:-20℃保存 1 年以上,避免反复冻融。

    北京人Serpin A4重组蛋白现货正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:

    ·小鼠MIP-1α重组蛋白
    编号:ZN1783
    规格:100ng
    来源:大肠杆菌
    特异性:小鼠
    应用:WB 阳性对照
    形态:冻干粉
    纯度:>98%,RP-HPLC&SDS-PAGE
    保存条件:-20℃保存 1 年以上,避免反复冻融。

    ·NAG7 mRNA原位杂交试剂盒
    编号:ZN0945
    规格:100T
    基本信息:
    保存条件:4℃保存一年
    工作量:100张切片。
    有效期:一年。
    适用种属:hμman
    标记方式:3’—尾段标记
    试剂盒中内容:
    1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
    2.预杂交液 2ml;
    3.NAG7 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
    4.封闭液 5ml;
    5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
    6.SABC-POD 5ml;
    7.生物素化过氧化物酶 5ml。
    用户自备试剂:
    原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
    缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
    一.培养细胞和冰冻切片
    准备工作:
    固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
    3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
    2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
    0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
    0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
    20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
    原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
    操作程序:
    注意:Z重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以YZRNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
    1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
    2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
    3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
    4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
    5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
    6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
    7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
    8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
    9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
    10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
    11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
    14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
    15.必要时苏木素复染,充分水洗。
    16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
    二.石蜡切片
    如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
    1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
    2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
    3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
    4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
    结果观察:
    NAG7的细胞胞浆着色呈棕黄色。
    注意事项:
    由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。


    北京人Serpin A4重组蛋白现货关键词:百奥莱博,人Serpin A4重组蛋白,ZN1708

    ARB11588 人基质裂解素2(ST-2)检测服务 Human stromelysin-2,st-2 ELISA KIT
    2,4-二**氧乙酸* Dehydroascorbic acid 2702-72-9
    BFD014 鸭禽流感病毒抗体检测试剂盒
    BTN131001 AP标记的抗抗体 Anti DIG Ab,AP
    明胶水溶液(1%)   100ml
    CYB168017 小鼠血清 100ml/瓶
    ARB12291 大鼠抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)Elisa方法检测 Rat anti-cardiolipin antibody iga,aca-iga ELISA KIT
    PY02-362  脲(尿素)培养基  250克  
    KG203 快速DNA提取检测试剂盒
    59-02-9 (+)-α-Tocopherol(VitaminE) 维生素E
    ARB12315 大鼠吡*(代"啶")交联物(PY)含量检测 Rat pyridinium crosslink/pyrilinks,py ELISA KIT
    ARB14041 植物磷脂酰甘油(PG)Elisa方法检测 Plant phosphatidylglycerol,pg ELISA KIT
    ARB13516 鱼类主要组织相容性复合体(MHC)含量分析 Fish mhc ELISA KIT
    北京人Serpin A4重组蛋白现货关键词:百奥莱博,人Serpin A4重组蛋白,ZN1708

    BTN100214 预混型BCIP/NBT溶液 Premixed BCIP/NBT Solution
    肽酶 Tungstic acid
    蛋白酶K溶液(Proteinase K,20mg/ml)   1ml|5ml
    碳酸酐酶(牛红血球) Semixylenol Orange 9001-03-0
    ARB11113 人乳腺癌易感蛋白1(BRCA-1)酶免分析 Human breast cancer susceptibility protein 1,brca-1 ELISA KIT
    PY02-018  克氏双糖铁琼脂  250克  
    2′-脱氧腺苷 Bromocresol green 16373-93-6
    *黄酮 Linolenic acid 6051-87-2
    3-甲基吲哚 Protein A–Agarose 83-34-1
    胃粘膜素 p-Tolualdehyde 84082-64-4
    87-79-6 L-山梨糖 L-Sorbose
    0.5%酚红溶液   100ml
    菲啰嗪一*盐 NP-40 69898-45-9
    ARB10256 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ/CD26)elisa检测 Human dipeptidyl peptldase Ⅳ,dppⅣ ELISA KIT
    无菌双蒸水   100ml|500ml
    F010105 小鼠抗HIV(P24)抗体 Monoclonal Mouse Anti-HiV(P24)
    HC0298 八道可调半支灭菌移液器
    8042-47-5 Mineraloil   矿物油(石蜡油)
    PY02-379  大豆酪蛋白琼脂  250克  
    *化铷 11-Aminoundecanoic acid 7791-20-0
    ARB13149 小鼠神经丝蛋白(NF)酶标法分析 Mouse neurofilament protein,nf ELISA KIT
    盐*(代"酸")前黄素 TMD-10 952-23-8

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